Name: 乾燥 - 加齢黄斑変性症の視細胞の細胞移植による再生療法:体内の予備的なレポート (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-02-12T12:30:00.000+00:00
Duration: 10 min 24 s
Description: 学ぶ、乾性加齢黄斑変性症の視細胞再生療法。脂肪由来幹細胞と血小板を用いた脈絡膜上移植により、視力と網膜感度を改善する革新的な外科手術技術を探索する。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

著者の謝辞があります。

低ビジョン アカデミーの倫理委員会で承認された研究のプロトコルとすべての科目はヘルシンキ宣言に従って書面による同意署名します。この研究は、ラフバラからシェフィールド大学倫理的な承認を受けた。
注: 脈絡自家移植 Limoli 網膜修復法 (LRRT) による乾燥 - 加齢黄斑変性症患者の包含と除外基準は、表 1に示すです。
1. 乾燥 - 加齢黄斑変性症患者の診断
<ol><li>共焦点走査型レーザー検眼鏡、SD-10 月、私と診断を確認します。</li>
	<li>遠くと近くの各グループの BCVA を評価します。メジャー メーカー ポイント単位 (Pts) で近いビジョン (クローズ アップ) のために。BCVA 時間 0 (T0) 90 (T90) を測定し、180 日間初期の治療糖尿病網膜症の研究と比較して (T180) ログマー 4 メートルで (EDTRS) グラフ。</li>
	<li>レコード電気幼魚、薄明視と明所視細胞の活動、または国際臨床視覚電気生理学 (ISCEV)11会によって 2009 年に設定された基準によると、フラッシュの ERG。</li>
</ol>2. anesthetization
注: LRRT の中に麻酔のゴールド スタンダードは局所麻酔、麻酔と鎮静のサブほぞの含浸による補強です。特定のケースで全身麻酔をお勧めします。
<ol><li>角膜を取得し、外用局所麻酔薬を適用することで結膜の麻酔注入 4% リドカイン 1% ロピバカインと手術前に、の滴の 15 〜 20 分。</li>
	<li>サブ結膜に直接浸潤麻酔を注入とテノン嚢下のスペース。</li>
	<li>局所浸潤の腹部の脂肪組織を抽出すると、前とサブ結膜と角膜輪部から 12 mm サブほぞのスペースの両方を使用します。Carbocaine または 1,200 IU エピネフリン混合 marcain の局所麻酔薬を採用してください。</li>
	<li>繰り返される小さなボリを通じて麻薬性鎮痛薬としてフェンタニルを使用して正しく行うことができる麻酔薬を用いた術中の鎮静を提供します。投与量は、一般的にボーラスあたりミダゾラムの 1 mg とフェンタニルの 0.025 mg です。</li>
</ol>3. Limoli 網膜修復技術準備
注: この手法は、subscleral スペース1,6,7,12軌道自家脂肪を移植する Pelaez の介入のバリアントを表します。外科的移植細胞が周囲の組織、脈絡膜と網膜18,19,20,21,22 で神経栄養因子や原因プロパティの多くの GFs を作り出すことができます。 ,23,24,25。LRRT、深い sclerectomy による移植自家細胞と脈絡膜の間の距離を削減し、脈絡膜流れ9、パラクリン自家細胞分泌を促進するために茎と脈絡膜の接触面積を拡大 10,14。
<ol><li>脈絡膜と強膜、Limoli 網膜修復手法 (LRRT)15,16,17と呼ばれるプロシージャの間の細胞移植手術の前にそれぞれの目の適切な消毒を行います。</li>
	<li>コールマンらと sovrachoroidal スペース15,16,17の SVF で、腹部の脂肪からのローレンスの法 (図 1) を用いて、ADSCs を移植します。</li>
	<li>血小板と潜入脂肪椎弓根は、次の手順により得られた PRP ゲルから派生します。</li>
	<li>遠心分離機の血6,12と多血小板血漿 (PRP) を収集します。血小板顆粒への刺激は、脂肪椎弓根6,12GF リリースします。</li>
</ol>4. 技術仕様および戦略
注: 脂肪質のティッシュの収集し、ローレンスとコールマン技術17(材料表) によると、患者の腹部の皮下層から精製します。
<ol><li>手動で収穫 3 mm 鈍カニューレを使用して、各患者の腹部の皮下層からの脂肪組織の 10 mL は、ローレンスとコールマン技術17 (図 2 a ・ 2 b) によるとロック注射器に接続します。</li>
	<li>20 ° C (図 2C) で 1,500 × g で 5 分間遠心分離して血や脂肪、油、液体から脂肪質のティッシュの純粋な SVF を区切ります。SVF は、ADSCs17の非常に豊富です。</li>
	<li>22 G 針と PRP の準備のための別々 のチューブは、ひと末梢血の 8 mL を収集します。</li>
	<li>20 ° c (図 2D) 1,500 × g で 5 分間収集した血液を遠心分離します。LRRT、その後で変更結果 ADSC の増殖は、脈絡膜血流の増加を支持する、自家脂肪移植の生存率と脂肪7、によってだけ分泌されるこれらの要因の作用のより包括的な変調で 11,17。</li>
	<li>眼窩脂肪から得られる移植を収容し、SVF から PRP、ローレンスに従って得られる ADSCs の混合物ではこのポケットの残留量が飽和に脈絡ポケット (詳細については手順 4 で、特定 4.4 と 4.5) を構築し、コールマン技術17。</li>
</ol>5 LRRT (Limoli 網膜修復技術) によって視細胞移植: 外科手術と技術的な詳細
<ol><li>6-0 シルク縫合糸、サルの角膜輪部近くで強膜を固定します。</li>
	<li>5.5「ウェストコット Tenetomy 曲線はさみを使用して、劣った一時的な角膜輪部から 11 ミリメートルで結膜下と subtenonian スペースを開きます。</li>
	<li>Limoli バジーレ結膜リトラクターを強膜手術野をするこの空間に挿入します。</li>
	<li>角膜輪部からの 8 mm の強膜側にフラップをカット済み、5 mm 三日月ナイフの角度面取りを使用しています。フラップのヒンジは、ラジアルと外科医の左側に常にです。</li>
	<li>角膜輪部から 8 mm で、サルの象限には、クレッセント ナイフ、斜め傾斜面を使用して、放射状のヒンジ側に約 5 mm の深い強ドアを開きます。脈絡膜のスレートの色を表示するのには十分な深さで sclerectomy を実行します。</li>
	<li>後続の視細胞移植で血液の循環を促進するために、フラップの遠位部で少し蓋を削除することによってギャップを作成します。</li>
	<li>眼科ピンセットで下斜筋上のギャップから眼窩脂肪を抽出します。抽出された脂肪は十分にその注入後生き残るためにそれを許可する血管であることを確認します。</li>
	<li>脈絡膜のベッドとドアの近位端に脈絡膜 6/0 polyglactin 繊維縫合糸に自家脂肪弁をそっと置きます。</li>
	<li>脂肪の茎またはその栄養血管の圧縮を避けるために強膜フラップを縫合します。</li>
	<li>(血液材料の遠心分離、コンポーネント、および血小板顆粒26の分離によって得られた) PRP ゲル 1 mL で脂肪の椎弓根の間質に潜入 30 G 斜め (30 °) カニューレを使用します。</li>
	<li>縫合糸を結膜の側面を準備します。結膜のリトラクターを削除します。</li>
	<li>6/0 polyglactin ファイバーを用いた結膜を縫合します。</li>
	<li>閉じる前に、フラップ、脈絡膜と脈絡膜の自家移植との間の subscleral スペースに自家脂肪移植を併用した小さな柔軟なプラスチック製のチューブを挿入するスペースを残します。</li>
	<li>飽和自家脂肪移植、脈絡膜、強膜フラップの残留容量 0.5 cc SVF (ADSCs のリッチ)、以前 3.2 で、小さな柔軟なプラスチック製のチューブで強膜のポケットに挿入準備します。</li>
	<li>残余空間を飽和後の縫合を閉じます。</li>
	<li>手術後、抗生物質アジスロマイシン 500 mg との 3 日間を管理します。また、組み合わせて抗生物質やステロイド、クロラムフェニ コールなどベタメタゾン、約 15-20 日目ドロップ療法を提供します。 注: ADSCs、SVF PRP から脂肪細胞から成っている、自家今得られている26。脈絡膜の流れに自己細胞の傍分泌の分泌を刺激するために深い sclerectomy 移植自家細胞と脈絡膜の間の距離を減らします。同じ目的のためには、茎と脈絡膜の間の接触のエリアを展開します。</li>
</ol>

<ol><li>Daftarian, N., Kiani, S., Zahabi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regenerative+therapy+for+retinal+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Ophthalmic+Vis.+Res%22%5BJournal%5D)">Regenerative therapy for retinal disorders.</a> J. Ophthalmic Vis. Res. 5, 250-264 (2010).</li>
<li>Thanos, C., Emerich, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delivery+of+neurotrophic+factors+and+therapeutic+proteins+for+retinal+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Expert.+Opin.+Biol.+Ther%22%5BJournal%5D)">Delivery of neurotrophic factors and therapeutic proteins for retinal diseases.</a> Expert. Opin. Biol. Ther. 5, 1443-1452 (2005).</li>
<li>Cao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+protection+of+photoreceptors+from+light+damage+by+pigment+epithelium-derived+factor%5BTitle%5D)+AND+%22Inv.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">In vivo protection of photoreceptors from light damage by pigment epithelium-derived factor.</a> Inv. Ophthalmol. Vis. Sci. 42, 1646-1652 (2001).</li>
<li>Bhutto, I., Lutty, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+age-related+macular+degeneration+%28AMD%29%3A+Relationships+between+the+photoreceptor%2Fretinal+pigment+epithelium%2FBruch%27s+membrane%2Fchoriocapillaris+complex%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Aspects+Med%22%5BJournal%5D)">Understanding age-related macular degeneration (AMD): Relationships between the photoreceptor/retinal pigment epithelium/Bruch's membrane/choriocapillaris complex.</a> Mol. Aspects Med. 33 (4), 295-317 (2012).</li>
<li>McHarg, S., Brace, N., Bishop, P. N., Clark, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enrichment+of+Bruch%27s+membrane+from+human+donor+eyes%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Enrichment of Bruch's membrane from human donor eyes.</a> J. Vis. Exp. (105), (2015).</li>
<li>Kevy, S. V., et al. Preparation of growth factor enriched autologous platelet gel. <a target="_blank" href="NULL">Transactions of the Society for Biomaterials 27th Annual Meeting</a>. , St. Paul, Minnesota, USA. April 24-29 (2001).</li>
<li>Schaffler, A., Buchler, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Concise+review%3A+adipose+tissue-derived+stromal+cells-basic+and+clinical+implications+for+novel+cell-based+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Concise review: adipose tissue-derived stromal cells-basic and clinical implications for novel cell-based therapies.</a> Stem Cells. 25, 818-882 (2007).</li>
<li>Filatov, V. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Gen.+Fr%22%5BJournal%5D)">Tissue therapy.</a> Med. Gen. Fr. 11, 3-5 (1951).</li>
<li>Pelaez, O. Retinitis pigmentosa. <a target="_blank" href="NULL">Cuban experience</a>. , Editorial Cientifico Técnica. La Habana, Cuba. (1997).</li>
<li>Meduri, R., et al. Effect of basic fibroblast growth factor on the retinal degeneration of B6(A)- Rperd12/J (retinitis pigmentosa) mouse: a morphologic and ultrastructure study. ARVO 2007 Annual Meeting. , Fort Lauderdale. May 6-10 (2007).</li>
<li>Limoli, P. G., Vingolo, E. M., Morales, M. U., Nebbioso, M., Limoli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preliminary+Study+on+Electrophysiological+Changes+After+Cellular+Autograft+in+Age-Related+Macular+Degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Medicine%22%5BJournal%5D)">Preliminary Study on Electrophysiological Changes After Cellular Autograft in Age-Related Macular Degeneration.</a> Medicine. 93 (29), 355(2014).</li>
<li>Tischler, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet+rich+plasma%3A+The+use+of+autologous+growth+factors+to+enhance+bone+and+soft+tissue+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22N.+Y.+State+Dent.+J%22%5BJournal%5D)">Platelet rich plasma: The use of autologous growth factors to enhance bone and soft tissue grafts.</a> N. Y. State Dent. J. 68, 22(2002).</li>
<li>Zuk, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+adipose+tissue+is+a+source+of+multipotent+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Biol.+Cell%22%5BJournal%5D)">Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells.</a> Mol. Biol. Cell. 13 (12), 4279-4295 (2002).</li>
<li>Lin, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topical+administration+of+orbital+fat-derived+stem+cells+promotes+corneal+tissue+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res.+Ther%22%5BJournal%5D)">Topical administration of orbital fat-derived stem cells promotes corneal tissue regeneration.</a> Stem Cell Res. Ther. 4 (3), 72(2013).</li>
<li>Limoli, P. The retinal cell-neurorigeneration. Principles, applications and perspectives. <a target="_blank" href="NULL">The growth factors</a>. , FGE Reg. Canelli (AT). 159-206 (2014).</li>
<li>Coleman, W. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+of+care+for+liposuction%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Acad.+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Guidelines of care for liposuction.</a> J. Am. Acad. Dermatol. 45, 438-447 (2001).</li>
<li>Lawrence, N., Coleman, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liposuction%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Acad.+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Liposuction.</a> J. Am. Acad. Dermatol. 47, 105-108 (2002).</li>
<li>Kamao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+human+induced+pluripotent+stem+cell-derived+retinal+pigment+epithelium+cell+sheets+aiming+for+clinical+application%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Characterization of human induced pluripotent stem cell-derived retinal pigment epithelium cell sheets aiming for clinical application.</a> Stem Cell Reports. 23 (2), 205-218 (2014).</li>
<li>Dang, Y., Zhang, C., Zhu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cell+therapies+for+age-related+macular+degeneration%3A+the+past%2C+present%2C+and+future%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Interv.+Aging%22%5BJournal%5D)">Stem cell therapies for age-related macular degeneration: the past, present, and future.</a> Clin. Interv. Aging. 10, 255-264 (2015).</li>
<li>Nebbioso, M., Livani, M. L., Steigerwalt, R. D., Panetta, V., Rispoli, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retina+in+rheumatic+diseases%3A+Standard+full+field+and+multifocal+electroretinography+in+hydroxychloroquine%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Exp.+Optom%22%5BJournal%5D)">Retina in rheumatic diseases: Standard full field and multifocal electroretinography in hydroxychloroquine.</a> Clin. Exp. Optom. 94 (3), 276-283 (2011).</li>
<li>Wang, P., Mariman, E., Renes, J., Keijer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+secretory+function+of+adipocytes+in+the+physiology+of+white+adipose+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell.+Physiol%22%5BJournal%5D)">The secretory function of adipocytes in the physiology of white adipose tissue.</a> J. Cell. Physiol. 216, 3-13 (2008).</li>
<li>Chen, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VEGF-Mediated+Proliferation+of+Human+Adipose+Tissue-Derived+Stem+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">VEGF-Mediated Proliferation of Human Adipose Tissue-Derived Stem Cells.</a> PloS One. 8, 73673(2013).</li>
<li>Bagchi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+endothelial+growth+factor+is+important+for+brown+adipose+tissue+development+and+maintenance%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Vascular endothelial growth factor is important for brown adipose tissue development and maintenance.</a> FASEB J. 27, 3257-3271 (2013).</li>
<li>Carron, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cultured+human+retinal+pigment+epithelial+cells+differentially+express+thrombospondin-1%2C+-2%2C+-3%2Cand+-4%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Biochem.+Cell.+Biol%22%5BJournal%5D)">Cultured human retinal pigment epithelial cells differentially express thrombospondin-1, -2, -3,and -4.</a> Int. J. Biochem. Cell. Biol. 32, 1137-1142 (2000).</li>
<li>Kim, S. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+pigment+epithelium-derived+factor+%28PEDF%29+and+vascular+endothelial+growth+factor+%28VEGF%29+in+sickle+cell+retina+and+choroid%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Expression of pigment epithelium-derived factor (PEDF) and vascular endothelial growth factor (VEGF) in sickle cell retina and choroid.</a> Exp. Eye Res. 77, 433-445 (2003).</li>
<li>Limoli, P. G., Limoli, C., Vingolo, E. M., Scalinci, S. Z., Nebbioso, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+surgery+and+growth+factors+in+dry+age-related+macular+degeneration%3A+visual+prognosis+and+morphological+study%5BTitle%5D)+AND+%22Oncotarget%22%5BJournal%5D)">Cell surgery and growth factors in dry age-related macular degeneration: visual prognosis and morphological study.</a> Oncotarget. 7 (30), 46913-46923 (2016).</li>
<li>Ueki, Y., Reh, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((EGF+stimulates+M%C3%BCller+glial+proliferation+via+a+BMP-dependent+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22Glia%22%5BJournal%5D)">EGF stimulates Müller glial proliferation via a BMP-dependent mechanism.</a> Glia. 61, 778-789 (2013).</li>
<li>Kozlowski, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RPE+cell+senescence%3A+A+key+contributor+to+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Hypotheses%22%5BJournal%5D)">RPE cell senescence: A key contributor to age-related macular degeneration.</a> Med. Hypotheses. 78, 505-510 (2012).</li>
<li>Schneider, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+hematopoietic+factor+G-CSF+is+a+neuronal+ligand+that+counteracts+programmed+cell+death+and+drives+neurogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">The hematopoietic factor G-CSF is a neuronal ligand that counteracts programmed cell death and drives neurogenesis.</a> J. Clin. Invest. 115, 2083-2098 (2015).</li>
<li>Yin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oncomodulin+is+a+macrophage-derived+signal+for+axon+regeneration+in+retinal+ganglion+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Oncomodulin is a macrophage-derived signal for axon regeneration in retinal ganglion cells.</a> Nat. Neurosci. 9, 843-852 (2006).</li>
</ol>

ARVO 2015 年に 5 月 3-7-デンバー、コロラド州 - 米国を提示しました。

本研究の主な目的は、脂肪細胞、ADSCs、SVF で PRP の視細胞移植 VA と AMD の影響を受けた目の乾燥で網膜の感度を時間をかけて改善するかどうかを評価するためだった。別の主な目的は、GF を用いた治療法がいくつかの病気の患者にとって役に立つかもしれないいくつかの臨床研究が示唆しているので、最近の文献に基づいて、これらの細胞の可能な治療効果を実証することでした。
実際には、いくつかの研究は自家ひと誘導多能性幹細胞 (iPSC) が AMD18,組織補充療法における網膜色素上皮 (RPE) の再生を目的とした、移植細胞源を表すことができる示されている19. 典型的な RPE マーカーを表現、展示できる単層偏 GF 分泌を示す貪食能力と同様、遺伝子発現パターン ネイティブ RPE18,19 のそれらに類似するようにこれらの細胞シートが生成されます</su...

複数の慢性疾患を治療する患部に幹/前駆細胞の全身またはローカル注入から成る細胞療法は最後の十年の1で細心の注意を描画されます。1990 年代、網膜萎縮2における潜在的治療役割で成長因子 (GFs) を調べた。実際には、多くのヒトの細胞はアポトーシス、すなわち、プログラムされた死細胞3のブロックを遅らせたりすることができます特定の蛋白質である GFs を生成できます。
それは漸進的かつ不可逆的な細胞死が視細胞層と、その結果、中央視覚機能4の損失への損傷を含む萎縮性網膜疾患を乾燥 - 加齢黄斑変性症 (AMD) には知られています。AMD は、先進国および日付に有効な治療法がないすべての黄斑変性の 80% を占める 55 歳以上の人の失明の主要な原因です。
いくつかの研究では、自家の GFs を取得できる様々 なソースがあることを示しています。これらは異なる種類の細胞、脂肪由来幹細胞 (ADSCs) の脂肪5 間質血管の分数 (SVF) に含まれる、血小板血小板血漿 (PRP) から派生した眼窩脂肪由来間質細胞の脂肪を含む、構成します。 ,6,7。現在の GF セットにより網膜 neuroenhancement フィラトフ、Meduri、Pelaez、調査と Limoli は自家脂肪移植 (AFT) が効果的な8,9,10であることを示しています。
また、事前調査は網膜電図 (ERG) データの重要な改善を示したと、AMD の影響を受けた目の乾燥11にポスト脈絡自家移植が記録されます。脈絡で外科的移植組織は変調のアポトーシス6,7,12を遅らせること、網膜細胞のパラクリン分泌です。核の外側の層の厚さを考慮したモルモットの網膜の病理組織学的検討は GFs が網膜に栄養効果を持っていることを示しています。したがって、GFs の直接または間接的な使用は、分子の誘導剤と阻害剤6,7,12のバランスのとれた関係を治療上の利点をもたらすことができる可能性があります。
このメソッドの目的は、脂肪細胞、SVF で PRP ADSCs の視細胞移植が最も向上するかどうかを評価するために修正視力 (BCVA) と microperimetry (MY) 反応 AMD の影響を受けた目の乾燥です。本研究は文献6,7,12,13によると、GF 生産に基づいて再建の治療効果を発揮することを目的と。

<table><tbody><tr><td>鈍いカニューレ、3 mm。</td><td>メンター、カリフォルニア州サンタバーバラ。</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Luer-LokTMシリンジ&nbsp;</td><td>BDバイオサイエンス、ニュージャージー州フランクリンレイクス。</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Regen-BCTチューブ。&nbsp;</td><td>RegenKitの;RegenLab、ルモンシュルローザンヌ、CH。</td><td></td><td></td></tr><tr><td>遠心分離機</td><td>&nbsp;RegenPRPセントリ。RegenLab、ルモンシュルローザンヌ、CH。</td><td></td><td></td></tr><tr><td>BDベンフロンプロセーフティ22G x 1.00インチ(0.9 mm x 25 mm)。</td><td>BDバイオサイエンス、ニュージャージー州フランクリンレイクス。</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SPSS統計バージョン19.0</td><td>IBM Corp.、アーモンク、ニューヨーク、米国。</td><td></td><td></td></tr><tr><td>共焦点走査型レーザー検眼鏡&nbsp;</td><td>Nidek Inc、フリーモント、カリフォルニア州</td><td>Nidek F10&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Cirrus 5000 Spectral Domain-Optical Coherence Tomography</td><td>Carl Zeiss Meditec AG, イェーナ, ドイツ</td><td>&nbsp;SD-OCT&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>マイア100809マイクロペリメトリー&nbsp;</td><td>CenterVue S.p.A., Padua, Italy</td><td></td><td></td></tr><tr><td>眼の電気生理学電気医療システム,</td><td>C.S.O., S.r.l., Scandicci, Italy</td><td></td><td>&nbsp;ERGのRetimax&nbsp;</td></tr></tbody></table>

乾燥 - 加齢黄斑変性症の視細胞の細胞移植による再生療法:体内の予備的なレポート

Regenerative Therapy by Suprachoroidal Cell Autograft in Dry Age-related Macular Degeneration: Preliminary In Vivo Report

自己細胞の視細胞移植は最高矯正視力 (BCVA) を向上させることが、microperimetry (MY) によって影響を受ける目のレスポンスを時間をかけて加齢による黄斑変性症 (AMD) を乾燥かどうかを調べることを本研究の目的は、生産と周囲の組織の成長因子 (GFs) が分泌。患者は各研究グループにランダムに割り当てられました。すべての患者は、乾燥 AMD BCVA (ログマー) の解像度の最小角度の 1 対数以上と診断されました。脈絡自家移植 Limoli 網膜修復法 (LRRT) では 11 患者から 11 目を含んだグループ A で実施されました。テクニックは、脂肪細胞、間質の血管分数と脈絡で多血小板血漿血小板から得られる脂肪幹細胞の注入によって行われました。逆に、14 人の患者の 14 目を含む B 群は対照群として使用されました。それぞれの患者の診断は、共焦点走査型レーザー検眼鏡、スペクトル ドメイン光コヒーレンストモグラフィー (SD 10 月) によって確認されました。グループ A の BCVA によって改善 0.581 に 0.504 0.376 ログマーと 90 日間で 180 日 (+32.20%) 術後。さらに、私のテスト 180 日 12.59 db 11.44 db 増加します。定数 GF 分泌脈絡膜の流れを確保するためは、脈絡膜の背後に接ぎ木した異なった細胞のタイプができました。したがって、結果を示す移植グループの視力 (VA) を増やすことができます 6 ヵ月後コントロール群よりも。

ここに示す手順を使用して、BCVA (ログマー) の解像度の最小角度の 1 対数以上と、AMD の影響を受けた患者の中でも乾燥の 2 つのグループの研究で在籍していた。グループ A に対し受信脈絡自家移植 Limoli 網膜修復法 (LRRT) による 11 患者の 11 目を含むグループ B、14 患者の 14 目を含む、対照群として使われました。
スチューデントの t 検定とカイ二乗検定は、それぞれ、(表 2) の 2 群間の平均年齢・性別分布を比較する使用されました。LRRT 手術の前後には、統計解析やデータの可視化を行った。
前と治療後の違いが有意かどうかを決定するウィルコクソン ‒ マン ‒ ホイットニーの符号付き順位検定を行った。この例のように、通常配布される人口を想定できない依存の 2...

本研究の目的は、間質血管の一部に含まれている脂肪由来幹細胞と血小板由来血小板豊富な血しょう Limoli 網膜修復技術の視細胞移植が視力を改善できるかどうかを評価するためには、乾燥 - 加齢黄斑変性症の影響を受ける目の網膜感度応答。

This study is aimed at examining whether a suprachoroidal graft of autologous cells can improve best corrected visual acuity (BCVA) and responses to ...

この外科的介入の全体的な目標は、網膜細胞のアポトーシスを遅らせる網膜神経強化を導入して、視力低下患者の視覚能力とリハビリテーションを改善することです。この方法は、乾燥性AMDや神経視神経萎縮症など、網膜萎縮性変性によって引き起こされるロービジョンの分野における重要な質問に答えるのに役立ちます。それは補助拡大装置によって自然な環境および視力の視力を改善する。これらの網膜修復は、下にあるコロイドによる血管茎脂肪の増加を促進し、茎の血管新生を促進し、椎弓根の健康と生存を改善します。この治療法は、成長因子の関与を通じて、すべての網膜要素に再生スタートアップを与えるためにも機能します。この技術は網膜変性を遅らせるために開発されましたが、治療が必要な成人組織や臓器系にも適用できます。まず、22ゲージの針を使用して8ミリリットルの末梢血を採取し、多血小板血漿を採取します。セパレーターゲル付きのクエン酸ナトリウム真空管を使用すると、細胞成分と血漿の分離が促進されます。血液のチューブを1500g、摂氏20度で5分間遠心分離します。血液は3つの層に分離します。血小板の少ない血漿からなる最上層を吸引して廃棄します。次に、多血小板血漿からなる中間層を収集して保存します。脂肪組織を採取するために、Limoli網膜修復のために黄斑変性症患者に麻酔をかけます。腹部皮下層から脂肪組織を採取します。ロッキングシリンジに接続された3ミリメートルの鈍いカニューレを使用して、約10ミリリットルの組織を採取します。ローレンスとコールマンのテクニックを使用します。次に、サンプルを摂氏1500度と20度で5分間回転させることにより、脂肪組織の間質血管画分を分離します。血液層のすぐ上に位置する間質血管画分は、脂肪由来の幹細胞が非常に豊富です。自家移植に必要なのは1ミリリットル以下です。最後に、0.5〜0.6ミリリットルの間質血管画分、0.2〜0.3ミリリットルの多血小板血漿、および0.1ミリリットルのヒアルロン酸を送達チューブにロードして、自家移植片を組成します。2本の注射器と3方向ストップコックでブレンドします。カニューレのチューブを5ミリメートルに角度をつけて、自家移植片を強膜下腔に注入しやすくします。手術を開始する前に、患者が座った状態で治療を行っている目に印を付けて、作業領域を区切り、目の生理的なサイクロねじれ効果を回避します。まず、下側頭輪の近くに6-0シルク縫合糸で強膜を固定することから修復手術を開始します。強膜の固定は重要なステップです。針は、深すぎず、表面的すぎず、辺縁部に入らなければなりません。目に穴を開けると、しぼんでしまいます。糸がオケタの場合、目は固定されません。なんというストレスでしょう!次に、5.5インチのウェストコット腱切開術湾曲ハサミを使用して、下側頭輪から11ミリメートルのところにある結膜下および腱下腔を開きます。そこに、Limoli基底結膜リトラクターを挿入して、強膜手術野を作成します。次に、5ミリメートルの三日月形のナイフを使用して、斜めに角度をつけて、強膜の下側頭象限、リンバスから8ミリメートルのフラップを事前にカットします。フラップヒンジを放射状にし、外科医の左側に付けます。次に、斜めに角度をつけた三日月形のナイフを使用して、幅約5ミリメートルの深い強膜ドアを開き、リンバスから8ミリメートルの下側頭象限に放射状のヒンジを付けます。眼球表面に対して接線方向に、非常にゆっくりと切断します。脈絡膜腔を貫通しないでください。理想的な深さは、下にある脈絡膜の青みがかった色が現れ、オフホワイトの強膜の痕跡が見えなくなるときに達成されます。この段階では、脈絡膜は薄い流氷のようです。強膜切除術の深さが十分でない場合、移植された細胞によって生成されたグラム因子は思うように浸透しません。強膜切開術が深すぎると、脈絡膜穿孔が起こり、出血や大量の穿孔を引き起こし、続いて網膜の損傷を引き起こす可能性があります。次に、眼窩脂肪を収集します。フラップの遠位部分にある小さな蓋を取り除くことにより、ギャップを作成します その後の脈絡膜上自家移植片の血液循環を促進します。次に、眼科用鉗子を使用して、下斜筋の上の隙間から眼窩脂肪を抽出します。茎からの小さな出血に注意してください。これらは、自家移植片の生存に重要な良好な血管新生を示しています。眼窩脂肪手術も重要なステップです。出血や筋肉の切り傷を防ぐために、ハサミを使わずに眼窩腔を開きます。次に、脂肪茎を強膜に固定する前に、脂肪茎を分離します。次に、自家脂肪茎を脈絡膜ベッドにそっと置き、脈絡膜6-0ポリグラクチン繊維を使用して、ドアの近位端に沿って縫合します。次に、強膜フラップを縫合して、脂肪茎またはその栄養血管の圧迫を防ぎます。次に、脂肪茎の間質に、30ゲージの角度付きカニューレを使用して、1ミリリットルの多血小板血漿ゲルに浸潤します。次に、リトラクターを取り外して、結膜の側面を縫合する準備をします。次に、7-0ポリグラクチン繊維を使用して結膜を縫合しますが、閉じないでください。小さな柔軟なチューブを強膜ポケットに挿入するのに十分なスペースを残してください。次に、チューブを強膜ポケットに挿入し、自家移植片を強膜下腔に注入します。最後に、多血小板血漿、抗生物質、およびステロイドで構成される結膜下ハイブリッドを注入します。次の3日間は全身抗生物質療法を提供し、次の15〜20日間は、抗生物質とステロイドの両方を含む点眼薬を提供します。乾燥性加齢黄斑変性症の患者は、2つのグループに分けられました。それぞれが、BAMログスケールで少なくとも1の最高正解視力スコアを持っていました。対照群の患者は、抗酸化サプリメントに基づく治療と必要に応じて視覚リハビリテーションを受けましたが、実験群はLRRTを受けました。結果の診断は、共焦点走査型レーザー検眼鏡とスペクトル領域光干渉断層撮影法を用いて行った。90日後、治療群のBAMログスコアは改善し、180日後にはさらに改善しました。さらに、LRRTで治療された患者のマイクロペリミトリテストスコアは、平均11.44デシベルから平均12.59デシベルに増加しました。全体として、これらの結果は、脈絡膜の背後に移植されたさまざまな細胞タイプが、脈絡膜の流れへの成長因子の一定の分泌を確保できたことを示唆しています。その結果、移植群の視力は対照群よりも増加しました。このビデオを見た後、成長因子と残存網膜細胞との間の相互作用を促進する手術を使用した細胞アポトーシスの潜在的な治療法についてよく理解しているはずです。一度習得すると、このテクニックは適切に実行されれば、片目あたり13分で行うことができます。この手順を試みるときは、強膜の固定中、および深部強膜切開を行う際に慎重に踏むことが重要です。それ以外の点では、この手法は比較的単純で安全です。その開発後、この技術は、神経網膜萎縮性変性を停止または減速し、その視覚能力を改善する可能性を探求するために、網膜修復の分野の研究者への道を開きました。

regenerative-therapy-suprachoroidal-cell-autograft-dry-age-related

Research

JoVE Journal

Medicine

医学

細胞移植は、感光体喪失を特徴とするレチン系変性の治療のための戦略を表す。ここでは、移植可能な感光体の濃縮方法と、その副レチング移植を成体マウスに説明する。...

MACSの精製された感光体前駆体細胞の成人マウス・レチナへの副腎移植

ここでは、ラットとマウスにRPE細胞のボーラスを網膜下注射するためのマルチメディア形式でコミュニティが受け入れたプロトコルを紹介します。このアプローチは、網膜変性の動物モデルに移植された移植されたRPE細胞のレスキューの可能性、安全性プロファイル、および生存能力を決定するために使用できます。...

懸濁液中の網膜色素上皮細胞を送達するげっ歯類における網膜下注射の実行

網膜色素上皮（RPE）の交換戦略と遺伝子ベースの治療は、いくつかの網膜変性条件のために考慮されています。臨床翻訳のために、大きな目の動物モデルは、患者において適用外科技術を研究するために必要とされます。ここでは、汎用性とコスト効率であるRPE移植、に向けた網膜下手術のためのウサギモデルを提示します。...

ウサギにおける網膜下手術のためのステッププロトコルによってステップ

網膜の注射は、加齢黄斑変性症に対する幹細胞補充療法の臨床研究で広く適用されています。この可視化の記事でラットの目に細胞を提供する強膜によるリスクの少ない、再現性と正確に変更された網膜注入手法について述べる。...

強膜網膜移植ひと網膜色素上皮細胞のラットの目の洗練されたプロトコルの開発

網膜色素上皮細胞は乾燥加齢による黄斑変性症の高度なフォームのセル置換療法として役立つことができます。このプロトコルでは、地理的な萎縮の目の大きいモデルと病気のこのモデルにヒト胚性幹細胞由来網膜色素上皮細胞の網膜下移植の世代について説明します。...

地図状委縮の目の大きいモデルにヒト胚性幹細胞由来網膜色素上皮細胞の網膜下移植

このプロトコルの目的は、高齢者や病気にかかった人間ブルッフ膜の網膜色素上皮 (RPE) 細胞の培養を示すことです。このメソッドは、侵害された細胞外のマトリックスの RPE...

高齢者人間ブルッフ膜のEx Vivoモデルの網膜色素上皮細胞の培養

人間の羊膜と動物モデルにおける組織移植のための準備の上に培養したひと多能性幹細胞由来網膜色素上皮細胞から成る網膜組織を設計する手法を提案します。...

ヒト胚性幹細胞に由来する移植適切な網膜色素上皮組織をエンジニア リング

ここでは、種々の哺乳動物(マウス、ラット、ウサギ、ブタ、ウシ)から一次虹彩および網膜色素上皮細胞を単離およびトランスフェクトするプロトコルが提示される。この方法は、ヒトに移管可能なエクスビボ分析およびインビボ研究のための様々なセットアップにおける眼遺伝子治療アプローチを研究するのに理想的である。...

非ウイルス遺伝子治療のための哺乳動物一次色素上皮細胞の単離、培養、遺伝子工学

非ヒト霊長類(NHP)は、解剖学的および遺伝的類似性によるヒトの細胞疾患治療を研究するための理想的なモデルである。本稿では、NHP眼における網膜色素上皮細胞の脳下移植法と、黄斑操作に伴う術中合併症を予防するための戦略を記載する。...

ヒト以外の霊長類モデルにおける変性網膜疾患の網膜色素上皮移植

このプロトコルは、網膜変性の有無にかかわらず、マウスレシピエントにおいて、外科的合併症の発生率が低い網膜下細胞移植片を安全かつ正確に送達するための経瞳孔ビジョン誘導経強膜アプローチを提示します。...

網膜変性マウスモデルにおける網膜下移植片の経瞳孔ガイド下経強膜移植

我々は、凍結保存後のヒトES細胞由来の光受容体前駆細胞の調製と、 rd10...

rd10マウスにおけるヒト胚性幹細胞由来光受容体前駆細胞の網膜下送達

学ぶ、乾性加齢黄斑変性症の視細胞再生療法。脂肪由来幹細胞と血小板を用いた脈絡膜上移植により、視力と網膜感度を改善する革新的な外科手術技術を探索する。

乾燥 - 加齢黄斑変性症の視細胞の細胞移植による再生療法:体内の予備的なレポート

さらに動画を探す