Name: ラットにおける動物の不安をテスト: 腕が開いて棚とクローズド アームの効果壁透明性高架十字迷路試験 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-06-29T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 54 s
Description: 学ぶラットの不安測定法。高架十字迷路の腕構造と壁の透明性が、抗不安薬効果の検出感度に与える影響を解説。適切な装置設定で信頼性の高いデータ収集を実現する方法を紹介します。

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カスタマイズされた装置の生産に彼の援助の平野晃宏氏を感謝致します。著者は、その技術支援の高橋宏祐氏と中島信吾氏に感謝したいと思います。この作品は、化学物質のリスク、健康と研究所科学研究費補助金、厚生省、労働、福祉、日本 (H25-科学-IPPANN-003) と技術明治理工学研究所研究プロジェクト助成 A 研究によって支えられました。大学、日本。

ここで説明したすべての実験手順は、機関動物ケアと明治大学の使用委員会 (IACUC 14-0002(1)) によって承認されています。代表の結果に使用される動物は次のように準備された: 雄 Sprague-dawley ラットいた実験動物会社から購入し、少なくとも 1 週間の開始する前の標準的なラットのおり (W200 × D410 × H250 mm) あたり 4 動物のグループで収容、行動実験。光 (12:12 光/暗いスケジュール 10:00 h で点灯)、室温 (25.0 ± 0.5 ° C)、湿度 (55 ± 10%)、および換気のための標準的な環境で維持された動物飼育室 (10 回/h)、動物食品 (アドリブのアクセスがあったとオリエンタル酵母 (株)、東京都) と水。動物は、寝具 (アルファ-dri、LSG 雙東京都) 紙で標準ラット ケージ (W410 x D250 x H200 mm、Toyoriko 株式会社、愛知、日本) で保管されました。
1. 高架式十字迷路試験
<ol><li>高架プラスを設定カスタマイズされたコンテナー (W1, 500 × 500 × H2, 000 mm D1) 装置の迷路 (図 1 a) 十字型のメタル フレームワークの実行をサポートするための床の上の 500 の mm とコンテナー天井の照明方法腕 (図 1 b)必要な光の強さ (図 1)、および行動テスト (図 1) のライブ ビデオ監視を有効にするためにセンター天井のデジタル ビデオ カメラに迷路の表面を照らします。</li>
	<li>(L500 x W100 mm) 腕十字フレームワークの 4 つの腕の中心に広場中央のプラットフォーム (W100 x D100 mm) を固定し、(図 1 -F)。 注: 当研究室である両手を広げて (L500 x W100 mm) の 2 種類とクローズド アームの 2 種類 (x W100 x H450 ミリメートル L500) (図 1)。閉じた腕は、透明または不透明な壁 (図 1) を持って、短い棚 (図 1EH5 mm) の有無、開いた腕、設計されています。広場中央のプラットフォーム (W100 × D100 mm)、4 つの腕の中心部に配置されます (図 1 -F)。したがって、腕の次の 4 つの組み合わせを実験目的に応じて用意できます: オープン棚を武器 + 透明な壁 (棚/透明)、棚が開いて腕 + 不透明な壁 (棚/不透明) とクローズド アームを閉じた腕腕を開く棚 + 透明な壁 (なし-棚/透明) と閉じた腕と棚なし両手 + 不透明とクローズド アームなし (なし-棚/不透明) の壁します。腕滑走路の表面は黒より良い動物行動分析セクション 2 に記載されている、自動動作分析ソフトウェアでトレースを有効にします。</li>
	<li>約 100 ルクスにそれぞれの腕と中央のプラットフォームの遠位端部の表面の輝度を調整します。</li>
	<li>各テストの前に 70% エタノール溶液による全体の装置をきれいにし水で拭いてください。</li>
	<li>映像セクション 2、行動分析で説明する分析のためのラットの行動を記録するデジタル ビデオ カメラを起動するハード ディスク レコーダーの「録画ボタン」をクリックしてします。</li>
	<li>開かれた腕に直面して中央のプラットフォーム上動物を置き、5 分装置の自由探査を許可します。</li>
	<li>記録が終了するハード ディスク レコーダーの「停止ボタン」をクリックしてします。</li>
	<li>動物飼育室へテスト動物を帰国後糞便および排尿の数をカウントします。</li>
	<li>手順 1.4 から実験が終了するまで繰り返します。 注: 乾燥テストの実行は、常に実施実験のすべての設定が正しく設定されている任意の実験動物は実験条件にさらされる前にチェックする各実験を開始する前に。それ以外の場合、いくつかの動物、特に最初の動物はさまざまな環境条件 (例えば、おそらく以前にテストした動物に残されたであろう操作および/または動物のキューの中に実験者によって誘導されるノイズ) を経験があります。 注: 動物をテストするときは、実験者はコンテナーの近くです。したがって、実験者が表示されないにもかかわらずラットのにおいや音を介してそれらを感じることができるまだあります。</li>
</ol>2. 行動分析
注: 行動分析マニュアル観察によって実行され、自動解析ソフトウェア。
<ol><li>
手動観測
	<ol>
<li>棚に動物を配置すると、以下に従って: (腕にエントリは、すべて 4 足腕上にあるときに任意のインスタンスとして定義は) のエントリの数、各アームに費やす時間と伸ばして出席数姿勢開かれた腕に直面しています。、閉じた腕に向かって中央のプラットフォームからバックアップ中。</li>
		<li>ストップウォッチとコンテナーのドアが閉じているときから始まって、5 分間カウントした上定義された動作の期間と頻度を測定します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>
自動解析
	<ol>
<li>利用可能なソフトウェア プログラムを使用して以下を記録: 両手を広げて (中央のプラットフォームから、中間、近位および遠位セグメント) の旅、時間で過ごしたの異なる位置の距離と時間の 1 分ごとの分析はオープンに費やし、閉鎖腕。</li>
		<li>手動観測の開始と同時に自動解析ソフトウェアの「スタート ボタン」をクリックします (設定期間を記録した場合、記録が自動的に停止されます)。 注: 本研究に使用した行動解析ソフトウェアは、背景フィールドとそのコントラストによって動物を追跡します。固定のサイズが割り当てられている動物は明るいオブジェクトとして識別され、動物追跡のため、その中心点の移動がこうして使えます。</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Nestler, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+the+Brain%27s+Reward+Circuitry+in+Depression%3A+Transcriptional+Mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Rev+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Role of the Brain's Reward Circuitry in Depression: Transcriptional Mechanisms.</a> Int Rev Neurobiol. 124, 151-170 (2015).</li>
<li>Crabbe, J. C., Wahlsten, D., Dudek, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetics+of+mouse+behavior%3A+interactions+with+laboratory+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Genetics of mouse behavior: interactions with laboratory environment.</a> Science. 284 (5420), 1670-1672 (1999).</li>
<li>Handley, S. L., Mithani, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+alpha-adrenoceptor+agonists+and+antagonists+in+a+maze-exploration+model+of+%27fear%27-motivated+behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22Naunyn+Schmiedebergs+Arch+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Effects of alpha-adrenoceptor agonists and antagonists in a maze-exploration model of 'fear'-motivated behaviour.</a> Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 327 (1), 1-5 (1984).</li>
<li>Pellow, S., Chopin, P., File, S. E., Briley, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+open%3Aclosed+arm+entries+in+an+elevated+plus-maze+as+a+measure+of+anxiety+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Validation of open:closed arm entries in an elevated plus-maze as a measure of anxiety in the rat.</a> J Neurosci Methods. 14 (3), 149-167 (1985).</li>
<li>Violle, N., Balandras, F., Le Roux, Y., Desor, D., Schroeder, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variations+in+illumination%2C+closed+wall+transparency+and%2For+extramaze+space+influence+both+baseline+anxiety+and+response+to+diazepam+in+the+rat+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Variations in illumination, closed wall transparency and/or extramaze space influence both baseline anxiety and response to diazepam in the rat elevated plus-maze.</a> Behav Brain Res. 203 (1), 35-42 (2009).</li>
<li>Hogg, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+the+validity+and+variability+of+the+elevated+plus-maze+as+an+animal+model+of+anxiety%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">A review of the validity and variability of the elevated plus-maze as an animal model of anxiety.</a> Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 21-30 (1996).</li>
<li>Martinez, J. C., Cardenas, F., Lamprea, M., Morato, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+vision+and+proprioception+in+the+aversion+of+rats+to+the+open+arms+of+an+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Processes%22%5BJournal%5D)">The role of vision and proprioception in the aversion of rats to the open arms of an elevated plus-maze.</a> Behav Processes. 60 (1), 15-26 (2002).</li>
<li>Anseloni, V. Z., Brandao, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ethopharmacological+analysis+of+behaviour+of+rats+using+variations+of+the+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Ethopharmacological analysis of behaviour of rats using variations of the elevated plus-maze.</a> Behav Pharmacol. 8 (6-7), 533-540 (1997).</li>
<li>Anseloni, V. Z., Motta, V., Lima, G., Brandao, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+pharmacological+validation+of+the+elevated+plus+maze+constructed+with+transparent+walls%5BTitle%5D)+AND+%22Braz+J+Med+Biol+Res%22%5BJournal%5D)">Behavioral and pharmacological validation of the elevated plus maze constructed with transparent walls.</a> Braz J Med Biol Res. 28 (5), 597-601 (1995).</li>
<li>Hagenbuch, N., Feldon, J., Yee, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+elevated+plus-maze+test+with+opaque+or+transparent+walls+in+the+detection+of+mouse+strain+differences+and+the+anxiolytic+effects+of+diazepam%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Use of the elevated plus-maze test with opaque or transparent walls in the detection of mouse strain differences and the anxiolytic effects of diazepam.</a> Behav Pharmacol. 17 (1), 31-41 (2006).</li>
<li>Fernandes, C., File, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+open+arm+ledges+and+maze+experience+in+the+elevated+plus-maze%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">The influence of open arm ledges and maze experience in the elevated plus-maze.</a> Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 31-40 (1996).</li>
<li>Horii, Y., Kawaguchi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Higher+detection+sensitivity+of+anxiolytic+effects+of+diazepam+by+ledge-free+open+arm+with+opaque+walled+closed+arm+elevated+plus+maze+in+male+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Higher detection sensitivity of anxiolytic effects of diazepam by ledge-free open arm with opaque walled closed arm elevated plus maze in male rats.</a> Behav Brain Res. 294, 131-140 (2015).</li>
<li>Santos, R. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+the+effect+of+acute+sibutramine+in+female+rats+in+the+elevated+T-maze+and+elevated+plus-maze+tests%5BTitle%5D)+AND+%22Basic+Clin+Pharmacol+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Evaluation of the effect of acute sibutramine in female rats in the elevated T-maze and elevated plus-maze tests.</a> Basic Clin Pharmacol Toxicol. 114 (2), 181-187 (2014).</li>
<li>Lynn, D. A., Brown, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ontogeny+of+anxiety-like+behavior+in+rats+from+adolescence+to+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">The ontogeny of anxiety-like behavior in rats from adolescence to adulthood.</a> Dev Psychobiol. 52 (8), 731-739 (2010).</li>
<li>Horii, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Male+Hatano+high-avoidance+rats+show+high+avoidance+and+high+anxiety-like+behaviors+as+compared+with+male+low-avoidance+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Anim%22%5BJournal%5D)">Male Hatano high-avoidance rats show high avoidance and high anxiety-like behaviors as compared with male low-avoidance rats.</a> Exp Anim. 61 (5), 517-524 (2012).</li>
<li>Walf, A. A., Frye, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+the+elevated+plus+maze+as+an+assay+of+anxiety-related+behavior+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">The use of the elevated plus maze as an assay of anxiety-related behavior in rodents.</a> Nat Protoc. 2 (2), 322-328 (2007).</li>
<li>Yang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+pharmacological+investigation+of+anxiety+and+maternal+responsiveness+of+postpartum+female+rats+in+a+pup+elevated+plus+maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Behavioral and pharmacological investigation of anxiety and maternal responsiveness of postpartum female rats in a pup elevated plus maze.</a> Behav Brain Res. 292, 414-427 (2015).</li>
<li>Albani, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavior+in+the+elevated+plus+maze+is+differentially+affected+by+testing+conditions+in+rats+under+and+over+three+weeks+of+age%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Behavior in the elevated plus maze is differentially affected by testing conditions in rats under and over three weeks of age.</a> Front Behav Neurosci. 9, 31(2015).</li>
</ol>

著者が明らかに何もありません。

、不安障害などの精神疾患を患っている患者の数が増えるにつれて、不安の基本的なメカニズムの理解を改善する最先端研究を推進することが重要です。そのためには、実験の手順を最適化するために重要なまたです。したがって、改善アプリケーションの高架十字迷路試験、ラットを用いた実験的成果に及ぼすアーム機能を示しています。
高架プラス迷路に開業いたしました、齧歯動物第4動物の不安をテストするのには、基本的な構造は通常一貫した (例えば、500 mm プラスの形をした床の上を高架) が、様々 なアーム デザインよく使わ。もともと、装置棚なし両手を広げてから成り、木製の不透明な壁と腕を閉じた。しかしより最近開いた腕は棚が落下装置、動物を防ぐために開発されている、閉じた腕は、閉じた腕上の挙動観察を容易にするために透明な壁で開発されています。しかし、これらの高架式の実験成果にアーム機能十字迷路試験の併用効果を対処報告はいません。ように我々 の結果、腕が開いて棚の存在およびラット (図 2</stron...

気分障害、不安障害、うつ病などを患っている患者の数は増加しています。これらの無秩序の開発は遺伝と環境の要因がありますが、詳細な発症メカニズムは、まだ完全に理解1。したがって、研究では、副作用が少ない効果的な薬の開発と同様に、気分障害のメカニズムの覆いを取るに焦点を当てる必要があります。
実験動物の行動テスト、脳の高次機能、感情などを調査するため便利です。動物の行動は非常に変数、実験結果しばしば間で異なる所場合でも同一交は使用される2。したがって、研究者はまた彼らを研究室では、信頼性の高い、正確な結果を提供するために採用する実験装置の基本的な機能を理解する必要があります。
高架プラス迷路テストに開業いたしました齧歯動物3,4に感情的な反応を調べる。全体の器具は床の上にある通常の 500 mm し、から成っている 2 つのオープンとプラスの形を作る 2 つの閉じた腕。腕探査 (それぞれの腕にエントリの期間と頻度を含む)、測定距離旅と指定した動作を受ける動物のストレッチ参加姿勢は観測期間中に記録されたよう。これらの措置により動物の不安は、実験結果として推定されます。
高架プラス迷路テストは、世界中で使用されているが、すべてではない所を使用して、同じ装置デザイン5,6とこれらの違いが実験結果に影響を与えます。相違点には、存在や開いた腕に沿って棚の不在および/または閉じた腕5,6透明または不透明な壁の使用が含まれます。腕に沿って棚を開き閉じた腕の透明な壁の使用が動物装置7、落下を防止し、閉じた腕、それぞれ8,9内行動の観察を容易にするために開発されました。動物の不安1,2,5,10,11 を検出する能力に影響を与えるかもしれないどのように個々 の腕の構造の違いを検討するいくつかの研究をされているがあります、動物の行動 (短い出っ張りの有無にかかわらず) オープンとクローズド (透明/不透明な壁) 腕機能の複合的影響がまだ調査されていません。
最近の報告では、これらのラット12の不安様行動の腕デザインの組み合わせの効果を説明しました。簡単に言えば、オープン アーム棚は、透明な腕は可能性がありますもこの現象を減少している間に、ラットの不安様行動を増大させます。さらに、いいえ ledged オープン アーム + ledged オープン アーム + 透明な壁に囲まれたクローズド アームの組み合わせと比較して不透明な壁に囲まれたクローズド アームの組み合わせで抗不安薬の効果の高い検出感度を検証しました。本報告で我々 は、高架式のため私たちのプロトコルをご紹介プラス前のレポートから主要な結果の議論とテストを一緒に迷路が。このレポートは、これらの人を採用しているまたは高架を使用プラス迷路の学習の方に有用な情報を提供すると考えています。

<table><tbody><tr><td>カスタマイズコンテナ(W1500 &times;D1500 &times;H2000 mm)</td><td>NA</td><td></td><td>NA 平野明弘氏手作り</td></tr><tr><td>照明</td><td>NA</td><td>NA</td><td>平野明弘氏手作り</td></tr><tr><td>高架プラス迷路装置</td><td>NA</td><td></td><td>NA 平野明弘氏手作り</td></tr><tr><td>デジタルビデオカメラ</td><td>Watec</td><td>WAT-250D2</td><td>ハードディスクレコーダーには、トラッキングプロファイルを記録するためのビデオカメラを取り付けることができます。</td></tr><tr><td>ハードディスクレコーダー</td><td>東芝</td><td>RD-R200</td><td>デジタルビデオカメラには、適切なハードディスクレコーダーを取り付けることができます。</td></tr><tr><td>Sprague-Dawley rats</td><td>チャールズリバーラボラトリーズジャパン株式会社</td><td>NA</td><td>あなたの研究に適したラットであれば、</td></tr><tr><td>標準的なラットケージ</td><td>豊里子</td><td>TP-105</td> あなたの<td>研究に適したラットケージを使用することができます</td></tr><tr><td>光強度を測定する機器</td><td>AS ONE</td><td>1-5818-02</td><td>光強度を測定するための任意の適切な機器</td></tr><tr><td>EthoVision XTバージョン8.0</td><td>ノルダス</td><td>NA</td><td>動物の行動を測定するための任意の適切なソフトウェア</td></tr><tr><td>ジアゼパム</td><td>太陽薬品工業</td><td>1124402A2061</td><td>研究に適した薬剤であれば何でも使用可能</td></tr><tr><td>Tween 80</td><td>和光純薬工業</td><td>9005-65-6</td> 適切な<td>薬剤を試験に使用できます</td></tr></tbody></table>

ラットにおける動物の不安をテスト: 腕が開いて棚とクローズド アームの効果壁透明性高架十字迷路試験

Testing Animal Anxiety in Rats: Effects of Open Arm Ledges and Closed Arm Wall Transparency in Elevated Plus Maze Test

高架プラス迷路テストは齧歯動物の動物の不安を評価するための行動テスト。ただし、このテストは行動科学の分野で広く適用される競合する成果は頻繁に異なった実験室から与えられます。異なる結果の理由を識別するために我々 は以前特に有無開いた腕の側面とクローズド アーム壁の透明性/不透明で棚の所、ほとんどの間で異なる腕の機能に焦点を当てた。以前の報告では、我々 はオープンとクローズド アーム デザイン以外同一の実験条件下でのさまざまな組み合わせでのラットの行動を比較するカスタム設計されたコンテナーを使用してと腕機能の違いが実験を妨げることを示した成果。簡単に言えば、オープン アーム棚は、透明な腕は可能性がありますもこの現象を減少している間に、ラットの不安様行動を増大させます。さらに、いいえ ledged オープン アーム + ledged オープン アーム + 透明な壁に囲まれたクローズド アームの組み合わせと比較して不透明な壁に囲まれたクローズド アームの組み合わせで抗不安薬の効果の高い検出感度を検証しました。本報告では、私たち高架のためのプロトコルに加えて、前回のレポートと実験的経験から主要な結果の議論と一緒に、迷路テストを紹介します。このレポートは、人を採用している、または高架式を使用して、さらに勉学の迷路人計画の研究者にとって有用な情報を提供すると考えています。

以前の研究では、腕が開いて棚の併用効果とクローズド アームの壁12迷路探索行動の透明性を比較しました。ラットは大幅棚が開いて腕により棚なし開いて腕にはるかに少ない時間を費やして (F [1, 60] 13.49、 P = = 0.0005) (図 2 a)。開いて腕の中にエントリ数を同様の結果であった (F [1, 60] 11.17、 P = &lt; 0.0014)12棚の存在が開いて腕にラット探索行動を高めることを示唆しています。ラットは大幅不透明な壁に腕を閉じていた装置により透明な壁に腕を閉じていた装置の少ないストレッチ参加姿勢を示した (F [1,60] 4.03、 P = = 0.0492) (図 2 b)、ことを示唆します。クローズド アームを透明な壁は、ラットの不安様行動を減少しました。ラッ...

ラットの不安様行動テスト高架プラス迷路が高いテストの環境によって異なります。ここで、迷路の動作に影響を与える機器設定、特に腕構造を示すし、抗不安薬の効果を検出するための信頼性の高いプロトコルについて述べる。このレポートは、不安の研究に貢献します。

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral ...

この実験の全体的な目標は、適切な上昇したプラス迷路を使用して、ラットの不安を測定することです。この研究の主な発見は、高架クロス迷路装置の特徴によって、抗不安薬効果の検出感度が変化する可能性があることです。この研究は、研究者が実験目的に適した迷路装置を実験室に設置し、データの優れた記録を確保するのに役立ちます。その手順を実演していただくのは、私の研究室からのゲスト研究員です。まず、カスタマイズされたクローゼットコンテナに高架プラス迷路装置をセットアップします。迷路のプラス形の金属フレームワークは、床から約半メートル高くする必要があります。迷路全体で必要な強度で一貫した明るさを維持します。オーバーヘッドセンターポイントにデジタルビデオカメラを取り付けて、テストを記録および監視します。次に、迷路のアームをフレームワークに固定します。オープンアームには、側面に沿って5MMの棚がある場合とない場合の2種類があります。また、両手を閉じた状態には2種類あります。壁は半透明または不透明にすることができます。アームの間に正方形の中央プラットフォームを取り付けます。中央のプラットフォームと迷路のアーム滑走路の表面は、自動化された行動分析による動物の追跡を改善するために黒色に着色されています。アームを装着した状態で照明の強度を調整すると、各アームの遠位端部分の表面と中央のプラットフォームに約100ルクスができます。各テストの前に、装置全体を70%エタノール溶液で洗浄し、蒸留水で拭き取ります。ハードディスクレコーダーの録画ボタンをクリックして、デジタルビデオカメラからの画像の収集を開始します。機器が機能している場合は、テストを実施します。ラットを中央のプラットフォームに置き、開いたアームを向くようにしてテストを開始し、クローゼットのドアを閉じます。その後、装置を5分間自由に探索します。実験結果は、ラットが開いた腕を向いて評価されるか、交差した腕を向いて評価されるかによって異なる場合があります。閉じたアームに初めて入るときは、常に開いたアームに休んでいるラットを、凍結を防ぐために開いたアームに置いておくことをお勧めします。5 分後、録画を停止してテストを終了します。次に、ラットをケージに戻し、迷路内の糞便と排尿の数を数えてから掃除します。行動分析は、常に手動観察ソフトウェアと自動分析ソフトウェアの両方を使用して行ってください。ビデオから、ネズミが迷路の腕に入力するエントリの数を手動で記録します。エントリは、4 つの前足すべてが腕にある任意のインスタンスとして定義されます。また、各腕で費やした時間と、ラットが開いた腕を向いて中央のプラットフォームに座り、閉じた腕に背を向けている間に行われたストレッチされた出席姿勢の数も記録します。5分間のテスト中にストップウォッチとカウンターを使用してこれらの測定を実行します。自動分析を実行するには、商用ソフトウェアプログラムでビデオ録画を開きます。ソフトウェアは、動物と暗い床のコントラストを使用して、迷路上の動物を追跡します。最初に動物を特定のサイズのコントラストブロブに割り当て、次にブロブの中心をトラッキングポイントとして割り当てます。次に、5分間のテストでは、移動距離、開いた腕でさまざまな位置で費やした時間、開いた腕と閉じた腕で費やした合計時間をソフトウェアに記録してもらいます。自動分析では、アームズへのエントリーと非エントリーを区別できない場合があります。そのため、自動解析に加えて、常に手動観察を行うことを推奨します。開いた腕と閉じた腕のデザインが異なる高架プラス迷路でのラットの探索行動の結果は、ラットが棚のない開いた腕よりも、開いた腕に棚がある方が長いことを示しています。また、それらのアームへのエントリーも多かったため、レッジは開いたアームでの探索行動を増加させる可能性があります。ラットは、透明な壁のある閉じた腕では、不透明な壁のある閉じた腕よりも、伸びた付き添いの姿勢が有意に少なかった。透明な閉じた腕壁が不安のような行動を減らしたことを示唆しています。ラットはまた、閉じた腕が透明な壁を持っている場合、閉じた腕が不透明な壁を持っている場合よりも、開いた腕の遠位部分に多くの時間を費やしました。さらに、遠位開腕の探索は、棚がなく不透明な腕の組み合わせがある迷路では、棚と透明な腕の組み合わせよりも有意に低かった。したがって、検出感度は、使用するアーム設計の組み合わせに応じて変更される可能性があります。異なるタイプのアームデザイン間の検出感度の違いを確認するために、抗不安薬ジアゼパムを使用してさらに実験を行いました。簡単に説明すると、高用量ジアゼパム治療の効果は、レッジのない不透明な壁装置では検出されましたが、レッジのある透明な壁装置では検出されませんでした。この手順を試行する際には、すべての動物を同じ実験条件下で治療すること、および各テストの開始時にすべての動物が同じ開いた腕または閉じた腕を向いて配置されていることを確認することを忘れないでください。このビデオを見た後、高架クロス迷路装置のセットアップ方法を理解できるはずです。実験結果はアームのデザインによって異なる可能性があることを覚えておくことが重要です。そのため、実験目的に適したアームを使用することをお勧めします。

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Research

JoVE Journal

Behavior

行動

高架式十字迷路試験は、マウスの不安様行動を測定するための最も広く使用されている試験の一つです。ここで、我々はテストを実施するための詳細な手順を示す映像を提示する。...

マウス用高架式十字迷路

プラス迷路対策げっ歯類における不安様行動。閉じた二つの対向すると二つの正反対の開いた腕がありますが、心配なげっ歯類では、開いた腕を避ける。中央のエリアは完全にオープンでもクローズドでもないので、ここで過ごした時間があいまいと解釈することは困難である。ここでは、この領域を排除プラス迷路プロトコルの変形例について説明する。...

マウスおよびラットにおける不安の連続路地テスト

脳腫瘍の放射線治療管理に起因する認知機能障害に悪影響生活の質に影響を与える臨床的に難治性の状態を表します。批判的に放射線誘発性認知デクリメントを改善するための潜在的な介入を評価する能力は、最終的に認知の厳格な定量的な評価を実施する能力に依存します。...

頭蓋放射線療法によって引き起こされた定量認知デクリメント

ドライランドバーンズ迷路が広く穏やかに嫌悪刺激に応答して、空間ナビゲーション能力を測定するために使用される。連続した日に、対照被験者のパフォーマンス（エスケープケージを配置するなどの待ち時間）は、通常の学習と記憶の指標を向上させます。ラットとマウスの違いはここに詳述されている装置および方法論の変更を必要とする。...

小型·大齧歯類モデルとバーンズ迷路テスト戦略

マウスにおける自発運動と不安様行動を測定するために、オープンフィールド迷路の利用

ここでは、齧歯類の動物モデルの不安レベルの変化を調査するためのプロトコルを提案する.高架式十字迷路 (EPM) テスト、追跡ソフトウェア、ビデオと併用は前臨床研究所では様々...

高架プラス迷路外因性ケト原性サプリメントの抗不安薬の効果を調べるためのソフトウェアを追跡するビデオと組み合わせてテスト

特定の神経集団や脳領域の光遺伝学的操作により、自由に動く動物の高い時間的および空間的分解能で行動を修正することができる。慢性に埋め込まれた光ファイバーと組み合わせて異なる光遺伝学的ツールを使用することにより、さまざまな神経変調および行動検査を行うことができます。...

自由に動くマウスの行動を調節する神経活動の光遺伝学的操作

ここで紹介するのは、野生型C56BL /...

社会的孤立モデル:ストレスと不安の非侵襲的げっ歯類モデル

この原稿は、アンジェルマン症候群マウスモデルを検証するための再現性の高い行動テストのセットを提示します。...

アンジェルマン症候群モデルマウスの行動特性

このプロトコルは、モンゴルの医学理論に基づくうつ病の慢性予測不可能な軽度のストレス(CUMS)モデルを概説し、行動テストを検証するための方法も示しています。...

モンゴル医学に基づくラットの慢性予測不能軽度ストレス

学ぶラットの不安測定法。高架十字迷路の腕構造と壁の透明性が、抗不安薬効果の検出感度に与える影響を解説。適切な装置設定で信頼性の高いデータ収集を実現する方法を紹介します。

ラットにおける動物の不安をテスト: 腕が開いて棚とクローズドアームの効果壁透明性高架十字迷路試験

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ラットにおける動物の不安をテスト: 腕が開いて棚とクローズド アームの効果壁透明性高架十字迷路試験

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ラットにおける動物の不安をテスト: 腕が開いて棚とクローズドアームの効果壁透明性高架十字迷路試験