Name: PET や MRI 誘導照射ラットの神経膠芽腫モデルのマイクロ照射器を使用して (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-12-28T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 48 s
Description: 学ぶPET・MRI誘導の画像ガイド適形照射法により、ラットの神経膠芽腫モデルで腫瘍標的を精密に照射する手法。この技術はがん生物学の理解と前臨床放射線治療の発展に貢献する。

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著者は、この作業を支援するスティヒティング ルカ Hemelaere、国際ソロプチミストを感謝したいです。

研究は、動物実験 (ECD 09/23 と 12/28 ECD) 倫理委員会で承認されました。商業のすべての詳細は、表の材料で見つけることが。
1. F98 GB ラット細胞モデル
<ol>
	<li>ダルベッコ改変イーグル培地、10% 血清、ペニシリン 1%、1% ストレプトマイシン、1 %l-グルタミン、0.1% アムホテリシン b を使用して単分子膜における、ATCC から得られる F98 GB 細胞の培養、CO2インキュベーター (5% CO2と 37 ° C) の場所します。</li>
	<li>フィッシャー F344 ラット (体重 170 g) の脳における神経膠腫細胞を接種します。<ol>
		<li>滅菌器具を使用し、常に滅菌手袋を着用します。</li>
		<li>(1 mL、29 G) インスリン注射器 74 mg/kg ケタミンと 11 mg/kg キシラジン intrapertioneally (IP) の混合物を注入することで、ラットを麻酔します。肢の逃避反射の応答の不在によって、anesthetization を確認してください。鼻と耳の注視点を用いた定位脳手術装置のラットを固定します。カルボマー目の場所は、麻酔下で目の乾燥を防ぐためゲルします。</li>
		<li>頭蓋骨の後ろに目の高さからラットを剃るし、ポビドン ヨードで皮膚を消毒します。</li>
		<li>2 cm の正中頭皮切開孔を介して頭蓋骨を公開し、右前頭部の半球の前に横 1 mm 穴 (ダイヤモンド ドリル) 2 mm 前後、2.5 mm になります。</li>
		<li>改良導かれたインスリンの針 (29 G) を挿入し、5 μ L 細胞懸濁液 (20,000 F98 GB 細胞) を 3 mm, マイクロシリンジ ポンプのコント ローラーを使用している深い注入 (設定: (I50) を注入、レート 1 nL/秒 (001 SDN))。</li>
		<li>注射器をゆっくりと引き出すし、骨ワックスで切開を閉じる。皮膚を縫合し、ポビドン ヨードで消毒します。</li>
		<li>赤いランプを使用して動物の手術後の体の温度を安定させます。それは胸骨の横臥を維持するために十分な意識を取り戻したまでラットの目覚めを監視します。動物は他の動物を完全に回復するまでの会社には返されません。(12 h 通常ダーク/ライト サイクル、20-24 ° C、相対湿度 40-70%) の環境が管理された条件の下ですべての動物を食糧および水の自由に追いつきます。自分の体重、食べ物、水の摂取量、活動と通常の動作を監視することによって動物を密接に従うことを確認してください。20% の体重減少が観察される場合、または通常の動作が大幅に (例えば、グルーミングの欠如) 劣化 (160 mg/kg) 動物の安楽死ペントバルビ タール ナトリウムの致死量を使用します。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. 腫瘍の成長の確認
注: は、腫瘍成長 8 日後接種 T2 強調 MRI、ダイナミック造影 MRI (バン) と造影 T1 強調 MRI を使用して評価します。腫瘍が 2.5 mm3× 2.5 × 2.5 のサイズに達したら、療法のラットを選択します。
<ol>
	<li>最初に、30 G の針を外側尾静脈、静脈内 60 cm の長い管に接続します。(0.3 L/分) を酸素と混合 2% イソフルランと鼻の円錐形をラットを麻酔します。ラットは肢の逃避反射に応答しない場合は、anesthetization を確認してください。温水毛布でラットをカバーし、MRI のベッドにそれらを置きます。乾燥を防ぐため、カルボマーのアイジェルを使用します。</li>
	<li>固定ラット脳表面コイルのホルダーのベッドを配置し、72 mm ラット全身送信機コイルのベッドを配置します。</li>
	<li>腫瘍の成長を評価するため T2 強調スピンエコー スキャンに続いてローカライザー スキャンを実行します。T2 MRI シーケンスの詳細: TA 9 分 45 秒、4 平均スライス厚さ 600 μ m 109 μ m 等方性面内分解能 TR ・ TE 3661/37.1 ms。</li>
	<li>T2 強調買収に腫瘍が確認された場合は注入 (MRI 造影剤; 0.4 mL/kg) に静脈内に配置されたチューブのガドリニウム含有造影剤 30 s バン集録の開始後。高速ローアングル ショット (フラッシュ) シーケンスを単一のスライス (1 mm スライス厚) でを使用して 12 分中にバンを取得します。(312 μ2) の面内空間分解能と時間分解能 1.34 を使用 s。</li>
	<li>イメージ シーケンスの分析ツールを使用して、時間をかけて信号強度をプロットするが疑われる腫瘍領域内利益 (率 ROI) の領域を選択します。その後、神経膠芽腫 (図 3) の存在を確認する結果の DCE 曲線の形状を分析します。</li>
	<li>最後に、造影 T1 強調スピン エコー シーケンスを取得します。T1 MRI シーケンスの詳細: TR ・ TE 1539/9.7 ms、117 μ m の等方性面内の解像度、スライス厚 600 μ m、3 平均、TA 4 分 15 s. 典型的な造影 T1 強調 MR 画像は図 2に示します。</li>
	<li>完全意識が回復するまで、T1 強調シーケンスをファイナライズしたあとの動物が連続的な監督の下でに目覚めできます。</li>
</ol>
3. ターゲット ボリューム選択マルチモダリティ イメージング
注: MRI ガイド下の 3 D を実行できなければ F98 GB ラットの等角の照射はペット ガイド部分のボリュームを高める、実行しなくても、モダリティの画像 3 とモデルします。まず、ラジオト レーサーを注入し、MRI を実行後、静的ペット獲得・ CT. 計画治療を行うトレーサー取り込み中
<ol>
	<li>動物の鼻の円錐形を用いた酸素 (0.3 L/分) と混合 2% イソフルランの麻酔します。ラットは肢の逃避反射に応答しない場合は、anesthetization を確認してください。麻酔中の乾燥を防ぐため、カルボマーのアイジェルを使用します。</li>
	<li>尾静脈にカテーテル (26 G) を挿入し、200 μ L の生理食塩水に溶解した 37 ペット MBq の放射性トレーサーの挿入を有効にします。それぞれ18F FET または18F ラ FAZA、30 分ペット取得前に、2 h のいずれかを挿入します。</li>
	<li>15 分ペット獲得前に、のカテーテルを用いた尾静脈内 MRI 造影剤 (0.4 mL/kg) を静脈内注入します。</li>
	<li>集学的治療ベッドを作った社内にラットを配置し、画像とマイクロ照射 (図 1) の間に固定位置を保持する、フックとループのファスナーを使用してセキュリティで保護されました。</li>
	<li>頭蓋骨の右側の下におよび、上 3 つの集学的マーカー (水で満たされた毛細血管) を修正します。MRI スキャナーの動物のホルダーに、集学的治療ベッド上に固定されて、ラットを置きラット脳表面コイルを修正 72 mm ラット全身送信機コイルにこのセットアップを配置します。造影 T1 強調スピンエコー法並びに続いてローカライザー スキャンを実行します。</li>
	<li>18F FET または18F ラ FAZA ペット集録を実行する動物を輸送します。リスト モードで 30 分静的 PET スキャンを取得します。スキャンをする必要があります18F ラ FAZA 投与後18F FET の注入後または 2 h どちらか 30 分を取得します。</li></ol>200 × 200 × 64 マトリクスに 60 イテレーション、ボクセル サイズは 0.5 × 0.5 × 1.157 mm を使用して 2 D の最大尤度の期待最大化 (MLEM) アルゴリズムによってすべての PET スキャンを再構築します。
	<li>マイクロ照射の 4 軸ロボット位置決めテーブルの上にセキュリティで保護されたプラスチック製のホルダーに、集学的治療ベッド上に固定されて、動物を配置します。1 mm、20 × 20 cm (1,024 × 1,024 ピクセル) 非晶質 Si フラット パネル検出器のアルミ フィルターを用いた高分解能治療計画 CT スキャンを実行します。再構成の等方性ボクセル サイズは 0.2 mm. の CT 画像は管電圧を修正し、管電流を 70 kV と 0.4 mA、それぞれ。360 予測 360 ° 以上の合計を取得します。</li>

4. RT 治療計画
<ol>
	<li>前臨床治療計画治療計画システム (PCTPS) を使用します。計画の CT を PCTPS にインポートし、手動でこの CT 画像を 3 つの異なる組織クラスに分割: 骨、軟部組織と空気。このマニュアルでのセグメンテーションが基づいて計画 ct 3 つの異なるグレー値のしきい値を定義します。脳に空気が存在しないと、頭蓋骨、骨の厚さはゼロではないように、これらの手動で選択したグレー値のしきい値を選択必要があります。これらのしきい値を定義すると、材料の密度は、骨、軟部組織と空気 (図 4) の PCTPS によって割り当てられます。</li>
	<li>MRI のガイダンスが必要な場合にのみ MRI スキャンを読み込み、共同計画 ct、PCTPS を使用して登録します。<ol>
		<li>剛体変換 (3 つの並進と 3 回転)、集学的マーカーと頭蓋骨を使用します。CT で頭蓋骨の高められた信号強度を MRI 上黒信号を重ねること、によって正確な融合をすることができます (図 5) を達成。</li>
		<li>T1 強調 MRI のコントラストを向上させる腫瘍の中心に照射対象を選択、図 6と図 7を参照してください。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>ペットの追加情報を含める必要があります、医学画像の定量化ソフトウェア (BIQS) を使用して CT/MRI/ペット共同登録を含めます。<ol>
		<li>PET ・ MRI 画像の融合 (図 8) を達成するために、BIQS で輪郭を描くツールを使用します。共同登録後 BIQS (図 9) 増加のペット トレーサー代謝の中心でターゲットを選択し、次の変換を使用して PCTPS に手動で座標を入力: X → X、Y → Z、Z → Y。</li>
		<li>処方量、円弧、円弧の位置、円弧、およびコリメータ サイズ (図 10) の回転範囲の数を選択します。</li>
		<li>MRI ガイド下の RT では、次の設定を使用して: 処方線量 20 Gy、3 円弧ソファ 120 ° の円弧回転-45 °、0 °、45 ° の角度とコリメータ サイズ 5 × 5 mm の位置します。</li>
		<li>ペット MRI ガイド下の RT では、次の設定を使用して: 20 Gy 3 非同一平面上の円弧と 1 x 1 mm コリメーターを使用してサブのボリュームを高めるため 3 円弧と 5 × 5 mm コリメータおよび余分な 5 Gy を使用しての処方量。ソファ (-45 °、0 °、45 °) の位置を変えながらすべてのアークの 120 ° の回転を選択します。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>動物と、PCTPS を使用してターゲットに所定の線量を提供するビームの配信パラメーター内の線量分布を計算します。実際の照射前にアーク回転照射中に衝突を防ぐために異なるソファ位置をテストします。</li>
	<li>実際の照射は 0.15 mm の銅フィルターを選択、220 x 線電圧を設定 kV 設定 x 線電流 13 mA、および位置ガントリ上右のコリメータを。マイクロ管、PCTPS から適切なビームの配信パラメーターを転送することによって、RT を実行します。</li>
	<li>これらの手順の中に連続イソフルラン麻酔下ラットに保管されて (2% イソフルラン、酸素と混合 0.3 L/分)。完全な意識が回復するまで、最後のアークの実行、次の動物が連続的な監督下に目覚めることができます。</li>
</ol>
5 線量容積ヒストグラム (生かさ)
注: 腫瘍ターゲット ・ ボリュームと周囲の正常な脳組織に配信される実際の線量を比較、生かさを計算します。
<ol>
	<li>平均、最大、および最小線量 (図 11) を計算する造影 MR の T1 強調画像で、ボリュームの金利 (VOI) 腫瘍と正常脳の周りを描画します。</li>
	<li>最大の代理として意味があり、腫瘍と正常脳組織の容積を最小量は、D の2、D50、および D90を計算します。D は x の受けた線量の略、ボリュームの %、添字で表され、結果の DVH から派生することができます。</li>
</ol>
6. TMZ と偽化学療法
<ol>
	<li>膠芽腫の患者さんの治療を模倣するには、29 mg/kg 照射24,の日から 5 日間、一日一回 25% ジメチルスルホキシド (DMSO) を生理食塩水に溶解した TMZ の IP 注射を用いた併用化学療法を管理します。25. 使用 1 mL、29 G インスリン注射器注入を管理します。</li>
	<li>コントロール グループの TMZ なしステップ 6.1 からの注入を管理します。</li>
</ol>

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著者がある利益相反を開示するには

ラット脳における神経膠芽腫腫瘍ターゲットの正確な照射を実現するには、マイクロ照射器のオンボード CT ガイドは十分でした。脳腫瘍は、コントラスト強調される場合でもほとんどが不足している軟部組織コントラストが原因で表示。そのため、MRI はより正確な照射を許可する含まれる必要があります。7 T システムでできたマイクロ照射による CT シーケンシャル氏獲得を使用して脳のコントラストを向上させる腫瘍組織への線量をターゲットし、計画 ct 線量計画を計算これは PCTPS17を使用してイメージの融合と線量計算後可能でした。しかし、MRI はこのプロトコルで訂正がない幾何学的な歪みになりやすい心に保管されるべきです。さらに、体の他の部分にこの照射プロトコルを変換する前にさらなる研究が必要です。低 kV エネルギー光子の使用による正確な組織細分化の重要性を検討してください。組織の 3 つのクラスに分割は、ラット脳に不十分になる可能性がありますより多くの組織クラス正確な線量計算を提供するためにラットの胸部または腹部領域で示される必要があります。運動を避けるためには、さまざまなイメージング システム間で...

悪性グリオーマは、現在の治療法にもかかわらず 1 年間の生存期間の中央値で大人で最も一般的なと最も積極的な悪性脳腫瘍です。標準治療では、結合外部ビーム放射線療法 (RT) が続く最大の外科的切除とテモゾロミド (TMZ) メンテナンス TMZ1,2,3に続いてを含まれています。導入以来 TMZ よりも 15 年前今、大幅に改善されていないこれらの腫瘍の治療に。したがって、新しい治療戦略の実施が急務で、小動物癌療法モデル (大抵マウス、ラット) で最初に調べる必要があります。腫瘍軸受け齧歯動物モデルは、新しい、複雑な放射のプロトコル、おそらく放射線応答を評価したりラジオ保護エージェントを調査する他 (新) 処理剤併用の有効性を調査する使用できます。臨床放射線研究の主な利点は、齧歯動物の短い寿命のための迅速なデータ収率で生じる大規模なコホートを用いた制御実験条件下で動作する機能です。臨床所見は、現在練習4でよりもより速くより効率的な方法で臨床試験に変換する必要があります。
最後の十年の小さな動物の放射線実験は固定放射線源5,6,7,例えば, 137を使用して達成されて通常ある Cs、 60Co、同位体、またはリニアアクセラレータ MV x 線6,8,9,,10111 つ放射を適用する人間の臨床使用のためのもの。ただし、これらのデバイスでは、小動物12に必要なサブミリ精度は到達しません。さらに、MV x 線特性を持っている小さな目標を照射には不向きなど動物順程度梁の助走区間における空気組織界面線量蓄積サイズ4,6 ,8,9,10,11。後者それは周囲の正常な脳組織4,8,9,10,11を温存しながら腫瘍に均一な線量を提供する非常に困難です。したがって、どの程度現在の動物研究はまだ、モダンな RT 練習12に関連することは明らかです。この点で、最近開発された三次元 (3 D) 正角小動物マイクロ-効果反射が高度な 3 D 画像誘導 RT 技術、強度変調放射線治療 (IMRT) などの技術のギャップを埋めることを約束または人間で現在小動物照射4,13等角の円弧。これらのプラットフォームを作る鋭い penumbras を取得し、線量の蓄積を回避する kilovoltage (kV) x 線源の使用。これらのプラットフォームは、コンピューター制御における位置決め、kV 動物イメージング、放射線治療、様々 な角度放射線ビームを形成するコリメート システムから放射線配信を許可するように回転ガントリー アセンブリ用 x 線源4. 2011 年ゲント大学 (図 1) の臨床画像研究室でマイクロ照射器を設置。このシステムは現代人間の放射線治療の練習に似ています、さまざまな放射線療法、複雑な放射スキームのための画像誘導のサブ目標ブースト研究との相乗効果などの臨床実験。
治療計画これらのマイクロ効果反射には、CT、人間計画システム14,15に相当するに基づいています。Ct、治療中に使用される同じ kV の x 線管との組み合わせで搭載の x 線検出器が使用されます。正確な動物の位置決めは、セグメンテーションの個々 の放射線量計算に必要な情報を提供するいますと、ct が使用されます。ただし、CT で軟部組織コントラストの低いため悪性グリオーマなどの小動物の脳のイメージング、腫瘍は簡単に線引きできません。マルチモダリティ イメージング定款、正確なターゲット ボリュームの描写が必要です。MRI は CT と比較して、大幅に優れた軟部組織コントラストを提供します。これは、ため、ターゲット ボリューム上に示すように病変部に照射し、周囲の組織を防止する支援の多くに良い描写になります病変境界を視覚化する簡単図 24、 16。追加の利点は、非電離放射線、電離放射線を使用している CT とは異なり、MRI を使用です。MRI の主要な不利な点は比較的長い獲得の時間そして高い運用コストです。氏 LINACS の最近の開発でも、この分野で進展しているが必要な電子密度情報は提供されません、MRI スキャンは、線量計算には使用できませんに注意することが重要です。など、複合 CT/MRI データセットは、(mri ボリューム) をターゲットおよび線量計算 (CT ベースの電子密度) のために必要な情報の両方を含む、悪性神経膠腫の照射を計画に適した方法です。
小動物照射と臨床ルーチン間のギャップを減らすには、MRI 明確にする必要があります-照射、マイクロの仕事の流れに統合する MRI と CT はこれまで簡単で正しい登録を必要とします。本稿は MRI ガイド下 3 D 等角照射ラットにおける神経膠芽腫は、説明、F98 のため私たちのプロトコルでされている最近17出版。
マイクロ照射のワークフローでは CT や MRI を取り入れた小動物照射研究で明確な一歩ですが、これらの解剖学的イメージング技術はターゲット ・ ボリュームの完全な定義を常に許可しています。CT や MRI で脳の病理学的変化は、高められた水コンテンツ (浮腫) と血液脳関門や造影剤の漏出によって特徴付けられます。ただし、コントラスト強調と T2 強調 MRI 上の超強烈な領域は常に腫瘍の浸潤範囲を正確に測定。腫瘍細胞は、コントラストを向上させる12の余白をはるかに超えて検出されています。また、これらの技術のどれもは、治療抵抗性、再発の可能性があります腫瘍の中で最も積極的な部分を識別できます。したがって、分子イメージング技術のペットが RT の付加価値を持っているようなからの追加情報対象ボリューム定義と生物学的経路体内12,18を可視化するこれらの技術を有効にするため 19。
2000 年に陵らは、解剖学的および機能的なイメージングを彼らは何と呼ばれる多次元の等角の放射線療法20につながる放射線治療ワークフローに統合することにより生物学的ターゲット ・ ボリューム (BTV) の概念を導入しました。これは、たとえば PET 画像を使用してターゲット地域に不均一線量を提供することをターゲットに線量を向上する可能性を作成します。最も広く腫瘍ステージング用ペット トレーサーを使用し、治療を監視するための応答がフッ素 18 (18F) 標識フルオロデオキシグル コース (FDG) グルコース代謝21を可視化します。頭頸部癌、前研究は18F-FDG の使用が実際腫瘍体積のより良い推定値につながったことが CT と MRI の22と比較して、病理標本によって定義されているに示しています。原発性脳腫瘍で腫瘍の FDG が正常脳、最近18F fluoroetthyltyrosine 11C-メチオニンなどのアミノ酸から非常に強力なバック グラウンド信号 (FET) のために便利、GTV について検討しました。アミノ酸 PET や MRI を用いた GTVs23の頻繁にマーク付きの違いを描写。ただし、この発見の意味の調査の前向き試験はまだ行われていません。本研究では、アミノ酸トレーサー 18F FET と低酸素トレーサー 18F-fluoroazomycin-シタラビン (18F ラ FAZA) を選択しました。18F FET と18F ラ FAZA 選ばれた増加のアミノ酸取り込みの GB 腫瘍増殖率と相関が強いため低酸素症ペット トレーサーの通風管 (化学療法) 放射線治療18への抵抗と相関しているに対し,23. ラット F98 GB 腫瘍のペット定義の部品に追加の線量を与えることによって最適化されたサブのボリュームを高めるマイクロ照射器を使用しています。

<table><tbody><tr><td>GB RAT モデル</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>F98 膠芽腫細胞株</td><td>ATCC</td><td>CRL-2397</td><td></td></tr><tr><td>Fischer F344/Ico crl Rats</td><td>Charles River</td><td>N/A</td><td>http://www.criver.com/products-services/basic-research/find-a-model/fischer-344-rat</td></tr><tr><td>マイクロポンプシステム</td><td>World Precision Instruments</td><td>UMP3</td><td>マイクロ4:https://www.wpiinc.com/products/top-products/make-selection-ump3-ultramicropump/#tabs-1</td></tr><tr><td>定位フレーム</td><td>Kopf</td><td>902</td><td>モデル902デュアル小動物定位固定装置フレーム</td></tr><tr><td>直径ドリル</td><td>Velleman</td><td>VTHD02</td><td>https://www.velleman.eu/products/view/?id=370450</td></tr><tr><td>骨ワックス</td><td>Aesculap</td><td>1029754</td><td>https://www.aesculapusa.com/products/wound-closure/hemostatic-bone-wax</td></tr><tr><td>インスリン注射器 Microfine</td><td>Beckton-Dickinson</td><td>320924</td><td>1 mL、29G</td></tr><tr><td>InfraPhil IR ランプ</td><td>Philips</td><td>HP3616/01</td><td></td></tr><tr><td>Ethilon</td><td>Ethicon</td><td>662G/662H</td><td>FS-2、4-0、3/8、19 mm</td></tr><tr><td>名前</td><td>Company</td><td>カタログ番号</td><td>コメント</td></tr><tr><td>Cell culture</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Invitrogen</td><td>14040-091</td><td></td></tr><tr><td>ペニシリン-ストレプトマイシン</td><td>Invitrogen</td><td>15140-148</td><td></td></tr><tr><td>L-グルタミン</td><td>Invitrogen</td><td>25030-032</td><td></td></tr><tr><td>Fungizone</td><td>Invitrogen</td><td>15290-018</td><td></td></tr><tr><td>トリプシン-EDTA</td><td>Invitrogen</td><td>25300-062</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Invitrogen</td><td>14040-224</td><td></td></tr><tr><td>Falcons</td><td>Thermo Scientific</td><td>178883</td><td>175 cm2 ヌンクロン表面、フィルターキャップ付き細胞培養用ディスポーザブル</td></tr><tr><td>細胞凍結培地</td><td>Sigma-aldrich</td><td>C6164</td><td>細胞凍結培地-DMSO、滅菌ろ過済み、適切細胞培養用、エンドトキシン試験済み</td></tr> <tr><td>名前</td><td>会社</td><td>カタログ番号<</td><td>strong>コメント</td></tr><tr><td>動物照射</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Micro-irradiator</td><td>X-strahl X-strahl</td><td>SARRP</td><td></td></tr><tr><td>ソフトウェア</td><td></td><td>MuriPlan</td><td>前臨床治療計画システム (PCTPS)、バージョン 2.0.5。</td></tr><tr><td>名前</td><td>会社</td><td>カタログ番号</td><td>コメント</td></tr><tr><td>小動物PET</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>microPETシステムの可能性 1</td><td>Molecubes</td><td>B-Cube</td><td></td></tr> <tr><td>http://www.molecubes.com/b-cube/ microPETシステムの可能性 2</td><td>TriFoilイメージング、ノースリッジCA</td><td>FLEX Triumph II</td><td>http://www.trifoilimaging.com</td></tr><tr><td>PETトレーサー</td><td>自社製</td><td></td><td>18F-FDG、18F-FET、18F-FAZA、18F-Choline</td></tr><tr><td>名前</td><td>企業名</td><td>カタログ番号</td><td>コメント</td></tr><tr><td>小動物MRI</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>マイクロMRIシステム</td><td>Bruker Biospin</td><td>Pharmascan 70/16</td><td></td></tr><tr><td>https://www.bruker.com/products/mr/preclinical-mri/pharmascan/overview.html Dotarem 造影剤</td><td>Guerbet</td><td></td><td>MRI造影剤, Dotarem 0,5 mmol/ml</td></tr><tr><td>ラット全身送信機コイル</td><td>Rapid Biomedical</td><td>V-HLS-070</td><td></td></tr><tr><td>ラット脳表面コイル</td><td>Rapid Biomedical</td><td>P-H02LE-070</td><td></td></tr><tr><td>水性加熱ユニット</td><td>Bruker Biospin</td><td>MT0125</td><td></td></tr><tr><td>30 G IV 注射用針</td><td>Beckton-Dickinson</td><td>305128</td><td>30 G</td></tr><tr><td>PE 10 チューブ (60 cm/注射)</td><td>Instech laboratories, Inc</td><td>BTPE-10</td><td>BTPE-10、ポリエチレンチューブ 0.011 x .024 インチ (0.28 x 60 mm)、非滅菌、30 m (98 フィート) スプール、Instech laboratories, Inc プリマス会議 PA USA- (800) 443-4227- http://www.instechlabs.com</td></tr><tr><td>非ヘパリン化マイクロヘマトクリット毛細血管</td><td>GMBH</td><td>7493 21</td>これらの<td>毛細血管は、MRIおよびCTで見えるマーカーを作成するために水で満たされています</td></tr><<tr><td>strong>名前</td><td>Company</td><td>カタログ番号</td><td>コメント</strong</td></tr><tr><td>>消耗品</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>イソフルラン:イソフロ</td>ゾ<td>エティス</td><td>B506</td><td></td></tr>麻酔<tr><td>ケタミン:ケタミドール</td><td>エクファル</td><td></td><td>麻酔</td></tr><tr><td>キシラジン:セダキシ</td><td>ルコディファーNV</td><td></td><td>麻酔</td></tr><tr><td>カテーテル</td>テル<td>モ</td><td>バーサス-W</td><td>26G</td></tr><tr><td>テモゾロミド</td><td>シグマアルドリッチ</td><td>T2577-100MG</td><td>化学療法</td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Sigma-aldrich</td><td>276855-100ML</td><td></td></tr><tr><td>インスリンシリンジMicrofine</td><td>Beckton-Dickinson</td><td>320924</td><td>1 mL、29G</td></tr><tr><td>名前</td><td>Company</td><td>カタログ番号</td><td>コメント</strong</td></tr><tr><td><>strong>画像分析</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>PMODソフトウェア</td><td>PMODテクノロジーズLLC</td><td>PFUS(融合ツール)</td><td>生物医学画像定量化ソフトウェア(BIQS)、バージョン3.405、</td></tr><tr><td>https://www.pmod.com/web/?portfolio=22-image-processing-pfus名前</td><td>会社</td><td>カタログ番号</td><td>コメント</td></tr><tr><td>麻酔-equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>麻酔movabeユニット</td><td>ASA LTD</td><td>ASA 0039</td><td>ASA LTD、5谷道路、キースリー、BD21 4LZ</td></tr><tr><td>酸素発生器</td><td>獣医技術Int。</td><td>7F-3</td><td>BDO-メディパス、アイマイデン</td></tr></tbody></table>

pet や mri 誘導照射ラットの神経膠芽腫モデルのマイクロ照射器を使用して

PET and MRI Guided Irradiation of a Glioblastoma Rat Model Using a Micro-irradiator

何十年も、小動物の放射線研究主用いてかなり原油実験組み立て能力なしの単純な単一ビーム技術を適用特定またはよく線引き腫瘍体積を対象とします。放射線の配信は、固定放射線源またはメガボルトコーンビーム (MV) x 線の生産の直線加速装置を使用して達成されました。これらのデバイスが小動物に必要なサブミリ精度を達成することができます。さらに、高用量は、健全な周囲組織障害応答評価に配信されます。、小動物実験と人間の間の翻訳を向上させるため、私たちの目標は、ラット モデルにおけるひと膠芽腫の治療を模倣するでした。臨床設定でより正確な照射を有効にするには、最近では、高精度画像誘導小動物放射線研究プラットフォームは開発されました。人間の計画システムと同様に、これらのマイクロ効果反射の計画治療はコンピューター断層撮影 (CT) に基づいています。CT 上低軟部組織コントラストを脳など、特定の組織内のターゲットをローカライズするのには非常に困難になります。したがって、優れた軟部組織コントラスト CT と比較して、磁気共鳴イメージング (MRI) を組み込むと、照射対象のより正確な描写が可能になります。最後は、ポジトロン断層法 (PET) など 10 年間も生体イメージングは放射線療法治療について関心を得た。ペットは、例えば、グルコース消費、アミノ酸の輸送、または低酸素症、腫瘍の存在の可視化を実現。 にします。高い線量と腫瘍のそれらの高い増殖または抵抗性部分をターゲット生存延長効果を与えることができます。この仮説は、生物学的腫瘍体積 (BTV)、従来の総ターゲット ・ ボリューム (GTV) ほか、臨床ターゲット ・ ボリューム (CTV) と計画されたターゲット ・ ボリューム (PTV) の導入につながった。
ゲント大学の臨床のイメージング研究室でマイクロ照射、小動物、ペット、7 T 小動物の MRI があります。目標は、MRI ガイド下照射、ペット ガイド副ボリュームを神経膠芽腫のラットモデルにおける強化を組み込むことだった。

前臨床モデルで膠芽腫の照射のため人間の治療の方法論を模倣するには、MRI 誘導放射線治療を含めることが必要でした。PCTPS および造影 T1 強調 MRI17地域をターゲットと複数の等角非同一平面上円弧を持つラット F98 膠芽腫を照射することができましたマイクロ照射インターフェイスを使用します。マルチモダリティ ベッドとの組み合わせで剛体変換された MRI 企画 CT. 間画像登録用照射のアイソ センターは腫瘍の造影 T1 強調 MRI (図 7) 地域のセンターに選ばれました。
線量分布とターゲット ・ ボリュームの正常な脳組織ボリュームの平均、最小と最大線量の累積生かさ 5 つの異なる動物 (図 12) を求めた。臨床照射プロトコルと最適な線量分布の類似性に基づいて、3 つの非同...

過去には、小動物照射だった能力よく線引き腫瘍体積をターゲットすることがなく実行通常。目標は、ラットにおけるひと膠芽腫の治療を模倣することでした。小動物照射プラットフォームを使用して、PET ベース部分のボリュームを高める臨床設定での MRI ガイド下 3 D 等角照射を行った。

PET や MRI 誘導照射ラットの神経膠芽腫モデルのマイクロ照射器を使用して

For decades, small animal radiation research was mostly performed using fairly crude experimental setups applying simple single-beam techniques without ...

この方法論の全体的な目標は、小動物に画像誘導コンフォーマル照射を行うことです。この方法は、標的放射線療法のために特定の腫瘍体積をどのように描写するかについて、放射線学分野の重要な質問に答えるのに役立ちます。この技術の主な利点は、人間の癌治療を模倣し、ラットの腫瘍への細胞照射を可能にすることです。PETを使用して放射線除去ビームをガイドすることで、小動物放射線療法の分野における新しく有望な開発として癌生物学を考慮に入れることができます。生物学的標的体積を含めることで、腫瘍の最も活性で放射線耐性のある領域を標的にすることができ、治療のより良い結果をもたらします。麻酔をかけた170グラムのメスフィッシャー5344ラットに神経膠腫細胞を接種し、メスのフィッシャー5344ラットに神経膠腫細胞を接種し、まず、つま先をつまむことに反応しないことによる鎮静を確認し、目の高さから頭蓋骨の奥までの毛を取り除き、動物の目に軟膏を塗布します。定位装置で動物を固定します。露出した皮膚をポビドンヨードで消毒し、頭皮の正中線を2センチ切開して頭蓋骨を露出させます。ダイヤモンドドリルを使用して、右前頭半球のブレグマの2ミリメートル後部と2.5ミリメートルの側面に1ミリメートルの穴を開けます。次に、29ゲージのインスリン注射器の針に5マイクロリットルの細胞懸濁液を装填し、マイクロシリンジポンプコントローラーを使用して、定位誘導の下で頭蓋骨の深さ3ミリメートルの細胞を注入し、針をゆっくりと引き抜きます。骨ワックスで切開部を閉じます。次に、より多くのポビドンヨウ素で皮膚を縫合および消毒し、赤いランプを使用して、手術後の動物の体温を安定させ、完全に回復するまで監視します。接種後8日で、30ゲージの針を60センチメートルの長さのチューブに接続します。側尾静脈内に静脈内に配置され、麻酔された動物をMRIベッドに入れます。固定ラット脳表面コイルを備えたホルダーにベッドを置き、72ミリメートルのラットホールドボディトランスミッターコイルにベッドを配置します。次に、ローカリゾンスキャンで腫瘍の成長を評価し、続いてT2強調スピンエコースキャンを行います。腫瘍が確認された場合は、12分間の動的収縮増強MRI取得を開始し、スキャン開始から30秒後にガドリニウム含有造影剤を静脈内に配置されたチューブに注入します。経時的な信号強度をプロットするには、画像配列解析ツールを使用して、疑わしい腫瘍領域内の関心領域を選択し、結果として生じる動的収縮増強曲線の形状を解析して、神経膠芽腫の存在を確認します。次に、コントラスト増強T1強調スピンエコー配列を取得します。ターゲットボリュームのマルチモダリティイメージングには、26ゲージのカテーテルを尾静脈に挿入し、目的のPET放射性トレーサーの37メガベクレルと200マイクロリットル

pet-mri-guided-irradiation-glioblastoma-rat-model-using-micro

Research

JoVE Journal

Cancer Research

がん研究

脳腫瘍の患者は定期的、および認知機能障害を衰弱に有益な、この治療法はしばしば結果ながら、頭蓋放射線治療を受ける。この重大な未解決問題は、現時点では臨床的遡求権を持たず、放射線誘発認知減分を回収するための幹細胞ベースの治療法を考案する努力を推進してきました。...

頭蓋放射線療法によって引き起こされた認知機能障害の回復のための細胞移植戦略を幹

この記事の目的は、放射線研究のための同所性神経膠芽腫モデルの使用を記述することです。この資料では、注入、セル処理かかわらず移動して、頭蓋モデルを用いてマウスの放射線治療になります。...

同所性マウス脳腫瘍モデルのコンビネーション放射線治療

その後の3Dと頭蓋内注入インビボでの</emマウス神経膠腫の>生物発光イメージング

私たちは、ヌードマウスとその後シリアルの脳に人間の多形性膠芽腫細胞の正確な、定位注入のための統合方法を説​​明...

定位頭蓋内注入と<emインビボ&gt;</em多形性膠芽腫のマウスモデル系における腫瘍異種移植片の&gt;生物発光イメージング

出典:Bolcaen, J., et.al.、マイクロ照射器を使用した神経膠芽腫ラットモデルのPETおよびMRIガイド照射。 J. Vis. Exp.

膠芽腫ラットモデルの生成

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マウスモデルにおける神経膠芽腫の2光子生体内顕微鏡

血液脳関門は、治療法がない病気である膠芽腫の治療を提供する上で大きなハードルです。ここでは、サイズによってこの生理学的障壁を回避し、腫瘍に蓄積できる in vivo 画像誘導酸化鉄治療用ナノプラットフォームを報告します。...

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PET や MRI 誘導照射ラットの神経膠芽腫モデルのマイクロ照射器を使用して

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