Name: 腰部後根神経節のアクセスと豚注入の椎 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-10-10T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min
Description: 学ぶ腰部後根神経節へのアクセスと薬液注入法。豚を用いたラミノトミー手術で、対流増強送達針を使いDRGに直接投与します。術中モニタリングと組織学的確認により、前臨床神経科学研究における薬剤効果評価の信頼性を高めます。

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研究は (A.S.B.) にシュルツ財団が支援を行った。

ここで説明したすべてのメソッドは、機関動物ケアおよび使用委員会 (IACUC) メイヨー クリニックのによって承認されている。
 1 前提条件の厳しさと再現性 設計の厳しさを確保するため、良い研究所プラクティスはすべての回で、任意の動物の前に IACUC (または同じような委員会) の内部承認の国家基準に従うに <ol><li>。実験で関与します 。
	注: このプロトコルは、臨床的に忠実なアプローチを維持するために設計されました。したがって、材料・機器・技術は、ヒトでの最高臨床基準と同一の方法で説明します。たとえば、厳密な無菌が続いて、期限切れの材料を使用しないでください</li>。
	実験の設定でこの手法の再現性をサポートする <li>内部標準の運用手順を開発し、豚の品種、体重、性別、および別のコホート間の年齢の変動性を制御します 。
	注: このプロトコルの設計は 38-53 キロの重量を量る豚の使用に基づいていた</li>
</ol> 2。術前動物愛護 <ol><li>手続きの前に 1 日 5 mg/kg で与えられる予防の筋肉 (IM) セフチオフルを管理します</li>。
	<li>固体食糧の動物を高速し、美容トリートメント、オイルの浴室 つまり、前の手順 12 h から動物を制限します</li>。
	<li>IM チレタミンとチレタミン、5 mg/kg で IM キシラジン、2 mg/カットで与えられる Telazol として与えられるを使用して、プロシージャの 1 h 内誘導全身麻酔</li>
	<li>誘導、一度管理 0.18 mg/カットで与えられた皮下 (SC) 持続ブプレノルフィン リリース (SR)</li>
	<li>耳静脈カテーテルを置き、急速なシーケンス挿管気管内チューブを配置するを実行します</li>。
	<li>、パルスオキシメータの心拍数監視機能酸素濃度と心拍数を監視する舌に付います</li>。
	<li>は腹臥位で動物を置き電気クリッパーを使用して背部に皮膚をクリップします。正中線のコロナの平面、正中矢状面と縦肩甲骨の棘、仙骨アペックスからの拡張の大きな二国間の領域上の髪をクリップします。粘着テープを使用して髪とフローティング皮膚削除します</li>。
	<li>暖かい水と石鹸で最大 3 回のクリップされた領域をスクラブし、乾燥肌を糸くずなしのタオルを使用しています</li>。
	<li>マーク二国間の解剖学的ランドマークは、外科用マーカーを使用しています。最後の肋骨、腸骨稜、棘突起、横突起をマークします 。
	注: 最後の肋骨、腸骨稜および横突起をマークすることによって腰椎が画定、スーペリアー、劣っていると横方向の境界に沿ってそれぞれ。このプロトコルは、アクセスと関心の任意の腰部後根神経節の注入を導くために設計されています。参考のため優れた腸骨稜に揃えて L3 または L4 椎</li>。
	<li>手術のスイートへの輸送のための暖かい毛布と動物をカバーします</li>。
</ol> 3。手術群位置決め <ol><li>優しくリフトと変更された大規模な動物愛護動物に位置しやすい動物スリング パッドを入れられた腹部の開口部と 。
	注: 腹部の開口部により、腹部圧力の低減のため背骨の人間の手術中に使用するウィルソン フレームのよう。ターンでは、これは脊髄の血管から術中出血を減少します。スリングは、足は末梢神経衝突から動物を保護するパッド入りの開口部を通して自由にハングできるため便利です。ただし、スリング フレームは金属製、ので、絶縁電気短絡および不注意な動物焼跡を避けるためにパディングされます必要があります。ブランケッ トロールは動物の大きさによって、快適なポジションで頭と首の位置に配置できます</li>。
	1-3% を使用して <li>維持麻酔吸入効果に滴定 (IH) イソフルラン。眼軟膏で目を湿らせて、軽くテープでシャット ダウンします</li>。
	<li>ドキュメント体温、血圧、心拍数、酸素にバイタル サインを監視するための場所のライン。カプノグラフィーによる換気を監視します</li>。
	<li>左または右の肩甲骨上接着剤、使い捨て電気分散電極を配置します</li>。
	<li>管理温めて一日リンガー &#39; 耳静脈カテーテルを通してメンテナンス流体として s。5-10 mL/kg の割合で水分を与える/h.</li>
	<li>胸部と頸部領域に強制空気地球温暖化装置を置き、最後の肋骨が隠れないようにします</li>。
</ol> 4。左サイドの注入のため術野の無菌調製 注: このポイントから厳密な滅菌方法で進む。
<ol><li>、メーカーによると、0.7% ヨウ素 povacrylex と 74% イソプロピル アルコールの幅広いアプリケーションで腰椎始まるを覆う皮膚の準備 &#39; の指示。ガイド針を滅菌方法で配置後でできるためには、過去のマークの横突起正中線のコロナの平面に向かって消毒を拡張することによって投入の側にアプリケーションをえ</li>。
	<li>マーク腰椎棘突起に沿って正中線を越える予定切開部位の概要と長方形の方法で使い捨て手術用タオルを配置します</li>。
	<li>適用接着剤抗菌切開手術のタオルの上に羽織るし、肌を露出しました。場所でカーテンをクランプし、術野をカーテンの端を拡張します</li>。
	<li>スリングの頭で術野と監視の技術者間の極に縦のドレープをセキュリティで保護します</li>。
	<li>セキュア ライン吸引と滅菌ドレープをクランプで術野内スネア。滅菌フィールドからチューブ、ワイヤの端を渡します</li>。
</ol> 5。皮膚の切開し、骨膜下郭清 <ol><li>正中線に沿って腰椎棘突起を触診し、3 連続する椎体のレベルを識別します</li>。
	<li>では、#15 メスを使用して、棘突起に直接後方切開ドレープを 8-12 cm 正中矢状切開を開きます。ガーゼ タンポナーデとモノポーラ電気を使用して止血を維持します 。
	注: これは傍脊柱筋群からの出血を制限されているため、切開は前方方向で先進的な正中線から逸脱していない注意する必要があります。棘突起の定期的な触診は、進歩を促進します。Weitlaner、Meyerding、または Gelpi のリトラクターを自己保持可能性がありますが配置され、解体を容易にするために必要に応じて位置を変更します。吸引は可視性を維持するために使用されます</li>。
	<li>は、皮下組織、胸腰部の筋膜に達するまでモノポーラ電気を使用して脂肪を解剖します。腰部の筋膜に深く棘突起を触診し、棘突起と棘上靭帯スパニングを公開する正中線に沿って筋膜をカットします 。
	注: 胸腰部の筋膜は、内側方向に横、斜めに起こして結合組織粒組織、腱の鞘として識別されます。この時点で、切開は郭清、フィールドの中央に配置されます両側棘突起と棘突起の 3 が完全に表示されるようにする優れたまたは下の方向に延ばされるかもしれない</li>。
	<li>は、棘上靱帯を介して 2 mm 深矢状切開を各棘突起の後方に配置するのに #15 のブレードを使用します。棘突起の後面の左 3 分の 1 に沿って各切開を配置します</li>。
	<li>優しくリリース各株式会社に沿って、各レベルで棘上靱帯5 mm より自由なエレベーターを使用して ision</li>。
	<li>骨膜下の平面を識別し、各棘突起の外側面に沿ってその平面内で解剖します</li>。
	<li>骨膜下郭清を行うように穏やかな並行でそれぞれの棘突起でも郭清を実現します</li>。
	<li>切開骨膜下郭清とのコンサートでモノポーラ電気を使用して棘間のスペースに沿って傍脊柱筋の添付ファイル</li>。
	<li>各レベルのラミナを識別し、横 3 露出した脊椎を接続 2 椎間関節の外側の縁に到達して、パルスと呼ばれる関節間板の外側の縁に到達する骨膜下郭清を続ける間部 。
	注: 重量挙げ、前記、後根神経節が存在する椎間孔の後縁。時折、小静脈は板の後面にある孔から発生します。これらの静脈は、骨膜下の解剖時に破裂する傾向を持っています。バイポーラ電気手術と孔に適用される骨ワックスの組み合わせを使用して簡単に止血します</li>。
</ol> 6。シングル レベル椎 <ol><li>の間に位置し、2 椎間関節の内側、両側板として椎弓切開術のターゲットを識別します</li>。
	<li>尾椎間関節のポイントだけ連続する下関節突起の内側に、下の端まで板をトレースします</li>。
	<li>薄層や中央運河の caudalmost エッジの間の遷移を触診して 5 mm より自由なエレベーターやキュレットを使用しています 。
	注: 硬膜嚢と脊髄の連絡先がこの前触診の楽器が無理に注意です。豚の脊髄腰椎 18 を超えることに注意。触診を容易にするためにこの領域を覆う軟部組織の追加を削除する椎間板 rongeur を使用できます</li>。
	<li>使用、2 mm をかむ癖、45 度 Kerrison rongeur 層状堆積方法で骨を抽出します。レベルだけ茎の尾表面に尾を上方に棘突起の基本に沿って骨を外し、横方向をその完全な範囲にします</li>。
	<li>使用角度、骨骨の除去を支援する rongeurs です。ままに、椎弓切開術は主に完了までの場所で板に接続されていた下関節プロセス</li>。
	<li>では、椎間関節包だけで、下関節プロセスは自由に携帯電話と接続されていることを確認してください。#15 または #11 刃を使用してカプセルを切開します</li>。
	<li>層状堆積方法で下関節プロセスを削除、隣接する関節突起をそのまま 。
	注: 椎弓切開術が完了すると、止血がバイポーラ電気手術で実行されます。モノポーラ電気は神経構造の近接のため使用されません。露出した骨からの出血のサイトに沿って骨ワックスを配置できるし、吸収性ゼラチン スポンジを使用して、軟部組織に近い止血を取得できます。Cottonoid は芯漿液と解剖から血液に有用なツールです</li>。
</ol> 7。後根神経節の解剖 <ol><li>避難区分的硬膜外脂肪表面から深い内側を開始し、横方向に進みます。6-10 フランス ・ フレージャー吸引ヒントとバイポーラ鉗子や吸引を使用して穏やかな郭清によって脂肪を削除します 。
	注: ルーペの拡大や解剖顕微鏡の使用は有用で安全に硬膜外脂肪を避難し、バイポーラ電気手術を用いた硬膜外静脈叢の細心の止血を達成するために必要な詳細レベルを提供します</li>。
	<li>は、superoinferior の方向は、皮膚切開の軸に平行に実行している正中線に沿って硬膜嚢を識別します。硬膜神経根の袖に上昇を与えるため硬膜嚢を見ることができるまで、硬膜嚢に沿って硬膜外脂肪を削除します</li>。
	<li>トレース硬膜袖横と下方に硬膜外脂肪避難によってそれが DRG の周りを拡大して見られるまで 。
	注: は、楕円形のオレンジ色への黄色 DRG を識別します。半ば腰椎 DRG、通常 4-6 mm のサイズで、横方向の内側で一番長い位置で直接下またはそのそれぞれの椎弓根の内側 2-3 mm。茎を優しく触診して神経の鈍い、直角フックを使用できます</li>。
	<li>避難硬膜外脂肪横方向に, 過去の後根神経節、隣接する脊髄神経が見られるまで 。
	注: 痛覚が発生した場合それを修復 6-0 ナイロン縫合糸と滑らかなマイクロ針ドライバーを使用して単純な実行中のスティッチの水密の閉鎖で</li>。
</ol> 8。DRG の注入 <ol><li>22 g 脊髄針の使用 32 ゲージ対流強化配信 (CED) 針の弾道を導くため。皮膚と傍脊柱筋を通して 22 ゲージ ガイド針を穿刺します 。
	注: CED 針、組織、またとして知られている一括フロー、圧力勾配 19 , 20 のための流体の対流を達成するために設計されています</li>。
	<li>DRG の長手方向軸線に近い解剖フィールドの傍脊柱の横壁から飛び出す針の先端で抑えたり、軌道に沿ってガイド針を目指します</li>。
	<li>罰金を調整し針パス針の内腔に DRG の中央に揃えます 。
	注: DRG に連絡するガイド針を許可ことがない必要があります</li>。
	<li>滅菌注射器に滅菌注入液を作成し、滅菌点滴チューブに注射器を接続します</li>。
	<li>は、CED 針にチューブを固定し、滅菌フィールドからシリンジを手します。プログラム可能なシリンジ ポンプに注射器を接続します 。
	注: チューブが不稔性と機動性を維持するために 5 フィートの長さを用意しています。また、それが重要ソリューションに導入される空気の泡がない</li>。
	<li>CED 針先から式が見られるまで、注入液を進める</li>。
	<li>は、ガイド針の内腔内の CED 針を置き、ガイド針の先端から現れるまで CED 針をゆっくりと進みます。DRG は針配置の間に穴を開けられないことを確認します</li>。
	<li>CED 先端の最終的な位置を決定するため、軌道の長軸に沿ってガイド針の位置の微調整をします</li>。
	<li>針と深さとガイドと CED 針の配置が達成されれば連動針ハブを使用して一緒に CED ニードル ガイドをセキュリティで保護します</li>。
	<li>射出装置のすべての接続がしっかりと、ガイド針、CED 針など、注入液と接続チューブが読み込まれることを確認します</li>。
	<li>のおおよその CED 針先と後根神経節に長い軸ガイド針を進める</li>。
	<li>CED 針先に DRG を穿刺します</li>。
	<li>は、DRG の三次元中心に CED 針の先端を沈めます <。br/> メモ: DRG は変数のサイズと形状の三次元構造、DRG 露出 DRG の真の中心で CED 針の先端を正確に配置するために完了しなければなりません。真の後根神経節の中心は 3 つの解剖学的な軸の交点に位置する、すなわち、前方、後方に横に内側と下軸に優れてします</li>。
	<li>卒業率、3 つのステップのボリュームを使って CED による注入液の提供 100 μ L.</li>
	<li>2 で提供 4 μ μ L/分最初のステップ。2 番目の手順の 4 μ L/分で 8 μ L を実現します。3 番目と最後のステップの 8 μ L/分で 88 μ L を提供します 。
	注: 手順と圧平衡を許可する最後のステップ後 3 分一時停止を許可します</li>。
	<li>最終注入ステップと滑らかな、穏やかな動きでその長い軸に沿って 3 分一時停止後に噴射装置を撤回します 。
	注: 無色が注入されたソリューションには濃度 0.1% 重量/体積注入液配布 12 の視覚的評価支援するために、溶液中の着色された染料が含まれます。また、重要な染料 4 &#39;、研究デザイン注入液配布 5 の組織学的評価が必要な場合、6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) は 0.25 μ g/μ L の濃度でソリューションに含まれる</li>。
</ol> 9。閉鎖 <ol><li>を動員し、フラッシュ、すなわち 骨片の破片のサイト閉鎖前に手術部位に温かい生理食塩水灌漑の適用 3 ラウンド。生理食塩水と破片を回復する吸引を使用します 。
	注: 灌漑は明確に残るとき、綿密な止血が保証されます。止血剤 (ゼラチン スポンジ) と cottonoid は、この時点で削除されます。さらに、全ての材料や道具は、閉鎖前に切開部位からクリアされていることを確認します</li>。
	<li>閉鎖のため 3 層の手法を使用します</li>。
	<li>は、単純な, 中断, ロック ファッションで 0 縫合糸を使用して腰部の筋膜を縫合します。水密の閉鎖を達成するスティッチ 5 8 ミリメートルのすべてを配置します</li>。
	<li>縫合糸のステッチでシンプルで中断、逆方法で 2-0 縫合糸を使用して皮下組織配置すべて十分な強度を達成するためには 5-8 mm です</li>。
	<li>実行しているシンプルで 0 縫合糸を使って皮膚を閉じるかファッションを中断します</li>。
	<li>行方不明シャープがないことを確認するため針カウンターを使用先決</li>
	<li>生理食塩水で皮膚を洗浄、乾燥肌、および粘着性の包帯ストリップを切開部に垂直に配置します</li>。
	<li>ストリップ、包帯の上にガーゼや最終的な接着剤の抗菌薬の添付場所切開ドレープ</li>。
</ol> 10。術後動物ケア <ol><li>Extubate、暖かい毛布でカバーし、回復には、動物を輸送します</li>。
	<li>術後監視および生存の手術からの回復の標準機関の操作手順に従います。最低限、動物の観察 15 分毎意識、完全麻酔回復が達成されるまでは 1 時間、1 日 2 回のリターンまでその後</li>。
	<li>IM または経口カルプロフェン術後 0 日目から 5 日間、1 日 1 回 4 mg/kg で投与をすることによって術後疼痛管理を提供します。術後 2 日目に一度 0.18 mg/kg、与えられた SC ブプレノルフィン、SR を管理します</li>。
	<li>術後 4 日目に 1 回 5 mg/kg で与えられた IM セフチオフルを与えることによって術後の消毒、管理します</li>。
	<li>術後 5-7 日目に包帯を削除します。創傷治癒が完了したら、通常術後 10-14 日で抜糸します</li>。
	<li>人道的標準制度運用手順に従って動物を安楽死させる研究のエンドポイントに到達します</li>。
</ol>

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<li>Pleticha, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimally+invasive+convection-enhanced+delivery+of+biologics+into+dorsal+root+ganglia%3A+validation+in+the+pig+model+and+prospective+modeling+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Minimally invasive convection-enhanced delivery of biologics into dorsal root ganglia: validation in the pig model and prospective modeling in humans.</a> J Neurosurg. 121 (4), 851-858 (2014).</li>
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なし;著者らは本研究に関連する利益相反をあります。

我々 は後根神経節を介して椎と健康的な大型動物種における intraganglionic 注入の手術手技の方法を説明しようとする具体的には、豚。齧歯類で、同様の方法は詳細な12をされており、DRG を8,10やウイルスベクター 6,7,9,12従来の薬理学的薬剤を提供するために使用ことができます。上記小動物研究からの結果は有望であるし、我々 のプロトコルは、豚にこれらの事前の調査結果を翻訳する他の道を開くでしょうと思います。健康と病気の動物は、上記研究は、臨床研究では小動物のユーティリティをサポートに使われました。必然的に、大動物モデルはサイズと注入液分布の観点から人間の DRG に最高の使用可能な比較...

後根神経節 (DRG) は、脊柱に沿って位置する解剖学的離散、神経のコレクションです。各 DRG には、特定の部位からのエンコードおよび中枢神経系 (CNS)、末梢刺激を中継する第一次感覚ニューロンが含まれています。たとえば、変形性関節症の痛みが始まるジョイント約に位置する苦痛の受容器は侵害刺激を認めるとき。このプロセスは侵害受容と呼ばれます。侵害刺激の長期的な意識は、慢性的な痛み1に します。
慢性の苦痛は頻繁に臨床研究2学科 intraganglionic 注入3など DRG に鎮痛薬のターゲットを絞った配信するための便利なメソッドを開発する 1 つの目標があります。ただし、DRG アクセスしにくい椎間孔4のボニーの範囲内に存在するため。いくつかのグループは正常に齧歯動物5,6,7,8,9,10で脊椎外科を使用してこの障害を克服しています。
クリニックで椎弓切除術は一般的な脊椎操作は、椎弓板、それにより脊柱管11を治療の外科的除去を指します。DRG の直接アクセスを余裕に外科的技術の取り込みが齧歯動物5,12で成功している、しかし、翻訳があります関連する構造体のサイズを考慮した非現実的な違いと方法に影響薬物動態学や技術的可能性13,14。たとえば、1 つの研究は、T10 は 3.0、7.0、およびラット、ブタと人間、それぞれ15の 8.2 mm で横脊髄直径を決定しました。したがって、大型動物は良い神経構造のおおよその人間寸法をモデル化します。
豚、Raoreらは複数の脊髄内注射16頚髄へのアクセスにマルチレベル椎弓切除術を使用しました。プロシージャ名は忍容性の段階に私主導臨床試験と同等の治療成績が文書化された17をしました。これらの結果は、技術的な可能性と人間の安全性の予測因子として臨床大動物モデルの継続的な使用をお勧めします。
日には、詳細な方法について手術適応と大型動物種の DRG の注入のために存在しません。この橋渡しのギャップを絞り込むには、DRG 露出豚椎注入のためのプロトコルを報告します。標準脳神経外科技術・機器・材料を用い、現代の手術の実際を模倣するように工夫しました。腰部後根神経節の水溶液を用いた intraganglionic 注射、術後 21 日目後組織を介して配信の成功を確認します。

<table><tbody><tr><td>大型の人道的な動物用スリング</td><td>ブリッツ &会社の</td><td>002539</td>腹部<td>の開口部を含むように変更</td></tr>されました <tr><td>接着剤患者戻り電極 - 9インチ</td><td>メドトロニック</td><td>E7506</td><td>-</td></tr><tr><td>レンジャー血液&体液加温システム</td><td>3M</td><td>24500</td><td>-</td></tr><tr><td>乳酸リンガーの液体</td><td>ホスピーラ</td><td>0409-7953-09</td><td>-</td></tr><tr><td>フォース空気加温装置</td><td>3M</td><td>77500</td><td>-</td></tr><tr><td>アプリケーター付きデュラプレップ溶液、26 mL (0.7% ヨウ素ポバクリレックス、74% イソプロピルアルコール)</td><td>3M</td><td>8630</td><td>-</td></tr><tr><td>滅菌使い捨て手術用タオル</td><td>Medline</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>MDT2168286-Ioban 2 切開ドレープ</td><td>3M</td><td>6651EZSB</td> <td>-</td></tr> <tr><td>使い捨て吸引キャニスターとチューブ</td><td>Medline</td><td></td> <td>DYND44703H-Button</td></tr> <tr><td>スイッチ電気外科モノポーラペンシル</td><td>メドトロニック</td><td>E2450H</td><td>-</td></tr><tr><td>ファインスムースストレートバイポーラ電気外科鉗子、4 1/2インチ</td><td>Bovie</td><td>A826</td><td>-</td></tr><tr><td>#15ブレード</td><td>Miltex</td><td>4-315</td><td>-</td></tr><tr><td>#11ブレード</td><td>Miltex</td><td>4-311-4</td><td></td></tr> <tr><td>x 4サージカルガーゼ</td><td>ダイナレックス</td><td>3262-Weitlaner</td><td></td></tr><tr><td>自己保持リトラクター、8インチ</td><td>ミルテックス</td><td>11-618</td><td>-</td></tr><tr><td>Meyerding自己保持リトラクター、1 x 2 3/8インチ</td><td>Sklar</td><td>42-2078-Gelpi</td><td></td></tr><tr><td>自己保持リトラクター、7インチ</td><td>Sklar</td><td>60-6570-Freer</td><td></td></tr><tr><td>エレベーター、5 mm</td><td>Medline</td><td>MDS4641518F</td><td>-</td></tr><tr><td>ボーンワックス</td><td>Ethicon</td><td>W31G-Spurling</td><td></td></tr><tr><td>椎間板ロンジャー、3 mm</td><td>Sklar</td><td>42-2852</td><td>-</td></tr><tr><td>スパーリング45度、アップバイトKerrison rongeur、2 mm</td><td>Medline</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>MDS4052802-Leksell角度付きロンジャー、2 mm</td><td>Sklar</td><td>40-4097-Gelfoam</td><td></td></tr><tr><td>、サイズ50</td>ファイ<td>ザー</td><td>AZL32301</td><td>-</td></tr><tr><td>コットンイドパティ</td><td>メドトロニック</td><td>8004007</td><td>-</td></tr><tr><td>フレイジャー吸引チップ、6</td><td>Fr Sklar</td><td>50-2006-Frazier</td><td></td></tr><tr><td>吸引チップ、10 Fr</td><td>Sklar</td><td>50-2010</td><td>-</td></tr><tr><td>ダンディ鈍い直角神経フック</td><td>Medline</td><td>MDS4005220</td><td></td></tr><tr><td>-ナイロン縫合糸、6-0</td><td>Ethicon</td><td>697G-Castroviejo</td><td></td></tr> <tr><td>スムーズ マイクロ ニードル ホルダー</td><td>Medline</td> <td>MDG2428614-22</td><td></td></tr> <tr><td>ゲージ クインケ ポイント脊髄針</td><td>ハリヤード ヘルス</td><td>18397-32</td><td></td></tr> <tr><td>ゲージ CED 針 ロッキング ルアー ハブ付き</td><td>コメント</td><td>n/a</td><td>を参照してください:Pleticha、J.、Maus、TP、Christner、JA、マーシュ、MP、Lee、K.H.、Hooten、WM、Beutler、AS後根神経節への生物製剤の低侵襲対流強化送達:ブタモデルとヒトにおける前向きモデリングの検証。テクニカルノート。J神経外科。121(4)、851-8(2014年)。</td></tr><tr><td>ポリエチレンチューブ、5フィート</td><td>サイエンティフィックコモディティ</td><td>BB31695-PE / 05-Monoject</td><td></td></tr><tr><td>シリンジ、3 mL</td>ケン<td>ドール</td><td>SY15352-NanoJet</td><td></td></tr><tr><td>シリンジポンプ</td><td>Chemyx</td><td>10050-DAPI</td><td></td></tr><tr><td></td><td>シグマ-アルドリッチ</td><td>D9542</td><td>-</td></tr><tr><td>ファストグリーンFCF</td><td>シグマアルドリッチ</td><td>F7252</td><td>-</td></tr><tr><td>バルブ灌漑シリンジMedline</td><td></td><td>DYND20125</td><td>-</td></tr><tr><td>細い歯のアドソン鉗子</td><td>Medline</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>MDS1000212-Vicryl縫合糸、0</td><td>Ethicon</td><td>J603H-Vicryl</td><td></td></tr><tr><td>縫合糸、2-0</td><td>Ethicon</td><td>J317H</td><td>-</td></tr><tr><td>ニードルカウンターMedline</td><td></td><td>NC20FBRGS</td><td>-</td></tr><tr><td>ステリ-ストリップスキンクロージャー、1/2x4インチ</td><td>3M</td><td>R1547</td><td>-</td></tr></tbody></table>

腰部後根神経節のアクセスと豚注入の椎

Laminotomy for Lumbar Dorsal Root Ganglion Access and Injection in Swine

後根神経節 (DRG) は、頭の下のすべての第一次感覚ニューロンが含まれている明確な解剖学的構造です。この事実は、慢性的な痛みの治療を目的とした治療薬の注入の DRG の魅力的なターゲットを作る。小動物モデルにおける各 DRG を囲む椎体骨の外科的切除が含まれるために、DRG の注入を促進する椎弓切除術を使用されています。大型動物種、すなわち、豚の腰部後根神経節の intraganglionic 注射用手法を示す.椎は、DRG 標準脳神経外科技術・機器・材料の使用への直接アクセスを許可するように実行されます。椎弓切除術を介してより広範な骨削除と比べると、後根神経節での十分なアクセスを達成しながら脊髄の解剖学を節約するために椎弓切開術を実施します。DRG 注入の術中の進行状況は、非毒性の染料を使用して監視されます。術後 21 日に安楽死、次の注入の成功は 4', 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) intraganglionic 分布の組織によって決定されます。プロトコルを示す生物学上不活性溶液を注入しています。このメソッドは、DRG のターゲット治療解決に応用の将来的に臨床研究で可能性があります。我々 の方法論は、大型動物種で intraganglionic 小動物パラダイムの訳しをテストを容易する必要があります。さらに、このプロトコルは、これらの豚の DRG 注入の前臨床試験を計画の重要なリソースとして役立つかもしれない。

注入液の広がりの組織学的評価 注入液の後根神経節への配信成功は、広がる DAPI の組織学的評価によって決定されます。このテクニックは、DRG の三次元中心部に針の先端を位置決めを伴います。したがって、正常に配信は、針の先端を両方 (中央 DRG セクション) の近くと遠く (末梢 DRG セクション) を組織切片から汚す DAPI の程度を評価することによって決定されます。図 1 a 図 1 bは、1 つの DRG の成功した射出を表しています。中枢および末梢の両方の DRG 実質を介して均等に分散 DAPI 染色します。したがって、成功した DRG 射出は DAPI 染色三次元の DRG アーキテクチャ全体のびまん性の普及によって示されています。サブ最適な注入は、一貫性のない染色によって例証されます。たとえば、最小限の染色 (図 1) または外側の縁が DRG 柔 (図 1<...

Intraganglionic 注入の腰部後根神経節 (DRG) へのアクセスを提供する豚の椎の手法について述べる。注入の進行状況を監視するには、術中と術後後 21 日を確認します。このプロトコルは、DRG の注入を含む今後の臨床研究に使用可能性があります。

Dorsal root ganglia (DRG) are anatomically well defined structures that contain all primary sensory neurons below the head. This fact makes DRG attractive ...

この手順の全体的な目標は、対流強化送達針を使用して溶液の神経節内注射のために、豚の腰椎後根神経節の外科的アクセスを提供することです。この方法は、新薬がDRG実質に直接送達された場合のDRG細胞への影響に関する、基礎神経科学およびトランスレーショナル神経科学分野の重要な質問に答えるのに役立ちます。この手法の主な利点は、溶液がDRGに正常に送達されたことを確認し、生物学的複製間で結果を比較するために必要な技術データを提供することです。この技術は、神経節内分娩の参照標準になります。最終的な目標は、画像誘導配信です。この参照標準により、薬剤の治療効果と送達効率を独自に特徴付けることができます。手術のために豚に麻酔をかけ、腹部の開口部がパッドが入った改造された大型の人道的な動物用スリングに豚を配置します。短絡を防ぐために、金属部品にパッドが入っていることを確認してください。腰椎の上にある皮膚を準備するには、製造元の指示に従って、たっぷりの溶液を使用してその領域をこすります。同じ技術を使用して、マークされた横突起を過ぎて正中線冠状面に向かって外科的スクラブを続けます。次に、マークされた腰椎突起に沿った正中線上の切開部位の周りにサージカルタオルをきちんと置きます。次に、手術部位の周辺部をはるかに超えて領域全体をドレープします。手術の準備が整ったら、まず15番のメスを使って、棘突起の真後ろにある切開ドレープから8〜12センチの正中線矢状切開を開きます。ガーゼタンポナーデと単極電気手術を使用して止血を維持します。次に、モノポーラ電気手術を使用して、胸部腰椎筋膜を覆う皮下組織と脂肪を解剖します。次に、棘突起を胸部腰椎筋膜の奥深くまで触診し、正中線に沿って筋膜を切断して、棘突起の間に広がる棘上靭帯を露出させます。この時点で、切開部をどちらの方向にも長くして、3つの棘突起が完全に見えるようにすることができます。次に、15番のブレードを使用して、各棘突起の後方にある棘上靭帯から2ミリメートルの深さの傍矢状切開を行います。棘突起の後面の左3分の1に沿って切開を行います。次に、5mmのフリーアエレベーターを使用して、各切開部に沿った各レベルで棘上靭帯を穏やかに解放します。次に、骨膜下面を特定し、その平面内で各棘突起の外側表面に沿って解剖します。次に、3つの骨膜下解剖を並行して行い、穏やかで均一な解剖を行います。次に、各レベルで椎弓板を特定し、横方向に骨膜下解剖を行います。3つの露出した脊椎動物を関節間の椎弓板の横端に接続する2つの接合体接合部の横方向の境界まで解剖を伸ばします。この椎弓板が関節間部です。これは、DRGが存在する椎間孔の後縁を示します。注意して、5ミリメートルのFreerエレベーターまたはキュレットを使用して、椎弓板の尾側端と中央管の間の遷移を触診します。エレベーターを無理に前方に動かさないでください。次に、ロンゲールを使用して、区分的に骨を抽出します。棘突起の基部に沿って、椎弓根の尾側表面のすぐ尾側にあるレベルまで骨を取り除き、横方向に最大限に押し出します。滑らかで光沢のある骨膜を完全に露出させます。11番の刃で切り、硬膜外脂肪を露出させます。椎弓板に接続されていた下関節突起は、ほとんどの椎弓切開術のためにそのままにしておきます。次に、下関節突起を区分的に除去しますが、隣接する上関節突起はそのまま残します。次に、ループ倍率または解剖顕微鏡を使用してDRGを解剖します。まず、硬膜外脂肪を内側から始まり、横方向に進行するように、区分的に排出します。バイポーラ鉗子で穏やかな解剖を行い、6〜10個のフレンチフレイジャー吸引チップを介して吸引します。次に、皮膚切開の軸に平行な上下方向に走る正中線に沿った硬膜嚢を特定します。次に、硬膜嚢に沿って硬膜外脂肪を取り除き、硬膜嚢が硬膜神経根スリーブを生じさせるのが見えるまで行います。さて、硬膜外脂肪の排出を続けて、硬膜スリーブを横方向および下方向になぞり、DRGの周囲に拡大することが見られるまで追跡します。DRGは楕円形で、幅は約4〜6ミリメートルの黄橙色です。隣接する脊髄神経が見えるまで、DRGを過ぎて脂肪除去を横方向に進めます。22ゲージの脊椎針を使用して、32ゲージのCED針の軌道をガイドします。ガイド針を皮膚と傍脊髄筋に穴を開けます。非常に慎重に、DRGの縦方向のアクセスに近似する軌道に沿ってガイド針を向けます。先端が解剖野の外側傍脊髄壁から出てくるまで、ガイド針を徐々に進めます。次に、ガイド針を長軸に沿って進めて、CED針の先端をDRGに近似します。次に、CED針先でDRGに穴を開け、先端をDRGの3次元中心に沈めます。露出したDRGの固有のサイズと形状を再度考慮することが重要です。目標は、スムーズな穿刺を達成し、針先を沈めて、オーバーシュートしたりマークを見逃したりすることなくDRGの3次元中心に到達することです。次に、次の24分間でCEDによって100マイクロリットルの注射液を段階的に送達します。最後のステップである3分間の休憩の後、注入装置をその長軸に沿って滑らかで穏やかな動きで引き抜きます。最後に、テキストプロトコルで説明されているように、手術部位を閉じます。閉鎖後、皮膚をきれいにし、切開部に垂直な粘着包帯を貼り、続いてガーゼを貼り、次に粘着性の抗菌ドレープを貼ります。DRGへの注射液の正常な送達は、検査によって組織学的に評価できます。理想的には、青色で表示されているDAPIは、最終的にすべての方向に外側に分布します。注入が成功すると、DAPIは赤で見える中心および末梢のDRG実質の両方に均一に分散します。注入が最適でないと、染色に一貫性がなくなります。たとえば、外側の縁に沿って染色や焦点の染色は最小限に抑えられますが、DRG実質の内側の側面にはまったくありません。この手順を試みるときは、覚えておき、小さく始めてゆっくりと進めることが重要です。解剖の後半で椎弓切開術の幅を広げることはいつでもできますが、骨を元に戻すことはできません。

laminotomy-for-lumbar-dorsal-root-ganglion-access-injection

Research

JoVE Journal

Neuroscience

神経科学

神経前駆体の移植は、保護および/または脊髄損傷（SCI）と運動ニューロン疾患、筋萎縮性側索laterals硬化症（ALS）で失われた/機能不全子宮頸部横隔運動ニューロンを交換するための有望な戦略である。我々は、ALSとSCIの齧歯類モデルにおける頚髄前角に細胞送達のためのプロトコルを提供しています。...

筋萎縮性側索硬化症や外傷性脊髄損傷では頚椎前角をターゲットとするための髄腔内細胞移植

根切断術後の後根の軸索のライブイメージング

脊髄に（遺伝子細胞）治療​​の送達のために使用手術手技とデバイスの短い視覚的な説明。技術が動物で実証が、完全に翻訳可能であり、現在、人間のアプリケーションに使用されています。...

セラピーの脊髄配達のための外科テクニック：ゲッティンゲンミニブタの手順のデモンストレーション

出典: Unger, M. D., et al., Lambar Dorsal Root Ganglion Access and Injection for Lumbar Dernlion Access and Injection in S豚.J. Vis.

ブタモデルにおける腰椎後根神経節への標的注射のための椎弓切開術

出典:Cheah, M., et al.感覚軸索再生のモデルとして、背根神経節注射と背根潰傷傷。J. Vis. Exp.

背根神経節注射と背根挫傷傷を用いたラットの感覚軸索再生のモデル化

このプロトコルは、感覚軸索再生を研究するためのモデルとして、ウイルスベクターによる後根神経節(DRG)注射の使用と成体ラットの同時後根挫傷を示しています。このモデルは、感覚軸索再生を促進するための遺伝子治療の使用を調査するのに適しています。...

後根神経節インジェクションおよび後根感覚軸索再生のためのモデルとして傷害をつぶします

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インビボ体細胞および内臓刺激に対する背根神経節ニューロンの応答のカルシウムイメージング

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治療実施のためのげっ歯類脊髄の硬膜下腔へのアクセス

このプロトコルは、局所麻酔下で経椎間孔全内視鏡的椎間孔切開術を実行するためのステップバイステップのガイドを提供します。この運動保持技術は、隣接する分節疾患患者の L5/S1...

L5/S1隣接セグメント椎間孔狭窄症に対する局所麻酔下での経椎間孔全内視鏡腰椎椎間孔切開術

本記事では、成マウスにおけるCNS標的治療薬の鞘内投与方法を詳述し、プロトコルの精度と繰り返し注射の可能性に焦点を当てています。この研究には、反センスオリゴヌクレオチドがSOD1-ALSモデルマウスにおける変異SOD1発現を低減させた検証研究の結果が含まれており、神経変性疾患の前臨床研究におけるこのアプローチの有用性を支持しています。...

ヒトSOD1-G93AALSマウスにおける中枢神経系の正確な標的化と予測効果のためのSOD1-ASOsの腰椎鞘内注射

学ぶ腰部後根神経節へのアクセスと薬液注入法。豚を用いたラミノトミー手術で、対流増強送達針を使いDRGに直接投与します。術中モニタリングと組織学的確認により、前臨床神経科学研究における薬剤効果評価の信頼性を高めます。

腰部後根神経節のアクセスと豚注入の椎

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