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DOI: 10.3791/57490-v
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三次元培養とゼブラフィッシュを用いた抗癌剤のクマリンの前臨床スクリーニングを紹介します。
この方法は、創薬の分野における重要な質問に答えるのに役立ち、抗がん効果を特定し、in vitroおよびin vivo 3D培養システムを使用して新規分子のメカニズムに関するより優れた洞察を得ることができます。この技術の主な利点は、より生理学的に関連性のあるin vivoモデルにおける化合物の薬理学的効果の多様性です。まず、15 mmのRPMI 1640細胞培養培地に15 mmリットルの RPMI 1640 細胞培養培地に 20, 000 個の A549 細胞を 105 平方センチメートルのフラスコでプレートします。
培養物を摂氏37度、CO2 5%でインキュベートします。実験当日は、血球計算盤を用いて細胞濃度を測定します。1.5ミリリットルの微量遠心チューブに50, 000個の細胞を400gで7分間遠心分離し、100マイクロリットルの滅菌1x PBSに細胞を再懸濁します。
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