Name: 高解像度モニター腫瘍発症と遺伝子組み換えの膵癌モデルの成長に超音波を利用しました。 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-04-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 57 s
Description: 学ぶ高解像度超音波を用いた遺伝子組み換えマウス膵癌モデルにおける腫瘍検出と評価の手法。KPCマウスを使用し、腫瘍の発生と成長をモニタリングする詳細なプロトコルを提供します。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

この研究はドイツの Krebshilfeによって支えられた (Max、エーダー グループ: 110972)、(SMB) に DGVS 博士論文奨学金と大学医療センター ゲッティンゲンで (RGG) にElse Kröner フレゼニウス基礎奨学金。専門的な技術支援、ユッタ ・ ブランバーグとウルリケ ・ ウェグナーに感謝します。また、マウスを維持の大学医療センター ゲッティンゲンの動物施設ですべて動物技術者を感謝いたします。すべての実験は、ドイツの動物福祉規則に従って行われました。

このプロトコルは大学医療センター ゲッティンゲン、ドイツ (33.9-42502-04-15/2056) で動物のケアのガイドラインに従ってです。個々 の動物の特定の要件に応じて板を確認し、プロトコルの手順のいくつかは適宜変更する可能性があります。
1. 腹部触診 KPC マウスの
<ol><li>不要な超音波スキャンを避けるためには、腹腔内の病変を負担する可能性があるかもしれないし、腹部超音波検査を受ける必要がありますその後マウスを識別するためにマウスの腹部を触診します。<ol>
<li>KPC マウス モデルの年齢の 8 週間から腹部の触診を毎週実行します。高解像度超音波は、移植腫瘍モデル (例えばorthotopics) または他の遺伝子組み換えマウスのモデルにも適用できます。 注: 腫瘍動態研究目標 (予防研究、治療的介入の研究)、によって非常に小さな腫瘍 (1-2 mm) の検出可能ですモニター腫瘍発症する腫瘍を触知することができます前に。</li>
	</ol>
</li>
	<li>ケージ グリッド上にマウスを置くとそっとしっぽをマウスを持ち上げ、優しくインデックスと非固定手 (図 1) の親指を上下に行くことによって腹部を触診します。</li>
	<li>マウスは、柔らかい触診を容認する場合、は、ゆっくり圧力を高めることによって進みます。大きい抵抗は、上・下腹部で簡単に検出できます。腫瘍とハードの糞便を誤って解釈ことができる時に、質量です。</li>
</ol>2. 作業スペースの準備
<ol><li>少なくとも 3 つの異なる作業台スペースを提供: スキャン前エリア、ステージと回復のケージをスキャンします。必要な材料は、図 2で描かれています。</li>
	<li>メイン作業プレートをきれい (たとえば、70% エタノール) し (図 3) をスキャンする前に暖房プラットフォームに切り替えます。最初のマウスを転送する前に 38-40 ° C の温度が設定温度に達することを確認してください。</li>
	<li>超音波マシンに切り替え、集録したデータ (図 4) の新しいフォルダーを作成します。腹部画像診断の B モードの設定が適用されます。さらに、腹部のトランスデューサーがマシンのアクティブなポートに接続されていることを確認します。作業ステージの上部にシステムをマウント トランスデューサーを使用して、探触子の頭を修正します。</li>
	<li>手続き後の体温調節やスキャンしたマウスの迅速なリカバリを確保するため加熱プレートまたは温熱マット (または暖房ランプ) の回復ケージを準備します。クッションとして窒息 (図 5) のリスクと寝具の吸引を避けるためにこのケージの下部組織の薄い層を置きます。</li>
</ol>3. 吸入麻酔
<ol><li>誘導チャンバーにマウスを置くことによって進みます。ガスのキャリアの流れ (1 L/分の酸素、空気) のバルブを開き、イソフルラン麻酔濃度を徐々 に増加させる飽和誘導室を許可する 4% に設定します。適切なイソフルラン清掃 (パッシブまたはアクティブ フィルタ リング) されていることを確認します。約 2 〜 4 分後マウスは通常深い鎮静下になります。<ol>
<li>作業段階に鼻の円錐形によって 2% イソフルランの投与による鎮静を維持します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>慎重に作業段階に誘導室から動物を転送します。一定のガス流れ鼻の円錐形を確認します。麻酔ライン コンセントの鼻の円錐形のマウスの鼻を置きます。初期スキャンの定位置は仰臥位です。マウスは、膵頭部または尾部腫瘍 (図 6) の可視性を改善するために、左右どちらにも配置できます。</li>
	<li>腹部超音波検査は痛みを伴う自体、痛み無料条件と深い麻酔状態の指標として足ピンチ テストを実行します。マウスがまだアクティブ、または積極的に動き回る、転写動物は繰り返されると長時間誘導誘導室に戻る。</li>
	<li>体液の損失による角膜の損傷を防ぐために眼保護軟膏を使用します。</li>
	<li>麻酔中モニタリング システムを使用します。しかし、心電図、直腸温が常用される腹部超音波スキャンのため。重要なは、マウスは、麻酔下で thermoregulate する能力を失います。したがって、低体温症や呼吸困難にあえぎや無呼吸などの臨床徴候を観察します。症状はすぐに明白な停止イソフルランと回復ケージ内マウスの場所です。 場合、</li>
</ol>4. 超音波の設定
<ol><li>製造元の指示に従って超音波システムに切り替えます。アクティブに腹部のパッケージと一般的なイメージングをつける主な設定を確認します。通常 B モード画像は、標準のデータ集録に使用されます。</li>
	<li>次のパラメーターを最適化されたイメージの品質を達成するため: 周波数 40 MHz、2 D ゲイン 25-30 dB、イメージ深さ 10 ミリメートル、画像幅 10 mm、3-6 mm の間の中心の 3 つの焦点ゾーン。</li>
</ol>5. マウス作製
<ol><li>粘着テープを使用して上部および下肢を修正します。(図 7) 固定のため動物への損傷を避けるために可能な限り、注意してください。</li>
	<li>電子ペット バリカンを使用してすべての腹部の毛皮を削除します。毛皮テクスチャによる胸部まで下腹部から開始します。この分野での皮膚の損傷を避けるために大の剣状突起で世話をします。 注: マウスの毛皮超音波を反映し、可視性を減少させます。</li>
	<li>脱毛クリームを使用すると、最適化された皮膚の準備と毛皮の完全な除去を実行できます。綿棒 (図 8) を使用して坊主の腹部にクリームの薄い層を管理します。多量の水を完全に削除すべての残骸 (図 9図 10図 11) 続いて乾燥組織 (30 s または使用クリームによってはそれ以降) の後、クリームを削除します。クリームの残党は超音波後皮膚や粘膜の炎症の原因し、こうして健康に影響を与える可能性があります。</li>
	<li>適切なスキャンに条件が適用されます (図 12) 腹部に超音波ゲルたっぷり。通常、暖かい超音波ゲルはマウスの低体温症を最小限にするために使用されます。</li>
	<li>手動でトランスデューサ ヘッドに超音波ゲルの薄い層を適用します。ノッチの探触子側に触れることにより、テストを実行します。画面では、探触子が正しく配置されている場合、左上の信号を見ることができます。</li>
</ol>6. 腹部超音波検査
<ol><li>会社の圧力を使用して腹部に探触子を調整します。マウスの腹部の重い圧縮は、呼吸器や循環器系の障害につながる可能性があり、避けるべきであります。</li>
	<li>上下にスキャンします。作業台や x 軸と y 軸の車輪の枠を調整します。</li>
	<li>最初のステップとして、両方の腎臓を識別します。通常彼らは下腹部に同種の構造を hyperechogenic として表示されます。接続されている下大静脈 renalisは、さらに下大静脈(図 13) につながる簡単に見つけることができます。</li>
	<li>膵臓の画期的な容器として下大静脈 lienalis機能を使用します。Renalis 下大静脈と下大静脈 lienalisを区別しようとします。Lienalis 下大静脈の検出時に膵臓は正確にローカライズされました。通常の膵臓は、固体構造(図 14 と図 15) より腹腔内感染が広がる膜ではなくです。</li>
</ol>7. 膵腫瘍検出とボリュームの評価
<ol><li>すべての周囲の構造から膵病変を識別します。彼らは一般に低エコー円形または長円形の不均質組織固まり (図 16) として表示されます。腫瘍は通常しっかりとスキャン ヘッドでは、ほとんど圧縮することができます。注は、時から腫瘍と小腸ループとの間を明確に区別するが難しいことがあります。膵腫瘍で、観察する必要があります腸の蠕動運動に注意を払います。</li>
	<li>時に腫瘍検出画面を上下に合計サイズの印象を受けるし、超音波のキャリパーを使用して最大の直径を測定します。適切なイメージが見つかったら、画面がフリーズし、正確に腫瘍の大きさを判断するものさしツールを使用します。尻尾や体膵頭部に腫瘍がローカライズされているかどうかを区別するために重要なことが後で使用できる注意してください。</li>
	<li>ライブ モードに変更する前に、作業を記録する画像を保存することを確認します。それは調整のホイールがリリースされる、マウスの腹部に超音波プローブが押されたさらにもっと起こるかもしれない画像を凍結しながら注意してください。したがって、凍結するモードを変更する前に圧縮の調整を修正します。</li>
	<li>最初の面の測定を終えた後スキャン ヘッドを縦位置 (図 17) に 90 ° 回転するか、その側では、腫瘍の縦方向の拡張を検出するには、マウスを有効にします。いくつかの腫瘍は、十分な視認性のマウスの位置を変更する必要があります。膵尾部腫瘍は、その左側にある (図 11 と図 20) 膵頭部腫瘍のため(図 10 と図 19)、右側を下にマウスを配置できます。</li>
</ol>8. 腫瘍体積の定量化
注: すべての努力の主要な目的のひとつ腫瘍体積の正しい決定であります。利用可能ないくつかのテクニックがありますが、楕円の式を含む計算法大学医療センター ゲッティンゲンでことが勧めします。
<ol><li>すべての 3 つの以前に取得した直径を装備し、対応する腫瘍 (図 21) のおおよその量を計算します。</li>
	<li>また、後続のボリューム計算・ 3 D 再構成による腫瘍領域の自動スキャンを実行するのにスキャン ヘッドのモーター システムを使用します。</li>
</ol>9. 回復
<ol><li>スキャンした後すべての粘着テープを慎重に取り外し、すべての超音波ゲルを丁寧に乾いたティッシュで。</li>
	<li>慎重に回復ケージ (図 21) にマウスを転送します。呼吸機能障害を引き起こす可能性があります mouse´s 顔であらゆるカバー ティッシュを避けてください。回復のための側の立場は、優先されるべき。</li>
</ol>

<ol><li>Kersten, K., de Visser, K. E., van Miltenburg, M. H., Jonkers, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+engineered+mouse+models+in+oncology+research+and+cancer+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Genetically engineered mouse models in oncology research and cancer medicine.</a> EMBO Molecular Medicine. 9 (2), 137-153 (2017).</li>
<li>Olive, K. P., Politi, K. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aOlive%2C+KP+%22Translational+therapeutics+in+genetically+engineered+mouse+models+of+cancer%22">Translational therapeutics in genetically engineered mouse models of cancer</a>. (2), Cold Spring Harbor. 131-143 (2014).</li>
<li>Westphalen, C. B., Olive, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+engineered+mouse+models+of+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22The+Cancer+Journal%22%5BJournal%5D)">Genetically engineered mouse models of pancreatic cancer.</a> The Cancer Journal. 18 (6), 502-510 (2012).</li>
<li>Hingorani, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trp53R172H+and+KrasG12D+cooperate+to+promote+chromosomal+instability+and+widely+metastatic+pancreatic+ductal+adenocarcinoma+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Trp53R172H and KrasG12D cooperate to promote chromosomal instability and widely metastatic pancreatic ductal adenocarcinoma in mice.</a> Cancer Cell. 7 (5), 469-483 (2005).</li>
<li>Frese, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((nab-Paclitaxel+potentiates+gemcitabine+activity+by+reducing+cytidine+deaminase+levels+in+a+mouse+model+of+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discovery%22%5BJournal%5D)">nab-Paclitaxel potentiates gemcitabine activity by reducing cytidine deaminase levels in a mouse model of pancreatic cancer.</a> Cancer Discovery. 2 (3), 260-269 (2012).</li>
<li>Paredes, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+non-invasive+method+of+quantifying+pancreatic+volume+in+mice+using+micro-MRI%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A non-invasive method of quantifying pancreatic volume in mice using micro-MRI.</a> PLoS One. 9 (3), e92263(2014).</li>
<li>Boj, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+models+of+human+and+mouse+ductal+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Organoid models of human and mouse ductal pancreatic cancer.</a> Cell. 160 (1-2), 324-338 (2015).</li>
<li>Aung, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunotargeting+of+Integrin+alpha6beta4+for+Single-Photon+Emission+Computed+Tomography+and+Near-Infrared+Fluorescence+Imaging+in+a+Pancreatic+Cancer+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Immunotargeting of Integrin alpha6beta4 for Single-Photon Emission Computed Tomography and Near-Infrared Fluorescence Imaging in a Pancreatic Cancer Model.</a> Molecular Imaging. 15, (2016).</li>
<li>Akladios, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+microCT+structural+imaging+to+preclinical+evaluation+of+hepatocellular+carcinoma+chemotherapeutics+on+orthotopic+graft+in+ACI+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Bulletin+du+Cancer%22%5BJournal%5D)">Contribution of microCT structural imaging to preclinical evaluation of hepatocellular carcinoma chemotherapeutics on orthotopic graft in ACI rats.</a> Bulletin du Cancer. 98 (2), 120-132 (2011).</li>
<li>Neesse, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CTGF+antagonism+with+mAb+FG-3019+enhances+chemotherapy+response+without+increasing+drug+delivery+in+murine+ductal+pancreas+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Science+USA%22%5BJournal%5D)">CTGF antagonism with mAb FG-3019 enhances chemotherapy response without increasing drug delivery in murine ductal pancreas cancer.</a> Proceedings of the National Academy of Science USA. 110 (30), 12325-12330 (2013).</li>
<li>Sastra, S. A., Olive, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+murine+pancreatic+tumors+by+high-resolution+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Quantification of murine pancreatic tumors by high-resolution ultrasound.</a> Methods in Molecular Biology. 980, 249-266 (2013).</li>
</ol>

著者が明らかに何もありません。

このプロトコルでは、遺伝子組み換えマウス モデルにおける高分解能の腹部超音波画像を用いた膵腫瘍を定量化するための詳細な説明が提供されます。最近、論らどのようにマウス モデルでもない準備をし、以降のすべてのステップのための前提条件は、11を示されていた処理の可視化について膵腫瘍を定量化する詳細な説明を出版しました。この原稿の全体的な目標は、マウスの高分解能超音波の包括的な視覚的なガイドを提供することです。
我々 は、遺伝子改変マウスの内因性膵腫瘍に対する私たちの記述を集中が、この方法は同所性同種移植モデルの使用もできます。同所性同種のモデルも非常に小さな腫瘍まで取る率および腫瘍の発症を調査する 1-2 mm を abdominally 検出できます。腹部の触診は、主観的で再現することは困難にすることができます、超音波検査は、非常に小さな膵腫瘍の発症を検出する KPC モデル以前触診なしも適用できます。さらに、空気で満たされた小腸ループなど腹部の構造がスーパーイン ポーズあります。この点で、作業段階に動物の位置を変更する...

遺伝子組み換えマウス モデルは、がん研究能力に密接にヒトの発がん1,2,3の複雑な性質を要約するための増加する重要性を得ています。膵癌の開発を研究するモデルを頻繁に使用、ほとんどの 1 つ、進行と治療反応は腫瘍のサプレッサー p534の不活化と組み合わせて Kras 遺伝子の活性化変異によって特徴付けられます。このの LSL KrasG12D/+;LSL Trp53R172H/+;Pdx 1 Cre (KPC) マウス モデル事前侵襲的な膵上皮内腫瘍 (パニン) 病変から浸潤癌への段階的進行を模倣しています。表現型は、ほぼすべてのマウスは出生後最初の 6 ヶ月以内 PDAC を開発します。ただし、移植モデルと比較して、KPC モデルはいくつかのヶ月4から 8 週間非常に可変腫瘍発症を明らかにします。膵臓の腫瘍が特定のサイズ (直径 5-9 mm) に達すれば、腫瘍の成長が急速に加速してマウスが前臨床試験5に登録する必要があります。したがって、腫瘍発生、腫瘍サイズの正確な検出は、ロジスティクス前臨床研究と治療の監視のための必須の前提条件です。一般に、いくつかのアプローチが好き磁気共鳴画像 (MRI)67,8,9または高解像度超音波スキャン コンピューター断層撮影は腫瘍のスクリーニングを行うために使用できる、療法10。各テクニックは、その利点と欠点。MRI のコンピューター断層撮影 (CT) または -イメージングにより、正確な体積計算同様、一般的な鎮静下で長期にわたる試験時間の高解像度データ集録と非常に高価な機器が必要で、頻繁には許しません。長い期間にわたってスキャン。対照的に、小動物の超音波検査は、画面のマウス11で腹部の病理学を用いることができる確立されたメソッドです。このイメージング法の利点は、短い時間、高解像度のスキャンとドップラー超音波またはコントラストを使用する可能性を強化 (CEUS) 超音波を用いた並列で臓器の灌流を可視化します。ただし、解剖学的知識、3 D の想像力と徹底した実践的なトレーニングは、正しいイメージの解釈の必要です。
次の記事では、KPC モデルの高分解能超音波を利用するための詳しいプロトコルが提供されます。さらに、標準的な超音波画像を描かれている、調査官の向きを容易に臓器の構造を持つラベルします。

<table><tbody><tr><td>Visual Sonics Vevo2100 高解像度超音波システム(イメージングステージと麻酔ラインを含む</td>) <td>FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada</td><td>VS-11945</td><td></td></tr><tr><td>Vevo 2100 MicroScan Transducer MS-550-D (22-55MHz)</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada</td><td>VS-11874</td><td></td></tr><tr><td>Vevo Anesthesia System (麻酔誘導チャンバー、新鮮ガスおよび廃ガス入口付き)</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada</td><td>SA-12055</td><td></td></tr><tr><td>Vevo Imaging Station(麻酔供給用ノーズコーン付き作業ステージ)</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc., Canada</td><td>SA-11982</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp;電子ペットクリッパーパナソニック</td><td>マーケティングヨーロッパ、ドイツ</td><td>5025232484324</td><td>パナソニックER-PA10-s</td></tr><tr><td>Labotectホットプレート</td><td>労働技術G&ouml;ttingen、ドイツ</td><td>13854</td><td></td></tr><tr><td>アイクリーム(眼科用軟膏)</td><td>Sch&uuml;lke&マイヤー、ドイツ</td><td>9080249</td><td></td></tr><tr><td>獣医用イソフルラン</td><td>アッヴィ、ドイツ</td><td>4831867</td><td></td></tr><tr><td>脱毛クリーム</td><td>RB ヘルスケア 英国、英国</td><td>8218535</td><td></td></tr><tr><td>蒸留水 TH 中の 70% エタノール (v/v)</td><td>ガイヤー、ドイツ</td><td>22941000</td><td></td></tr><tr><td>超音波ジェル</td><td>Asmuth、ドイツ</td><td>13477</td><td></td></tr><tr><td>ティッシュワイプキン</td><td>バリークラークドイツ、ドイツ</td><td>7558</td><td></td></tr><tr><td>綿のヒント</td><td>Meditrade、ドイツ</td><td>75481116</td><td></td></tr><tr><td>超音波ジェル</td><td>ARCフランス、フランス</td><td>H1149</td><td></td></tr><tr><td>ウォーターボウル</td><td>W&P Trading Co., USA</td><td>B00K2P6PLQ</td><td></td></tr><tr><td>ガーゼスポンジ</td><td>Fuhrmann, Germany</td><td>960504</td><td></td></tr></tbody></table>

高解像度モニター腫瘍発症と遺伝子組み換えの膵癌モデルの成長に超音波を利用しました。

Utilizing High Resolution Ultrasound to Monitor Tumor Onset and Growth in Genetically Engineered Pancreatic Cancer Models

LSL KrasG12D/+;LSL Trp53R172H/+;Pdx 1 Cre (KPC) マウス モデルは膵臓癌の新規治療法を評価するための確立され、頻繁に使用されるトランスジェニック モデルを表します。腫瘍の発症は、8 週間と数ヶ月間 KPC モデルの変数です。したがって、非侵襲的イメージング ツールが腫瘍発症のスクリーンと治療に対する反応のモニターに必要です。この問題を解決するには、別のアプローチは最後の年にわたって浮上しています。高解像度超音波には、非侵襲、高速セッション時間および放射線被曝なし高画像解像度などの主要な利点があります。しかし、マウスの超音波ではない些細なと十分な解剖学的知識、臨床膵癌モデルにおける高分解能超音波を正常に実行するために必要な実践的なスキル。次の記事では、内因性の膵癌モデルの特定のフォーカスを持つマウスモデルでの腹部超音波検査の詳細な実践的なガイドが表示されます。さらに、よくある間違いとその回避方法の概要を提供します。

超音波は、人間の病気のマウスモデルでいくつかの問題に対処するため汎用性と非侵襲的な手法です。すべてその他イメージングのアプローチの主要な利点と比較して、高スループット、コスト効率、短いアクイジション時間と実時間イメージング。ただし、このツールは、高精度、高品質の画像を生成するための専門知識を必要があります。不要な工芸品の特に超音波一般に少なくともいくつかの経験は非常に便利です。膵癌に関連してこのツールは腫瘍発症、進行および治療への反応を決定することができます。さらに、異なる直径の測定では、時間をかけて腫瘍体積の正確な定量化できます。本研究は示し、遺伝子組み換えマウスの膵臓癌のスクリーニング ツールとして高分解能超音波イメージングを使用する方法の詳細について説明します。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56979/56979fig1.jpg"> <strong c...

この記事では、膵がんの遺伝子組み換えマウスの高分解能超音波の利用について説明します。主な目的は、内因性膵腫瘍の検出と評価の詳細な指示を提供するためにです。

The LSL-KrasG12D/+; LSL-Trp53R172H/+; Pdx-1-Cre (KPC) mouse model represents an established and frequently used transgenic model to evaluate novel ...

膵臓がんを研究するためのさまざまな遺伝子改変マウスモデルがあります。最も一般的に使用されるモデルは、Kras、cras癌遺伝子に活性化変異、およびp53腫瘍抑制遺伝子に不活性化変異を持つp53マウスモデルです。両方の変異は、Pdx-Creプロモーターによって条件付きで活性化されます。このKras、p53、Pdx-Creマウスモデル、略してKPCモデルは、生後2ヶ月から6ヶ月の間に内因性膵臓腫瘍を発症します。超音波検査の準備として、次の機器を準備し、すぐに使用できるようにする必要があります。高解像度超音波には、固定式超音波装置が使用されます。超音波検査は、イソフルラン蒸発法を用いて全身麻酔で行われます。マウスが深い鎮静下に置かれると、マウスは緑色の作業段階に移されます。超音波検査の後、マウスを予熱したケージに入れて回復を早めます。腫瘍の発生は、KPCマウスモデルでは非常に変動します。不必要な超音波検査を避けるために、通常、生後2か月から毎週腹部触診を行います。マウスの腹部を優しく上下に触診して、膵臓腫瘍を検出します。硬い糞便は腹部の腫瘍塊を模倣する可能性があることに注意してください。全身麻酔の開始後、別の誘導チャンバーで、マウスを緑色で予熱された作業ステージに慎重に配置します。超音波検査中、イソフルランはノーズコーンを介して連続的に供給されます。取り付けシステムを使用して、作業ステージの上部にトランデューサーヘッドを固定します。足をつまむテストを実行して、マウスが深い麻酔下にあることを確認します。その後、マウスは医療用ストリップを使用して作業プラットフォームに固定されます。超音波検査の前に腹部の毛皮を完全に除去し、アーチファクトを避けることが重要です。まず、ねずみの毛を丁寧に剃り落とします。ペットクリッパーを使用して表面的な皮膚の裂傷を避けるために細心の注意を払う必要があります。次に、脱毛クリームの薄層を剃った部分に塗ります。湿ったティッシュを使用してクリームを完全に取り除きます。豊富な超音波ゲルをマウスの腹部に塗布し、ゲルの薄層を超音波プローブに直接塗布します。トランスデューサーを柔らかい圧力で腹部に調整します。マウス腹部の激しい圧迫は、呼吸器系または循環器系の障害を引き起こす可能性があるため、避けるべきです。上下にスキャンし、作業プラットフォームのフレームとx軸とy軸のホイールを調整します。一部の腫瘍は、マウスの初期位置を変更することによってのみ見える場合があります。Bモード超音波画像を正しく解釈するには、基本的な解剖学的知識が必要です。KPCマウスモデルでは、膵臓の頭部、体、または尾部に膵臓腫瘍を検出することができます。腫瘍は通常、低エコー腫瘤として境界が定められます。それらの線維形成性の特徴のために、これらの腫瘍は通常、超音波プローブによって圧迫するの

utilizing-high-resolution-ultrasound-to-monitor-tumor-onset-growth

Research

JoVE Journal

Cancer Research

がん研究

このビデオでは、マウス由来の膵管腺癌細胞をマウスの膵臓に直接超音波ガイド下同所性移植するためのプロトコルについて説明しています。これにより、外科的処置と比較して、移植部位での炎症が少なくなります。...

超音波ガイド下移植:膵管腺癌細胞を成体マウスに移植する技術

このビデオは、局所的な細胞送達のためのマトリゲルと腫瘍進行の非侵襲的モニタリングのためのin...

生物発光性同所性膵臓癌モデルマウス:マウスの癌進行をモニターするための非侵襲的技術

膵臓癌生物学の理解の向上は非常に重要膵臓癌を治療するための良好な治療選択肢の開発を可能にするために必要とされる。このニーズに対応するために、我々は使用して癌の進行の非侵襲的なモニタリングを可能に膵臓癌の同所性モデルを示す...

膵臓癌の進行の生物発光同所性モデル

このプロトコルの目標は、マウスの同所性膵臓腫瘍異種移植片に対して動的コントラスト増強磁気共鳴画像法(DCE-MRI)を適用することです。DCE-MRIは、標的組織の微小血管系を非侵襲的に解析する方法であり、新規治療後の腫瘍の血管反応を評価するのに役立ちます。...

同所膵臓癌マウスモデルのダイナミックコントラスト強化磁気共鳴画像

ここでは、緑色蛍光タンパク質発現膵臓がん細胞（PANC-1 GFP)をBalb-c Ola Hsd-Fox1nuマウスの膵臓に同所的に移植し、腫瘍の進行と転移を評価する手順を紹介します。...

膵臓がんの蛍光同所性マウスモデル

マウス由来膵管腺癌細胞株の超音波誘導移植のためのプロトコルを原在腫瘍部位に直接記載する。このアプローチは、注射の2〜4週間以内に超音波スキャンによって検出可能な膵臓腫瘍をもたらし、外科的整形トピック移植と比較して腹壁の腫瘍細胞播種の割合を有意に減少させた。...

マウス膵管腺癌の超音波誘導矯正着移植

膵臓内イメージングウィンドウを用いたマウスモデルにおける膵臓の細胞レベル可視化におけるビ ボ における縦方向の安定化

ヒト膵臓癌細胞の超音波ガイド下注射とその後の超音波画像によるin vivo...

超音波ガイド下注射による膵臓癌細胞の同所性異種移植片の作製

本プロトコルは、マウス甲状腺全体を視覚化し、未分化甲状腺癌の成長を監視するための高周波超音波検査を記載しています。...

遺伝子改変マウスモデルにおける同所性ATC腫瘍の解析のための高解像度超音波検査

マウス膵臓の細胞内分解能イメージングのための安定化された留置光学窓の外科的移植のプロトコルを提示し、健康な膵臓と病気の膵臓の連続的および縦断的研究を可能にします。...

マウス膵臓の生体内イメージングのための安定化ウィンドウ

このプロトコルは、最大4匹の動物を対象に多チャンバーベッドを用いて、遺伝子組み換えマウスモデルにおける膵腺癌腫瘍を検出するために最大4隻の動物の並行磁気共鳴画像法(MRI)を行います。この多動物型MRIプロトコルは、腫瘍の検出と測定に迅速かつコスト効率が高く、前臨床試験のための動物選択や腫瘍成長の縦断的モニタリングを促進します。...

膵臓がんマウスモデルにおける腫瘍測定のための多動物磁気共鳴画像法

学ぶ高解像度超音波を用いた遺伝子組み換えマウス膵癌モデルにおける腫瘍検出と評価の手法。KPCマウスを使用し、腫瘍の発生と成長をモニタリングする詳細なプロトコルを提供します。

高解像度モニター腫瘍発症と遺伝子組み換えの膵癌モデルの成長に超音波を利用しました。

さらに動画を探す