下大静脈狭窄: 深部静脈血栓症のマウスモデル

この外科的処置の全体的な目標は、下大静脈の狭窄を作成して、深部静脈血栓症の開始のための血流の歪みを模倣することです。この方法は、深部静脈血栓症の開始のメカニズムに関する静脈血栓症領域の主要な質問に答えるのに役立ちます。この手法の主な利点は、静脈内の血栓症開始の重要なメカニズムである血流障害をシミュレートすることです。

下大静脈を大動脈から分離し、これらの組織の間に穴を開けることは口頭で説明するのが難しいため、この方法を視覚的に示示することは非常に重要です。生後8〜12週の麻酔をかけた19〜25グラムのマウスの腹部を剃ることから始め、マウスを加熱パッドの仰臥位に置きます。滅菌綿棒を使用して、露出した皮膚を抗菌液で3回消毒します。

つま先のつま先つまみに対する反応の欠如によって適切な鎮静レベルを確認し、手術部位に穴が開いた滅菌ドレープでマウスを覆います。解剖顕微鏡下で、腹部の正中線に沿って胸骨の下1.5センチメートルから切開し、綿棒を使用して腸を動物の左側に外部化します。腸組織を摂氏37度の生理食塩水に浸した滅菌ガーゼで覆います。

組織開創器を配置して切開部を拡大し、下大静脈(IVC)とその側枝を左腎静脈の尾側に配置します。鉗子を使用して、側枝を囲む脂肪組織を引き上げ、次に2番目の鉗子を使用して枝の下にトンネルを掘ります。そして、すべての側枝をIVCにできるだけ近づけて、7-0の不活性プロレン縫合糸で結紮します。

鉗子で周囲の組織を保持し、IVCを上下に引っ張り、IVCと大動脈の間の小さな領域、正確にはIVCと左腎静脈の間に張力を発生させます。大動脈とIVCの間に2組目の鉗子を挿入し、鉗子を3〜5回以上開閉して穴を開けます。IVCが左腎静脈と収束する点に正確に穴を開けることが非常に重要です。

左手を使って、2cmの7-0不活性プロレン縫合糸を腹腔の左側、IVCの近くに配置し、IVCを引き上げて再び左に引き上げます。大動脈とIVCの間の穴に2番目の鉗子を挿入して、先端がIVCの反対側に見えるようにし、縫合糸を穴から引き戻します。緩い暫定的な結び目を作り、フックに曲げられた30ゲージの針スペーサーを結び目に入れます。

結び目を締めた後、スペーサーを取り外し、綿棒を使用して腸を腹腔に戻します。連続ループを使用して、6-0 VICRYL縫合糸で腹膜を閉じ、金属ステープルで皮膚を閉じます。マウスに0.5ミリリットルの37°Cグルコサリンを皮下注射します。

次に、マウスを摂氏25度のチャンバー内の個々のケージに入れ、餌とゲル水を入れ、完全に回復するまで監視します。IVCでの狭窄の誘発は、血流の歪みと停滞を開始し、その結果、ヒトで観察される深部静脈血栓と構造的に類似した血栓が発生し、肉眼的に容易に視覚化できます。また、このIVC狭窄モデルでは、血漿中にフィブリン分解の産物であるD-ダイマーの上昇が観察され、ヒトで見られるのと同様の活性血栓形成過程が存在することが示されています。

このモデルでは、ほとんどの実験動物が血栓を産生していましたが、大きな欠点は、動物間で観察される血栓の大きさにばらつきがあることです。このテクニックを習得すると、適切に実行すれば15分で完了できます。この技術は、その開発後、静脈血栓症の分野の研究者がマウスモデルでDVTのメカニズムを探求する道を開きました。