Proliferation and Differentiation of Murine Myeloid Precursor 32D/G-CSF-R Cells

Polina Zjablovskaja; Petr Danek; Miroslava Kardosova; Meritxell Alberich-Jorda

doi:10.3791/57033

JoVE Journal
Developmental Biology

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JoVE Journal Developmental Biology

Proliferation and Differentiation of Murine Myeloid Precursor 32D/G-CSF-R Cells

マウス骨髄前駆体 32D/G-CSF-R の増殖・分化細胞

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10:21 min

February 21, 2018

DOI: 10.3791/57033-v

Polina Zjablovskaja*^1,2, Petr Danek*¹, Miroslava Kardosova¹, Meritxell Alberich-Jorda^1,2

¹Department of Hemato-Oncology,Institute of Molecular Genetics of the ASCR, ²Childhood Leukaemia Investigation Prague, Department of Paediatric Haematology and Oncology, 2nd Faculty of Medicine,Charles University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

ここでマウス骨髄前駆体 32D/G-CSF-R 細胞株を培養、ウイルス感染および増殖と分化アッセイを行う目的として詳細なプロトコルが表示されます。この細胞株は、骨髄性細胞と骨髄細胞の増殖および好中球分化の興味の遺伝子の役割を勉強に適しています。

この実験の全体的な目標は、目的の遺伝子を過剰発現またはサイレンシングすることにより、マウス骨髄系32D-G-CSF-R細胞を遺伝子改変し、これらの変化が細胞株の増殖と好中球分化に及ぼす影響を決定することです。この方法は、目的のタンパク質が骨髄性前駆細胞の成長と分化にどのように関与できるかなど、血液学の分野における重要な質問に答えるのに役立ちます。この細胞株の主な利点は、無制限の増殖能力を持ち、遺伝子操作の影響を受けやすく、コストが比較的低く、特定の実験的アプローチに必要な生物学的単純化をある程度可能にすることです。

今日、その手順を実演するのは、私の研究室の博士課程の学生であるPetr Danekです。熱不活化10%ウシ胎児血清と10ナノグラム/ミリリットルのマウスインターロイキン-3を補給したRPMI-1640培地を250ミリリットル調製します。次に、50ミリリットルの分化培地を準備します。

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