血小板輸血で微粒子のスクリーニング法のルーチン
January 31st, 2018
濃厚血小板含有微粒子をスクリーニングに基づく血小板在庫管理は品質改善活動の新しい病院の血液銀行です。目標は、活性化された血小板の使用を最適化するために非活性化血小板から区別するためにです。血液腫瘍患者に非活性化血小板を提供する難治性になる高リスクを減らす可能性があります。
この方法の全体的な目標は、ドナーセンターまたは病院の血液バンクで実施できる定期的な検査によって血小板輸血を特徴付け、出血または血液がん患者に対するこれらの血液製剤の使用を最適化することです。この方法は、血小板輸血に活性化血小板が含まれているか非活性化血小板が含まれているかなど、輸血医療における重要な質問に答えるのに役立ちます。この技術の主な利点は、血小板活性化の実証済みの指標として、微粒子含有量を迅速かつ正確にスクリーニングできることです。
この方法に不慣れな人は、バッグのチューブセグメントからサンプルを採取する方法を学ぶ必要があります。この方法を最初に思いついたのは、異なるドナーからの血小板の活性化状態に大きなばらつきがあり、これが患者に影響を与えているように見えたことでした。血小板濃縮物からサンプルを採取するには、3つの方法があります。
パウチからサンプリングするには、血小板バッグの内容物を、端から端まで5回傾けながら5秒間ゆっくりと水平に動かしてよく混合します。clを開くamp ポーチに、ポーチが排出され、それ自体が満たされます。パウチを完全に充填する必要はありませんが、動的光散乱またはDLSテストに必要なサンプルは100マイクロリットルだけです。
接続チューブをチューブシーラーでヒートシールすることにより、ポーチをバッグから外します。空のチューブからサンプリングする場合は、血小板バッグのチューブが空で保管されていること、およびチューブブロックがまだ所定の位置にあることを確認します。チューブを目視検査して、チューブ内に血小板濃縮物がないことを確認します。
チューブのチューブストリッパーをチューブブロックにできるだけ近づけて閉じ、ハンドルを圧縮してストリッパーを閉じたままローラー間にチューブを絞り、チューブブロックを解放します。ストリッパーを空のチューブにゆっくりと引き下げ、チューブがストリッパーの後ろにゆっくりと充填されるようにします。ストリッパーの下のセクションが完全に膨らむまで、またはストリッパーがチューブの端から1インチ以内になるまで続けます。
チューブストリッパーのハンドルをしっかりと圧縮し、ストリッパーをチューブの下にゆっくりと引き込むことが重要です。ストリッパーで停止点に達したら、チューブシーラーを使用して、ストリッパーの1インチ上でチューブをヒートシールします。次に、手動チューブストリッパーのハンドルを放します。
テストセグメントを作成するために、前のシールの1〜2インチ上に再度ヒートシールします。次に、血小板ユニットからテストセグメントを切り取ります。このセグメントは DLS テストに使用されます。
空でないチューブからサンプリングする場合は、バッグを垂直に吊るし、チューブブロックが所定の位置にある場合は解放します。チューブを目視検査して、大きな固体の塊があるかどうかを判断します。固い塊が存在する場合は、袋に剥がせないように、その上に密封します。
次に、チューブの密閉された端にできるだけ近づけて、チューブのチューブストリッパーを閉じます。ハンドルを圧縮してローラーの間にチューブを挟み、チューブの中身を袋に入れます。クランプ力を維持しながら、チューブストリッパーをチューブに沿ってバッグに向かって動かします。
血小板バッグを吊り下げフックから取り外し、ストリッパーを閉じたまま、バッグを端から端まで5回傾けて5秒間静かに混合します。ストリッパーを閉じたまま、バッグを垂直に吊るします。ストリッパーを空のチューブにゆっくりと引き下げ、チューブがストリッパーの後ろにゆっくりと充填されるようにします。
ストリッパーの下のセクションが完全に膨らむまで、またはストリッパーがチューブの端から1インチ以内になるまで続けます。ストリッパーで停止点に達したら、チューブシーラーを使用して、ストリッパーの1インチ上にチューブをヒートシールします。ストリッパーを解放した後、前のシールの1〜2インチ上に再度ヒートシールして、テストセグメントを作成します。
チューブの最後の部分を切り取って廃棄します。次に、血小板ユニットからテストセグメントを切り取ります。このセグメントは DLS テストに使用されます。
スプラッシュシールドと清潔で乾いたハサミを使用して、ポーチチューブまたはテストセグメントの一方の端をカットします。サンプリングツールを使用して、開いたポーチまたはチューブセグメントからサンプルを直接キャピラリーに引き込み、すぐにキャピラリーを充填します。充填されたキャピラリーの底部をキャピラリーチューブシーラントにそっと押し込み、トレイに優しくねじり、圧力をかけながら
シールします。次に、100マイクロリットルの固定容量ピペットとチップをキャピラリーから外し、キャピラリーがキャピラリーチューブシーラントにしっかりと埋め込まれたままになるようにします。キャピラリーチューブシーラントトレイからキャピラリーを取り外し、イソプロピルアルコールパッドで拭きます。キャピラリーの底をそっとフリックして、気泡が閉じ込められないようにします。
最後に、キャピラリーをDLSシステムに配置します。まず、コンソールを起動し、タッチスクリーンの指示に従ってログインし、微粒子またはMP試験オプションを選択して、血小板サンプルの微粒子含有量を測定するための新しいDLS試験を開始します。サンプル情報はバーコードスキャナーで入力するか、手動で入力します。
指示されたら、キャピラリーをDLSシステムに挿入し、テストを開始します。試験が完了したら、キャピラリーホルダーからサンプルを取り出し、消耗品は施設のガイドラインに従って適切に廃棄してください。血小板バッグに結果に対応する色のタグを付けます。
たとえば、オレンジ色は非アクティブ化、ピンクはアクティブ化済みです。動的光散乱は、ブラウン運動によって浮遊中を移動する粒子の速度を測定します。さまざまな速度に基づいて、小さな粒子は速く移動し、大きな粒子はゆっくりと移動します。
この技術は、サンプルのサイズ分布を決定します。DLSは、この輸血には15%未満の微粒子含有量に基づいて非活性化血小板が含まれていると判断します。確かに。顕微鏡では、微粒子がほとんどない円板状の血小板がほとんど見えました。
しかし、肉眼では最初のバッグとまったく同じに見える別の血小板輸血は、15%を超える微粒子含有量に基づいて活性化血小板を含んでいました。このサンプルでは、さまざまな血小板形態、小さな凝集体、および多くの微粒子が顕微鏡で観察されました。このビデオを見た後、血小板バッグからサンプルを非侵襲的に採取し、キャピラリーを充填し、サンプルの微粒子含有量をテストして、血小板インベントリを最大限に活用する方法を十分に理解できるはずです。
この手順を試みる際には、適切な代表的なサンプルを得るために、バッグをよく混ぜることが重要です。そして、この手順に続いて、フローサイトメトリーなどの他の方法を実行して、微粒子の細胞起源に関する質問に答えることができます。一度マスターすれば、このテクニックは約2分半で実行できます。
5分間の検査と合わせて、血小板輸血は8分以内に特徴付けることができます。この技術の開発後、この技術により、病院の血液銀行は血小板の在庫をスクリーニングし、非活性化血小板のみの血液学/腫瘍学の患者を治療し、使用される血小板輸血の減少を観察できるようになりました。私たちが言うように、最も安全な輸血は投与されないものです。
この方法は、輸血前の血小板の特性評価に関する洞察を提供しますが、ドナーから直接血小板を多血小板血漿で試験するためにも使用できます。この技術の意味は、血液がん患者の治療にまで及びます。なぜなら、彼らは非活性化血小板輸血の恩恵を受け、難治性になるリスクを減らすからです。
概要
この記事では、血小板濃縮物中のマイクロパーティクル含有量をスクリーニングすることで血小板在庫を管理する方法を提示しています。この技術は、活性化した血小板と非活性化した血小板を区別し、血液腫瘍学患者の輸血成績を潜在的に向上させることを目指しています。
主要な研究構成要素
科学分野
- 輸血医学
- 血液学
- 血小板生物学
背景
- 血小板輸血の活性化状態は大きく異なる可能性があります。
- 活性化した血小板は患者に合併症をもたらす可能性があります。
- マイクロパーティクル含有量を理解することで血小板の活性化を示すことができます。
- 現在の実践では、血小板の活性化状態を定期的に評価していません。
研究の目的
- 臨床設定における血小板の使用を最適化すること。
- 血小板の活性化を評価する信頼性の高い方法を提供すること。
- 血液腫瘍学患者の難治性のリスクを減少させること。
使用された方法
- マイクロパーティクル分析のための動的光散乱（DLS）。
- 血小板バッグとチューブからのサンプリング技術。
- 血小板濃縮物における塊の目視検査。
- DLSテストにおけるサンプル追跡のためのバーコードスキャン。
主要な結果
- マイクロパーティクル含有量が15%未満の非活性化した血小板が特定されました。
- 顕微鏡観察により、マイクロパーティクルが少ない円盤状の血小板の存在が確認されました。
- この方法により、血小板の活性化を迅速かつ正確にスクリーニングすることができます。
- 活性化状態に基づいた血小板バッグのタグ付けが確立されました。
結論
- この方法は血小板輸血の管理を強化します。
- 輸血医学における患者の成績を向上させるための枠組みを提供します。
- この技術を効果的に実施するためには、スタッフのさらなる訓練が必要です。
よくある質問
Executive Industry Relevance
Routine screening of platelet concentrates for microparticle content enables blood banks to differentiate activated from non-activated platelets, supporting optimized transfusion strategies for hematology-oncology patients. This approach addresses a critical quality gap in platelet inventory management by providing a rapid, quantitative indicator of platelet activation status. Implementing this method can reduce transfusion-related complications and improve resource allocation in transfusion medicine workflows.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Scientific Value: Enables interrogation of platelet activation states as a biomarker for transfusion efficacy and patient risk stratification.
- Operational Value: Provides a standardized, rapid assay for assessing platelet quality in preclinical transfusion models.
Screening & Assay Development
- Scientific Value: Delivers quantitative microparticle content measurements via DLS to distinguish platelet activation thresholds.
- Operational Value: Establishes a reproducible, high-throughput screening method for platelet product release testing.
Translational & Preclinical Research
- Scientific Value: Supports disease-relevant evaluation of platelet products in transfusion models aligned with hematology-oncology applications.
- Operational Value: Facilitates translational continuity from donor product screening to clinical transfusion outcomes.
Pipeline & Workflow Integration
This method integrates into the transfusion medicine workflow as a release testing step for platelet concentrates, enabling go/no-go decisions based on activation status prior to clinical use.
- Discovery Biology: Supports hypothesis testing regarding platelet activation pathways and microparticle generation in storage or stress conditions.
- Screening: Delivers assay readiness through standardized sampling and DLS-based quantification of microparticles as a release criterion.
- Analytics: Provides quantitative microparticle content readouts (<15% for non-activated, >15% for activated) to enable objective product classification.
- Translational Research: Connects product quality assessment to clinical outcomes in transfusion settings, particularly for refractory risk mitigation.
- Enterprise Reuse: Offers a reusable platform for platelet quality control across blood bank operations and donor center networks.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Predictive confidence in platelet product quality through direct measurement of activation-associated microparticles.
- Operational Value: Standardized sampling and DLS testing enable reproducible, rapid (<8 min) platelet characterization.
- Strategic Value: Informs go/no-go decisions for platelet issuance, reducing biological risk and improving transfusion safety.
- Portfolio Impact: Enables risk-adjusted prioritization of platelet units, supporting conservation of scarce blood products.
Implementation Considerations
- Training in aseptic sampling techniques from platelet bag tubing and pouches.
- Access to Dynamic Light Scattering instrumentation with microparticle detection capability.
- Standard operating procedures for sample preparation, capillary loading, and DLS test execution.
- Integration of results into inventory tagging systems (e.g., color-coded labeling).
- Validation of sampling reproducibility across different platelet storage conditions and donor variability.
