Name: スクラッチ テストによるウシ皮質骨の脆弱性評価 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-11-30T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 36 s
Description: 学ぶ 顕微鏡スクラッチ試験法によるウシ皮質骨の破壊靭性評価手法。小試料に適した半破壊的・再現性の高い方法で、骨脆弱性や骨リモデリングのメカニズム解明に貢献します。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

この仕事は、土木科、環境工学とイリノイ大学アーバナ シャンペーン校工学部によって支えられました。我々 は度 Mendu の大学院の研究を支援するためラビンドラ Kinra と Kavita Kinra 交わりを認めます。フレデリック ・ ザイツ材料研究所、イリノイ大学アーバナ シャンペーン校ベックマン研究所の施設・設備で走査型電子顕微鏡による研究を行った。

注: ここで説明されているプロトコル イリノイ施設動物ケアおよび使用委員会の動物のケアのガイドラインに従います。
1. 試験片の調達
<ol><li>アメリカ合衆国農務省 USDA 認定食肉処理場から新鮮な収穫のウシ大腿骨を収集し、クーラーにプラスチック気密袋にそれらを輸送します。 注: ここで行われた調査、大腿骨は 24-30 月古い、トウモロコシ、および重量を量られた約 1,000 - 1,100 ポンドをされた動物から収集されました。</li>
	<li>標本の準備手順の開始まで 20 ° C -で大腿骨を固定します。この温度は、大腿骨の新鮮な12,13,14を保持します。</li>
</ol>2 カット、洗浄、および試料の埋め込み
<ol><li>約 2 時間室温で水を容器で冷凍の大腿骨を解凍します。</li>
	<li>皮質骨の断面積が一様に標本を生成するテーブル トップ ダイヤモンド バンドソーを使用して中間の骨幹地域から複数のディスク約 10-15 mm の厚さをカットします。</li>
	<li>軟部組織や皮質骨の肉を除去するのに解剖キットを使用します。</li>
	<li>手順 2.2 ダイヤモンド wafering ブレードを用いた低速で取得した、大腿骨断面カットを複数ほぼ立方形のセクションを取得する骨の長軸方向の湿潤条件下で見た。 注: ここでは、標本準備および短い-スクラッチ検査のみ縦標本については、説明します。ただし、切断の方向以外準備手順の横方向の同じまま。</li>
	<li>超音波洗浄器で 20 分の持続期間のため溶液 1.5% アニオン系の洗剤を使用し、5% の漂白剤の標本をきれい。</li>
	<li>
皮質骨の標本をアクリル樹脂に埋め込む (ここポリメタクリル酸メチル (PMMA)) ハンドリングと安定性の容易さのため。
	<ol>
<li>離型剤、金型の壁はコートに試料を埋め込むには、まず。アクリル樹脂や PMMA の製造元の指示に従って、ビーカー中の硬化剤混ぜます。</li>
		<li>カットの皮質骨標本の 1 つに配置各金型の表面に傷が下向き。アクリル樹脂の組合せを注ぐこれら標本のホールダーを準備します。標本は 4-5 h までの期間に治療しましょう。</li>
	</ol>
</li>
	<li>5 mm 厚ディスクに埋め込まれた標本をカット、低速を使用して傷が表面の公開を見て、マウント径の金属 (アルミニウム) ディスクに標本 34 mm、高さ 5 mm のシアノアクリ レート系接着剤を使用します。</li>
	<li>ハンクス バランスの取れた生理食塩水ソリューション (HBSS) を浸したゲージで標本をラップし、4 ° C でさらに使用15,16まで冷蔵庫で冷やします。</li>
</ol>3. 研削・研磨のプロトコル
注: 前提に小さい長さのスケールで高精度のテスト標本の滑らかで同点表面であります。プロトコルを研磨前13,17は、大規模な表面粗さ測定における実質的な不正確さに 。課題は低平均表面粗さ 100 未満を達成するためにある広域 3 × 8 mm2表面上の nm。
<ol><li>それぞれ 1 分と 5 分の 400 粒、600 粒の炭化ケイ素の論文を利用して常温でウシ皮質骨標本を挽きます。基本速度 100 rpm および 150 rpm、研磨機、それぞれを保持します。</li>
	<li>マシンは、ステップごとに 15 分の持続期間のための 800 のそして 1,200 の屑のペーパーに室温でウシ皮質骨標本を挽きます。基本速度 150 rpm、60 rpm と運転 1 ポンドの負荷のヘッド スピードで研磨機を維持します。</li>
	<li>ハード、穴あき、不織布の上と同じ順序で 3 μ、1 μ m、0.25 μ m ダイヤモンド懸濁液ソリューションを使用して室温で 90 分の持続期間のための標本を磨きます。それぞれ各ステップで 300 rpm と 60 rpm、ポリッシャーのベースとヘッド スピードで 1 ポンドの負荷の動作を維持します。</li>
	<li>試料を合成、柔らかいレーヨン布の上 0.05 μ m のアルミナ懸濁液ソリューション 100 rpm と 60 rpm のベースとヘッド スピードで 1 lb 90 分の持続期間のためそれぞれ、また室温を磨きます。</li>
	<li>脱イオン水でビーカーに試料を置くし、研削・研磨に残留物をきれいにし、交差汚染を避けるための連続した各ステップの間に 2 分間超音波風呂でビーカーを置きます。</li>
	<li>光学顕微鏡・ SEM イメージングを使用して表面の特徴を表示します。 注:図 1ヒツジ、ハバース運河、セメント ラインのように、間質性の領域、および窩は認めウシ皮質骨の標本。これらの撮像方法では、皮質骨片の多孔性、異種、異方性の性質を明らかにします。また、研磨面の品質を評価するために標本の高度な表面検査を行った。代表的な研磨面を図 2に示します。</li>
</ol>4. マイクロ スクラッチ テスト
注: マイクロ スクラッチ テストはマイクロ スクラッチ試験機 (図 3) を使用して洗練されたウシ皮質骨の標本で行われます。ロックウェル圧子先端半径 200 μ m と尖角 120 度のダイヤモンドは、研究に使用されます。30 名までの線形進行負荷のアプリケーションでも使用可能します。さらに、計測器が水平荷重、浸透の深さ、傷により生成されるアコースティック ・ エミッション測定高精度センサーを装備にします。楽器は、スクラッチ溝のパノラマをキャプチャできます。
<ol><li>皮質骨片を試験前に参考材料3としてポリカーボネートを使用してロックウェル圧子先端を調整します。</li>
	<li>皮質骨標本をステージに配置し、マイクロのスクラッチ試験機モジュールに統合されたセットアップ光学顕微鏡によるスクラッチ テストのサイトを選択します。</li>
	<li>30 名の 30 mN と終了のロードの開始の負荷直線進歩的な荷重を適用します。読み込み速度は、60 N/分とスクラッチの長さ 3 mm に設定する必要があります。</li>
	<li>短い縦方向 (図 3 b) のスクラッチ テストのシリーズを実行ウシ皮質骨標本図 3に示す。</li>
	<li>それら水和を維持するすべての 3 〜 4 スクラッチ テストのセット後 HBSS で試料表面を濡らします。</li>
	<li>2モデルの非線形破壊力学に基づくスクラッチ試験データを分析します。</li>
</ol>

<ol><li>Akono, A., Reis, P., Ulm, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scratching+as+a+fracture+process%3A+From+butter+to+steel%5BTitle%5D)+AND+%22Phys+Rev+Lett%22%5BJournal%5D)">Scratching as a fracture process: From butter to steel.</a> Phys Rev Lett. 106 (20), 204302-204304 (2011).</li>
<li>Akono, A. T., Randall, N. X., Ulm, F. J. <a target="_blank" href="https://www.cambridge.org/core/journals/journal-of-materials-research/article/experimental-determination-of-the-fracture-toughness-via-microscratch-tests-application-to-polymers-ceramics-and-metals/77F2DBD39131579AD83C981C8BCB7C0B">Experimental determination of the fracture toughness via microscratch tests: application to polymers, ceramics, and metals.</a> J of Mat Res. 27 (02), 485-493 (2012).</li>
<li>Akono, A. T., Ulm, F. J. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0043164814000593">An improved technique for characterizing the fracture toughness via scratch test experiments.</a> Wear. 313 (1-2), (2014).</li>
<li>Akono, A. T. <a target="_blank" href="http://ascelibrary.org/doi/abs/10.1061/(ASCE)NM.2153-5477.0000105">Energetic size effect law at the microscopic scale: Application to progressive-load scratch testing.</a> J of Nanomech and Micromech. 6 (2), (2016).</li>
<li>Kataruka, A., Mendu, K., Okeoghene, O., Puthuvelil, J., Akono, A. -T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microscopic+assessment+of+bone+toughness+using+scratch+tests%5BTitle%5D)+AND+%22Bone+Reports%22%5BJournal%5D)">Microscopic assessment of bone toughness using scratch tests.</a> Bone Reports. 6, 17-25 (2017).</li>
<li>Melvin, J. W., Evans, F. G. Crack propagation in bone. ASME Biomech Symp. , New York. (1973).</li>
<li>Norman, T. L., Vashishth, D., Burr, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+groove+on+bone+fracture+toughness%5BTitle%5D)+AND+%22J+of+Biomech%22%5BJournal%5D)">Effect of groove on bone fracture toughness.</a> J of Biomech. 25 (12), 1489-1492 (1992).</li>
<li>Behiri, J. C., Bonfield, W. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/BF00550605">Crack velocity dependence of longitudinal fracture in bone.</a> J of Mat Sc. 15 (7), 1841-1849 (1980).</li>
<li>Mullins, L. P., Bruzzi, M. S., McHugh, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+the+microstructural+fracture+toughness+of+cortical+bone+using+indentation+fracture%5BTitle%5D)+AND+%22J+of+Biomech%22%5BJournal%5D)">Measurement of the microstructural fracture toughness of cortical bone using indentation fracture.</a> J of Biomech. 40 (14), 3285-3288 (2007).</li>
<li>Harding, D. S., Oliver, W. C., Pharr, G. M. <a target="_blank" href="https://www.cambridge.org/core/journals/mrs-online-proceedings-library-archive/article/cracking-during-nanoindentation-and-its-use-in-the-measurement-of-fracture-toughness/B98631CB666CA3CD3D554135BEC2D845">Cracking during nanoindentation and its use in the measurement of fracture toughness.</a> MRS Proceedings. 356, Cambridge University Press. 663-668 (1994).</li>
<li>Islam, A., Dong, X. N., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanistic+modeling+of+a+nanoscratch+test+for+determination+of+in+situ+toughness+of+bone%5BTitle%5D)+AND+%22J+of+the+Mech+Bhvr+of+Biomed+Mat%22%5BJournal%5D)">Mechanistic modeling of a nanoscratch test for determination of in situ toughness of bone.</a> J of the Mech Bhvr of Biomed Mat. 5 (1), 156-164 (2012).</li>
<li>McAlden, R. W., McGeogh, J. A., Barker, M. B., Court-Brown, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+changes+in+the+tensile+properties+of+cortical+bone%3A+the+relative+importance+of+changes+in+porosity%2C+mineralization+and+microstructure%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Bone+Joint+Surg%22%5BJournal%5D)">Age-related changes in the tensile properties of cortical bone: the relative importance of changes in porosity, mineralization and microstructure.</a> J. Bone Joint Surg. 75, 1193-1205 (1993).</li>
<li>Zioupos, P., Gresle, M., Winwood, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fatigue+strength+of+human+cortical+bone%3A+age%2C+physical%2C+and+material+heterogeneity+effects%5BTitle%5D)+AND+%22J+of+Biomed+Mat+Res+Part+A%22%5BJournal%5D)">Fatigue strength of human cortical bone: age, physical, and material heterogeneity effects.</a> J of Biomed Mat Res Part A. 86 (3), 627-636 (2008).</li>
<li>Linde, F., Sørensen, H. C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+different+storage+methods+on+the+mechanical+properties+of+trabecular+bone%5BTitle%5D)+AND+%22J+of+Biomech%22%5BJournal%5D)">The effect of different storage methods on the mechanical properties of trabecular bone.</a> J of Biomech. 26 (10), 1249-1252 (1993).</li>
<li>Zioupos, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accumulation+of+in-vivo+fatigue+microdamage+and+its+relation+to+biomechanical+properties+in+ageing+human+cortical+bone%5BTitle%5D)+AND+%22J+of+Microscopy%22%5BJournal%5D)">Accumulation of in-vivo fatigue microdamage and its relation to biomechanical properties in ageing human cortical bone.</a> J of Microscopy. 201 (2), 270-278 (2001).</li>
<li>Yan, J., Clifton, K. B., Mecholsky, J. J., Reep, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fracture+toughness+of+manatee+rib+and+bovine+femur+using+a+chevron-notched+beam+test%5BTitle%5D)+AND+%22J+of+Biomech%22%5BJournal%5D)">Fracture toughness of manatee rib and bovine femur using a chevron-notched beam test.</a> J of Biomech. 39 (6), 1066-1074 (2006).</li>
<li>Xu, J., Rho, J. Y., Mishra, S. R., Fan, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atomic+force+microscopy+and+nanoindentation+characterization+of+human+lamellar+bone+prepared+by+microtome+sectioning+and+mechanical+polishing+technique%5BTitle%5D)+AND+%22J+of+Biomed+Mat+ResPart+A%22%5BJournal%5D)">Atomic force microscopy and nanoindentation characterization of human lamellar bone prepared by microtome sectioning and mechanical polishing technique.</a> J of Biomed Mat ResPart A. 67 (3), 719-726 (2003).</li>
<li>Yan, J., Mecholsky, J. J., Clifton, K. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+tough+is+bone%3F+Application+of+elastic%E2%80%93plastic+fracture+mechanics+to+bone%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">How tough is bone? Application of elastic–plastic fracture mechanics to bone.</a> Bone. 40 (2), 479-484 (2007).</li>
<li>Ritchie, R. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+conflicts+between+strength+and+toughness%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Mater%22%5BJournal%5D)">The conflicts between strength and toughness.</a> Nat Mater. 10 (11), 817-822 (2011).</li>
<li>Kim, K. T., Bažant, Z. P., Yu, Q. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/s10704-013-9821-8">Non-uniqueness of cohesive-crack stress-separation law of human and bovine bones and remedy by size effect tests.</a> Intrnl J of Frac. 181 (1), 67-81 (2013).</li>
<li>Bazant, Z. P., Planas, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBazant%2C+ZP+%22Fracture+and+size+effect+in+concrete+and+other+quasibrittle+materials%22">Fracture and size effect in concrete and other quasibrittle materials</a>. 16, CRC press. (1997).</li>
</ol>

著者が明らかに何もありません。

マイクロのスクラッチ テストは、混合モード破壊3を誘発します。さらに、短い縦ウシ皮質骨片の破壊過程はプローブはさらに深く掘り下げて、アクティブ化されます。3 ミリメートル長い傷プローブ プリズムのボリュームは約 3,600 μ m 長い、600 μ m、幅 480 μ m 深い。この大量に均質化された応答予測を助けた。非線形破壊力学モデルJに基づく破壊耐力を抽出することができました-積分計算1,2,4。
ウシ皮質骨の標本は、以前の文書5の使用されたブタの標本と比較した場合をテストするための広い領域を提供します。しかし、ウシ皮質骨の標本にブタから微細構造機能のサイズに対応する違いがあります。これは牛の標本のための新しい研磨プロトコルの開発につながった。さらに、メソッドの開発中に準備ウシ皮...

本研究ではマイクロ スクラッチ手法1,2,3,4を使用してマイクロ スケール (ラメラ レベル) にメソスケール (ヒツジ) から牛緻密骨の破壊靭性を測定します。 5。骨のき裂発生とき裂を含む破壊過程は異なる構造成分と階層のさまざまなレベルでの組織のための長さのスケールで直接受けます。したがって、小さい長さのスケールで骨破壊を評価する骨の脆弱性の根本的な理解に不可欠です。一方、三点曲げなど従来のテスト コンパクト張力と曲げ試験が牛大腿骨と脛骨巨視的スケール6,7,破壊特性評価のために一般的8です。 一方、顕微鏡のスケールで破壊靭性を測定するビッカースの押し込み破壊された提案9。ビッカースの圧子を使用して放射状の裂け目を生成する微小押込みを行った。さらに、シャープなキューブ コーナー圧10を使用してオリバー ファー ナノインデンテーション破壊靱性法を行った。
上記ナノインデンテーション試験による破壊靱性研究の観察者によって測定したため発生したき裂の長さと破壊靭性を求めるための半経験的モデルだった。ただし、これらのメソッドは、照らし合わせ、主観的なもので、結果、光学顕微鏡や走査電子顕微鏡のき裂長さを測定する必要があるのため観察者のスキルに大きく依存。さらに、スクラッチ テストをナノレベルで行ったが基になる数学モデル物理ベースひび割れによる強度低下を考慮しないし、11の欠陥します。従って、知識のギャップが存在している: 物理学ベースの機械論的モデルに基づいて顕微鏡レベルでの破壊評価手法。知識のこのギャップは、マイクロのスクラッチ テストのアプリケーションをブタの標本5にまず焦点を当てて骨をコンパクトな動機。研究は、さらにウシ皮質骨を理解するため拡張されています。
標本の 2 つの異なる方向が可能: 縦横や短い縦方向。縦の横行は、破壊特性大腿骨の長軸に垂直に対応します。一方、短い縦5大腿骨の長軸に沿って破壊特性に対応します。この研究では短い縦方向の骨の破壊抵抗を特徴付けるためウシ皮質骨にスクラッチ試験を適用します。

<table><tbody><tr><td>テーブルトップダイヤモンドバンドソー</td><td>マクマスターカー、エルムハースト、イリノイ</td><td>州モデル&nbsp;C-40</td><td>ブレード速度は時速40マイル。刃の寸法:直径37インチ、幅0.02インチ、深さ0.14インチ</td></tr><tr><td>ビューラー Isomet 5000 精密カッター</td><td>ビューラー、41 Waukegan Rd、レイクブラフ、イリノイ州 60044</td><td>112780</td><td>ブレード速度 50 rpm incrmentsで 200-5000 rpm の範囲のブレード速度; 8 インチ ダイヤモンド ウェーハ ブレード</td></tr><tr><td>ブランソン 5800 超音波クレンザー</td> <td>(スルー) グレインジャー、ピオリア、イリノイ州</td><td>39J365</td><td>ブランソニック CPXH 超音波バスは 2.5 ガロン</td></tr><tr><td>のタンク容量を持っていますビューラー エコメット 250 グラインダー - ポリッシャー</td><td>ビューラー,41 Waukegan Rd, Lake Bluff, IL 60044</td><td>497250</td><td>8 インチ ベース プレート 速度範囲 10-500 rpm</td></tr><tr><td>アントンパール社、CSM インスツルメンツ マイクロ スクラッチ テスター</td><td>アントンパール社 スイス AG</td><td>163251社 コンパクト</td><td>プラットフォーム、アクースト エミッション センサー</td></tr><tr><td>JEOL 6060LV 汎用走査型電子顕微鏡</td><td>JEOL USA, Inc., Peabody, MA</td><td></td><td>低真空でのイメージングを可能にする環境走査型電子顕微鏡です。</td></tr><tr><td>フィリップス XL30 ESEM FEG&nbsp;</td><td>FEI社の</td><td></td><td>ウェットモード動作により、非導電性サンプルを変更せずにイメージングできます&nbsp;</td></tr><tr><td>名前</td><td>会社</td><td>カタログ番号</td><td>コメント</td></tr><tr><td>消耗品</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>牛大腿骨</td><td>L&M屠殺場、ジョージタウン、イリノイ州</td><td></td><td>トウモロコシ給餌、生後24〜30か月の成熟した牛の標本。</td></tr><tr><td>アルコノックス粉末精密クリーナー</td><td>アルコノックス株式会社、30 Glenn St.、Ste. 309、White Plains、NY、10603</td><td>1104-1</td><td>生分解性、非苛性、干渉残留物フリー</td></tr><tr><td>アクリルプラスチック鋳造</td><td>電子顕微鏡科学</td><td>24210-02</td><td>ポリメチルメタクリレート</td></tr><tr><td>カービメットSiC研磨紙 400グリット、8インチ、PSA支持</td><td>Buehler、41 Waukegan Rd、Lake Bluff、IL 60044</td><td>36080400</td><td>研削 - 研磨剤紙</td></tr><tr><td>CarbiMetSiC研磨紙600グリット、8インチ、PSA支持</td><td>Buehler、41 Waukegan Rd、Lake Bluff、IL 60044</td><td>36080600</td><td>研削 - 研磨紙MicroCut</td></tr><tr><td>Discs 800グリット、8インチ、PSA支持</td><td>Buehler、41 Waukegan Rd、Lake Bluff、IL 60044</td><td>36080800</td><td>研削 - 研磨紙MicroCut</td></tr><tr><td>ディスク800グリット、8インチ、PSA支持</td><td>ビューラー、41 Waukegan Rd、レイクブラフ、 IL 60044</td><td>16081200</td><td>研削 - 研磨紙</td></tr><tr><td>Texmet P 8 インチ ホイール PSA</td><td>Buehler、41 Waukegan Rd、Lake Bluff、IL 60044</td><td>407638</td><td>研磨布</td></tr><tr><td>8 インチ マイクロクロス PSA</td><td>Buehler、41 Waukegan Rd、Lake Bluff、IL 60044</td><td></td><td>407518 研磨布</td></tr><tr><td>メタ ディ スプリーム多結晶ダイヤモンド懸濁液、3 & マイクロ;m</td><td>Buehler、41 Waukegan Rd、Lake Bluff、IL 60044</td><td>406631</td><td>研磨サスペンション</td></tr><tr><td>Meta Di Supreme 多結晶ダイヤモンド懸濁液、1 & マイクロ;m</td><td>Buehler、41 Waukegan Rd、Lake Bluff、IL 60044</td><td>406630</td><td>研磨サスペンション</td></tr>Meta <tr><td>Di Supreme多結晶ダイヤモンドサスペンション、0.25&マイクロ;m</td><td>Buehler、41 Waukegan Rd、Lake Bluff、IL 60044</td><td>406629</td><td>研磨サスペンション</td></tr><tr><td>MasterPrep研磨サスペンション、0.05&micro;m</td><td>Buehler,41 Waukegan Rd, Lake Bluff, IL 60044</td><td>40-6377-032</td><td>研磨懸濁液</td></tr><tr><td>HBSS、カルシウム、マグネシウム、フェノールなし 赤</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>14025126</td><td>バッファー溶液</td></tr></tbody></table>

スクラッチ テストによるウシ皮質骨の脆弱性評価

Fragility Assessment of Bovine Cortical Bone Using Scratch Tests

骨は組織の 5 つの異なるレベルで複雑な階層的な素材です。高齢化などの要因や骨粗しょう症のような病気は、破壊が発生しやすいこと、骨の脆弱性を増加します。おかげで私たちの社会での骨破壊の大きい社会経済的影響、骨の各階層レベルの機械的性能を評価するために斬新な方法の必要性があります。剛性と強度は、ナノ、マイクロ、メゾ、-すべてのスケールで検出できるし、巨視的-破壊評価のところに限定されてきた巨視的テストします。この制限は、骨破壊の私達の理解を制限し、実験室および臨床研究のスコープを制限します。本研究では、非線形破壊力学と組み合わせてマイクロのスクラッチ テストを用いたメゾスコ ピック長さスケール マイクロから骨の破壊抵抗を調査します。テストは、ウシ皮質骨標本の短い縦方向で実行されます。綿密な実験的プロトコルを開発し、(102) 多数のテストが関連付けられて骨微細構造の不均一性を考慮して皮質骨片の破壊靱性の評価を行います。

原子間力顕微鏡は、研磨面の粗さを測定に使用されました。表面粗さが関心の表面の特徴よりも小さい大きさの順序の場合親指のルールとして洗練の 1 つとして試料の資格します。この場合、60 の測定表面粗さ 40 μ x 40 μ m 領域の上の nm は明らかにこの基準内します。
対浸透力の短い縦ウシ皮質骨片に対して代表的なスクラッチ テストの深さのグラフを図 4に示します。垂直の力が所定の増分負荷されている水平力はプローブによって経験される抵抗を測定です。図 5は、フラクチャされた短い縦ウシ皮質骨表面の走査型電子顕微鏡画像を示しています。この画像チッピングや剥離表面と微小割れなど本質的な靭性化機構の発生、き裂の偏向、クラック追従。2モデルの非線形破壊力学に基づく MATLAB スクリプトを使用...

本研究では、微細なスクラッチ テストを使用して sub メソ レベルでウシ皮質骨の破壊じん性を評価します。これは、元の目的は、厳格なと再現可能な手法を提案する巨視的スケール以下破壊靭性を調査します。潜在的なアプリケーションは、骨粗しょう症などの病気が骨の脆弱性の変更を検討しています。

Bone is a complex hierarchical material with five distinct levels of organization. Factors like aging and diseases like osteoporosis increase the ...

この研究の全体的な目標は、顕微鏡的スクラッチテストを使用して、中規模での皮質骨の骨折挙動を特徴付けることです。この方法は、生体組織の脆弱性やコンパクトな骨のリモデリングなど、生体力学や骨折力学の分野からの主要な質問に答えるのに役立ちます。この手法の主な利点は、小さな標本に適していることです。それは厳密で、再現性があり、半破壊的です。さらに、この方法は、力と深さの測定のみに依存しているため、客観的です。その手順を実演するのは、私の研究室の大学院生であるKavya Menduです。この手順を開始するには、凍結した大腿骨を水を入れた容器で室温で約2時間解凍します。次に、テーブルトップダイヤモンドバンドソーを使用して、骨幹中央部から厚さ約10〜15ミリメートルの複数のディスクを切断し、皮質骨の断面積が均一な標本を作成します。その後、解剖キットを使用して、皮質骨に付着した軟部組織や肉をすべて取り除きます。ダイヤモンドウェーハブレードを使用して、濡れた条件下で骨の縦軸に沿って低速で大腿骨の断面を切断し、複数の波立方体切片を取得します。次に、1.5%陰イオン洗浄剤と5%漂白剤の溶液で試料を超音波洗浄機で20分間洗浄します。その後、皮質骨標本をアクリル樹脂に埋め込むことで、取り扱いの容易さと安定性を確保するため、まず型の壁に離型剤を塗布します。その後、ビーカーにアクリル樹脂と硬化剤を混ぜます。切断した皮質骨標本の1つを、引っ掻く面を下に向けて各型に入れます。これらの準備した試料ホルダーにアクリル樹脂混合物を注ぎます。混合プロセス中に閉じ込められた気泡を取り除きます。標本を4〜5時間硬化させます。その後、埋め込まれた試料を低速で5mmの厚さの円盤に切断し、傷がつく表面を露出させます。次に、シアノアクリレート接着剤を使用して、直径34ミリメートル、高さ5ミリメートルのアルミニウムディスクに試料を取り付けます。次に、HBSSで衝撃を受けたゲージで標本を包みます。そして、さらに使用するまで摂氏4度で冷蔵します。この手順では、400グリットと600グリットの炭化ケイ素紙を使用して、ウシ皮質骨標本を室温でそれぞれ1分と5分間粉砕します。グラインダーポリッシャーをそれぞれ100rpmと150rpmの基本速度に維持します。その後、800グリット紙と1200グリット紙で室温でウシ皮質骨標本を機械で粉砕し、各ステップで15分間粉砕します。グラインダーポリッシャーを基本速度150 rpm、ヘッド速度60 rpm、操作負荷1ポンドに維持します。3マイクロメートル、1マイクロメートル、0.25マイクロメートルのダイヤモンド懸濁液を同じ順序で、硬質の穴あき不織布で室温でそれぞれ90時間研磨します。各ステップの操作負荷を1ポンドに維持し、ポリッシャーのベース速度とヘッド速度をそれぞれ300rpmと60r

fragility-assessment-of-bovine-cortical-bone-using-scratch-tests

Research

JoVE Journal

Bioengineering

バイオエンジニアリング（生体工学）

短い臨床検査プロトコルは羊およびヤギの古典的および非定型的なスククレーピーの検出を助けるために提示される。...

羊の非定型および古典スククレープを検出する臨床検査プロトコル

候補インプラント表面への試験、骨固定を機械的にするための改良された方法が提示される。この方法は、正確に垂直又は平行、インプラント表面の平面に対して破壊力の整列を可能にし、正確なインプラント周囲の領域に破壊力を向けるための正確な手段を提供する。...

骨 - インプラントアンカレッジ評価するために改良された機械的試験方法

移動能力は、間葉系間質細胞(MSC)を含む多くの異なる細胞タイプの重要な機能です。しかし、被害後の回遊能力の変化を定量化することは困難です。このプロトコルは、損傷後のMSC遊走能力の変化を定量化するために厳密な統計を使用する、容易に適応可能な遊走アッセイを説明しています。...

可溶性タバコの煙抽出物によって損傷した後のマウス間葉系幹細胞の移動の変化を検出するために創傷スクラッチアッセイの最適化

ここでは、一次線維芽細胞を用いてインビトロスクラッチアッセイを行い、マウスにおける生体内皮膚創傷治癒アッセイに関するプロトコルを提示する。両方のアッセイは、インビトロおよびインビボ創傷治癒を評価するための簡単な方法です。...

インビトロおよび創傷治癒の生体内分析のためのスクラッチ移行アッセイとドーサルスキンフォールドチャンバー

本プロトコルは、内側ミニスコティビアル靭帯を切断することによってマウス膝を不安定化させた後の関節軟骨の表面における制御されたマイクロブレードの引っかき傷を記載する。この動物モデルは、骨棘形成、骨硬化症、および初期段階の痛みの研究に適した変形性関節症(OA)の加速型を提示します。...

加速変形性関節症の内側半月板および軟骨スクラッチマウスモデルの不安定化

マイクロコンピュータ断層撮影(μCT)は、前臨床試験で骨構造を評価するのに役立つ非破壊イメージングツールですが、骨治癒カルスを分析するためのμCT手順についてはコンセンサスがありません。この研究は、骨折治癒のモニタリングを可能にする段階的なμCTプロトコルを提供します。...

マイクロCTを用いた骨折治癒の評価

このプロトコルは、大容量のマイクロCTスキャン、カスタムメイドの圧縮ステージ、および高度な画像処理ツールを組み合わせることにより、近位ヒト大腿骨全体の骨微細構造の変形とその靭性の測定を可能にします。...

ヒト股関節の微細構造破壊機構のイメージング

このプロトコルでは、マウス腰椎の単軸圧縮試験をより達成可能にするために、2つのアプローチが説明されています。まず、三点曲げ機から圧縮試験機への改造について説明する。第2に、骨セメントを用いた荷重面を作製するための包埋方法をマウス腰椎に適合させた。...

マウス腰椎一軸圧縮試験(荷重面の埋め込み)

げっ歯類の骨の機械的試験は、骨の骨折しやすさに関する情報を抽出するための貴重な方法です。適切な実践的理解を欠いていると、結果が過剰に解釈されたり、妥当性に欠けたりする可能性があります。このプロトコルは、機械的試験が正確に実施され、有効で機能的なデータを提供するためのガイドとして機能します。...

げっ歯類の骨の全骨曲げ試験を含む研究の設計、実施、および解釈に関する実践的な考慮事項

ここでは、双方向軸方向伝送(BDAT)超音波デバイスの測定プロトコルを詳細に紹介し、14人の健康な参加者と3人のオペレーターを考慮して、再現性研究でテストします。クラス内相関係数(ICC)で測定した信頼性は、関心のある4つのパラメータについて「良好」から「優れ」でした。...

超音波ガイド波を用いた皮質骨評価:健常者集団における再現性研究

学ぶ 顕微鏡スクラッチ試験法によるウシ皮質骨の破壊靭性評価手法。小試料に適した半破壊的・再現性の高い方法で、骨脆弱性や骨リモデリングのメカニズム解明に貢献します。

スクラッチテストによるウシ皮質骨の脆弱性評価

さらに動画を探す

スクラッチ テストによるウシ皮質骨の脆弱性評価

さらに動画を探す

スクラッチテストによるウシ皮質骨の脆弱性評価