2018年8月17日
このプロトコルは、人間の味覚応答を測定し、簡単な解剖学的評価、短い味テスト、およびサブジェクトの報告された感覚と味覚受容体遺伝子を使用して、検証メソッドが含まれています。
この方法は、各人の味覚に関する医療および感覚分野の重要な質問に答えるのに役立ちます。この手法の主な利点は、その簡潔さと生物医学研究への適合性です。この技術の意味は、味覚受容体が自然免疫系の一部であるため、慢性副鼻腔炎の診断と治療にまで及びます。
私はラボメンバーのデビッドで手順を実演し、ローレンは味覚ソリューションを作成します。まず、被験者に口を開けるように指示します。ライトを使用して口腔を照らし、その領域の7つのサブサイトを調べます。
ここでは、背側の舌が見やすくなっています。舌圧子を使用して舌を押すと、後咽頭が見えるようになります。次に、舌を側方化することで、左臼後三角と左頬粘膜を露出させることができます。
ここでは、前歯肉と唇粘膜が視覚化されます。被験者の舌が持ち上げられると、腹側の舌の表面が見えるようになります。そして、これにより、被験者の口の床の検査が可能になります。
次に、舌を再び側方化して、右の臼後三角と右の頬粘膜を検査します。そして最後に、硬口と軟口の味覚が視覚化されます。病変、擦り傷、腫瘤または炎症の兆候に注意してください。
光源を使用して舌の背側表面を視覚化し、真菌状の乳頭または舌の滑らかな表面の有無を特定します。最後に、味覚検査に進む前に、口腔内検査の結果を書き留めてください。まず、濃度の精度を確保するために、それぞれにメスフラスコを使用して味覚溶液を調製します。
超純水でサンプルを溶解します。光に敏感な溶液はホイルで包み、光への露出を減らします。次に、味覚溶液を摂氏4度で保存します。
溶液調製の一般的なエラーを特定するには、テイスティングカップを1つに古い溶液で満たし、もう1つに新しい溶液を入れます。各溶液を味わって、強度が同じであることを確認します。次に、バイアルキャップに、プレゼンテーションの順序とカラーコードに従って円形のステッカーでラベルを付けます。
バイアルのラベルを味覚アンケートのラベルと一致させるため。サンプルをそれぞれのキャリアにセットして梱包します。次に、味の強さを評価するためのカテゴリスケールと、各味覚の味の品質を特定するための強制選択を使用して、味覚アンケートを作成します。
最後に、味覚アンケートの適切なサンプルの隣に、適切な色と番号の円形ラベルを配置します。サンプルボックス、水のボトル、空のカップ、ペン、および12のサンプルのエントリを含む味覚アンケートを被験者に提供します。テスト手順を説明し、被験者に各タスタントの強度と品質の両方を評価するように求められることを伝えます。
彼らがすべての資質を経験するわけではないことを彼らに知らせてください。被験者に水で2回口をすすぎ、付属のカップに吐き出すように依頼して、テストを開始します。サンプル1をすべて口に注ぎ、5秒間そのままにしてから、溶液をカップに吐き出します。
うがいをしたり、溶液を飲み込んだりしないように伝えてください。次に、サンプルの強度に対応する13本の垂直線のいずれかを円で囲むように被験者に指示します。0 から 12 のスケールで。
全く激しさがない状態から、非常に激しい状態まで。そして、味を説明するために単一の品質を選択します。次に、次のサンプルに進む前に、被験者に水で口を2回すすいでもらいます。
水の試飲と評価サンプル1を対象として観察します。評価がまったく強度がなく、フレーバーがないことから逸脱した場合は、テストを続行する前にアンケートの指示を繰り返してください。すべてのサンプルを試飲した後、完成した質問票の完全性を確認します。
最後に、被験者が丸で囲んだ垂直線から0から12のスケールで強度評価を採点します。そして、後で分析するために、各テイスタントの2つの強度評価を平均化します。味覚試験の結果は、TAS2R38受容体遺伝子型によってグループ化された被験者間で、苦味化合物であるフェニルチオカルバミドまたはPTCの知覚的な味の違いの存在を確認します。
PTC強度の評価は、3つの遺伝子型で大きく異なります。この研究の背後にある動機は、慢性副鼻腔炎の発症に関与していると信じているこの受容体の機能を評価するために、クリニックで実行できる迅速なサービスポイント検査を評価または開発しようとすることでした。ここでの考え方は、この味覚テストを使用して、どの患者が副鼻腔炎を発症するリスクが高いか、さらに重要なことに、どの患者が副鼻腔手術を行うのに適した手術候補であるか、またはどの患者が副鼻腔手術でうまくいかないかを予測できるかということです。
そこで、この味覚検査を使用して、患者の副鼻腔疾患の予後を探ろうとしています。その後、すべての味覚テストを行った後、患者の遺伝子型決定によってそれを確認しました。そして、図3でわかるように、ほとんどの場合、患者の遺伝子型は表現型のパターンに従います。
つまり、苦味が多ければ多いほど、この受容体が優勢になる傾向がありました。ただし、いくつかの外れ値があります。機能性ホモ接合体、PTCを味わわなかったと言ったPAV/PAVがあり、その逆に、苦味のあるPTCを味わった非機能性AVI/AVIの個体がいることを示しています。
つまり、どのような味覚検査を行うにしても、私たちの期待に応えられない患者がいれば、T2R38のジェノタイピングで味覚検査を確認したいと考えるでしょう。一度マスターすれば、試験と味覚テストは30分以内に実施できます。このビデオを見た後、口頭検査の実施方法、病気の証拠に注意する方法、簡単な味覚テストの実施方法を理解できるはずです。
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本プロトコルでは、ヒトの味覚反応を測定し、簡潔な解剖学的評価、短時間の味覚テスト、および被験者の自覚症状と味覚受容体遺伝子型を用いた検証法を行います。この手法は、個人の味覚に関する医学および感覚分野における重要な疑問を明らかにすることが可能です。
本手法により、味覚受容体機能の迅速なポイントオブケア評価が可能となり、これは生物医学研究における組織感受性の代替指標として機能します。主観的な味覚知覚を客観的なジェノタイプデータと結びつけることで、感覚および免疫関連経路のターゲットバリデーションにおけるメカニズム的なリスク低減を支援します。本試験の簡便さと再現性は、味覚受容体の調節が治療仮説となる創薬ワークフローへの統合を容易にします。
この手法は、味覚受容体ターゲットを検証するための初期探索段階に適しており、標準化された味物質の投与によりスクリーニングへの準備を支援し、遺伝型と表現型の相関を通じてトランスレーショナルな意思決定に寄与します。