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致死の農薬暴露の蜂蜜の蜂のコロニー レベルの効果を監視
致死の農薬暴露の蜂蜜の蜂のコロニー レベルの効果を監視
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JoVE Journal Biology
Monitoring Colony-level Effects of Sublethal Pesticide Exposure on Honey Bees

致死の農薬暴露の蜂蜜の蜂のコロニー レベルの効果を監視

Full Text
9,402 Views
10:35 min
November 15, 2017

DOI: 10.3791/56355-v

William G. Meikle1, Milagra Weiss1

1Carl Hayden Bee Research Center

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Summary

殺虫剤の致死量は定期的にまたは visual メソッドのみを使用して検出することは困難している方法で植民地に影響を与えます。合計大人蜂の質量を測定する方法ひな、およびハイブとハイブ部品の重量を量る、フレームを撮影し、センサーの取り付けによって食料資源を提供します。データ分析も解決されます。

Transcript

これらの手順の全体的な目標は、成虫のミツバチの質量とひなおよび食料資源の領域を使用してミツバチのコロニーの状態を客観的に定量化し、農薬への曝露に応答してコロニーの健康状態を測定することです。この方法は、ミツバチへの亜致死量の農薬曝露のコロニーレベルの影響など、ミツバチ科学における重要な質問に答えるのに役立ちます。この手法の主な利点は、成虫のミツバチの質量、雛の面積、および食料資源が視覚的に推定されるのではなく厳密に測定され、観察結果を再確認するために記録が保持されることです。

コロニーの撹乱を最小限にするための組織システムを開発しました。このプロセスには、迅速かつ効率的に作業することが重要であるという学習曲線があります。この手順が複雑なため、この方法を視覚的に示しておくと便利です。

巣箱のコンポーネントの重量を量り、フレームを撮影することは、コロニーへの侵入を減らすために体系的に行われます。ミツバチとの作業に適した環境条件がある場合は、常に巣箱の評価を実施してください。まず、未使用のハイブカバーなど、ハイブの横の平らな面に一時的な空のハイブボックスを配置して、女王が落ちた場合に女王を回収できるようにします。

次に、ハイブの蓋の重さを量り、存在する場合は内側のカバーの重さを量ります。次に、へらを使用して、フレームに載っているタンパク質サプリメントや害虫治療薬を取り出して計量します。これらの材料は保管し、評価の最後にフレームの上に交換します。

次に、すべてのフレームの順序と向きに注意して、消えないインクでマークします。次に、一時的なボックスにフレームを2つまたは3つのグループで迅速かつ穏やかに移し、ミツバチのクラスターの一部を保持します。すべてのフレームを移動したら、残りのミツバチを一時的なボックスのフレームに振ります。

次に、底板、ハイブボックス、入口レデューサーなど、ハイブの各部分を個別に計量します。すべての部品を計量した後、巣箱を組み立て直し、ミツバチの混乱を最小限に抑えながら、フレームを元の順序と向きでひな箱に戻します。次に、各フレームを個別に文書化します。

まず、クイーンのフレームを点検します。彼女が見つかった場合は、そっとひな箱に戻します。次に、働きバチをフレームから外して箱の中に静かに、しかししっかりと振り落とします。

可能であれば、フレームの間に挟むようにします。次に、アシスタントの助けを借りてフレームの両側を撮影します。キャップされた雛細胞と蜂蜜細胞を区別する画像を収集します。

ミツバチがいないフレームは、はかりに取り付けられたフレームホルダージグを使用して計量します。ハイブボックスから次のフレームを削除して続行します。再び女王を探し、他のミツバチを振り払います。

女王が今見つかった場合は、すでに評価されている巣箱の一部に女王を配置します。次に、文書化されたフレームを箱に戻し、新しく取り外したフレームの重量を量り、写真を撮ります。この方法ですべてのフレームを処理します。

ハイブに複数のボックスがある場合は、最も低いボックスを最初に評価します。その後、ボックスを再スタックするときは、その順序を維持してください。評価日の夜間や早朝など、最近の非アクティブな期間中のハイブの総重量を取得します。

成虫のミツバチの質量を計算するには、すべての巣箱の部分の重量を合計し、その合計を巣箱の総重量から差し引きます。この 2 つの違いは、成虫のミツバチの質量の推定値です。ハイブスケールは、常にしっかりした平らな面に設置してください。

100キログラムの容量を持つ屋外用電子ベンチスケールを使用し、24VDCインジケータおよび12ビットデータロガーと互換性があります。次に、巣箱の入り口の過度の光の反射と加熱を防ぐ材料でスケールパンを覆います。次に、はかりの最大容量の少なくとも半分の重量を使用してはかりを校正します。

このキャリブレーションを定期的に繰り返し、スケールが移動したときに必ずキャリブレーションを実行します。温度センサーには、バッテリー駆動のデータロガーに接続された熱電対、またはセンサーとデータロガーが統合された小型バッテリー駆動のデバイスを使用します。センサーとコンテナを保護して、ワックスとプロポリスから保護します。

ボックスの中央にあるトップバーのすぐ下にセンサーを取り付けます。短いワイヤーを使用して、保護されたセンサーをフレームの上部に接続します。ステープルは機能します。

一般的なサンプリング体制は、巣箱の少なくとも3つのスポットから3グラムのワックス、蜂蜜、ミツバチのパンを収集し、それらのコレクションを1つのサンプルに組み合わせることで構成されます。ワックスをサンプリングするには、50ミリリットルの遠心分離チューブを開き、空のコームのセクションを選択し、必要な量の最大が収集されるまで、コームに沿ってチューブの開いた口をこすり落とします。チューブをキャッピングしてラベルを付けるときは、チューブ内のワックスに触れないように注意してください。

蜂蜜または蜜をサンプリングするには、遠心分離管を開き、蜂蜜または蜜を含む櫛の部分にチューブの口を押し付けます。サンプル中のワックスの量を減らすために掻き取り技術を使用する代わりに、材料がチューブに流れ込むのを待ちます。ミツバチのパンをサンプリングするには、清潔なヘラを使用して、ミツバチのパンを含むいくつかの細胞の内容物を取り除き、材料を1つの遠心分離チューブに移します。

シロップで処理を適用するには、シロップをできるだけ早くフィーダーに注ぎ、他のコロニーのミツバチが見つける可能性のある巣箱の外にシロップをこぼさないように注意してください。imageJ では、ポリゴン ツールを使用して、コームで覆われたフレームの領域を定義します。次に、[分析]をクリックして[測定]を選択します。

新しいダイアログボックスがポップアップ表示され、定義された領域内のピクセル数が報告されます。キャップされた雛の領域を定義するには、フリーハンドツールを使用してそれらのセルを囲みます。次に、[分析]をクリックして[測定]を選択します。

病気などの要因により雛のパターンが固まらない場合は、代わりにマルチポイント選択ツールを使用して細胞をカウントします。各セルは約1/4平方センチメートルです。フレームの既知の領域を使用して、ピクセルを平方センチメートルに変換します。

これらの測定値から、ひな細胞が占めるフレームの面積と割合を計算します。成虫のミツバチの体重は、5ppmと100ppmの両方の亜致死濃度への曝露によって有意な影響を受けませんでした。ミツバチのコロニーの成長と季節学は、イミダコルプリドに曝露されたコロニー間で100ppmで雛の生産が有意に低いことを明らかにしました。

Hive の重量データは、25 時間の移動平均と、それらの平均からの時間ごとの分散で構成されていました。体重変化の日々の振幅は採餌活動に関連しており、したがって、コロニーの行動に関する情報を提供します。ハイブの温度は、連続温度データに適合する正弦曲線として報告されます。

曲線の振幅は、100 ppbの治療群で5ppbの治療群よりも有意に高かったが、どちらも対照群と有意差はなかった。このビデオを見た後、ミツバチの巣箱の個体数と資源を客観的に評価する方法を十分に理解しているはずです。習得すれば、完全なハイブ評価を15分以内に行うことができ、部分的な評価はさらに迅速に行うことができます。

この手順を試みるときは、ミツバチを含む巣箱の部分をぶつけたり落としたりしないように注意しながら、迅速かつ注意して作業することが重要です。これらの技術は、養蜂の研究者に、栄養、農薬への曝露、および害虫処理がコロニーレベルの成長と活動に与える影響を調査する研究で客観的なデータを取得する方法を提供するために開発されました。

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環境科学 問題 129 ハイブの評価 ハイブの重量 ハイブの温度 蜂蜜の蜂のコロニーのフェノロジー イミダクロプリド ネオニコチノイド系

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