Single-cell Photoconversion in Living Intact Zebrafish

Lauren Green; Cody J. Smith

doi:10.3791/57024

JoVE Journal
Developmental Biology

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JoVE Journal Developmental Biology

Single-cell Photoconversion in Living Intact Zebrafish

生活そのままゼブラフィッシュの単一セルの光電

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09:49 min

March 19, 2018

DOI: 10.3791/57024-v

Lauren Green^1,2, Cody J. Smith^1,2

¹Department of Biological Sciences,University of Notre Dame, ²Center for Stem Cells and Regenerative Medicine,University of Notre Dame

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

ここでは、蛍光蛋白質、Eos、生きている動物の表現する特定の領域に紫外線暴露により光電セルを達成する方法を表示するためのプロトコルを提案する.

この光変換技術の全体的な目標は、単一動物の単一細胞を他の蛍光細胞集団と区別することです。この方法は、この分野での主要な発生上の質問に答えるのに役立ち、時間の経過に伴う単一細胞の移動を視覚化することができます。この技術の主な利点は、侵襲性が最小限で、単一細胞またはより大きな集団の標識に使用できることです。

さらに、ユーザーは特定の関心領域を選択し、目的のターゲットを写真に変換できます。光変換性タンパク質を発現するゼブラフィッシュの雄と雌のトランスジェニックゼブラフィッシュを交配させ、テキストプロトコルに従って卵を採取した後、488ナノメートルの光源とGFPフィルターセットを備えた解剖顕微鏡を使用して、24 hpfの胚をスクリーニングします。針またはピンセットを使用して、手動で胚をデコリオネーションします。

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