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DOI: 10.3791/57584-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol outlines whole-cell electrochemical experiments to investigate proton transport's role in extracellular electron transport (EET) in Shewanella oneidensis MR-1. The study employs the deuterium kinetic isotope effect to assess the impact of proton transport on EET kinetics.
ここで全細胞外膜シトクロムシェワネラ oneidensis氏-1 複合体を介して細胞外の電子輸送の速度へのプロトン輸送の貢献を研究する電気化学実験のプロトコルを提案する.
このプロトコルの全体的な目標は、重水素速度論的同位体効果の検出により、細菌の細胞外電子輸送速度に対するプロトン輸送の寄与を観察することです。私たちの方法は、プロトン輸送が外膜c型シトクロムを介して細菌から電極への細胞外電子輸送またはEETの速度論に及ぼす影響を明らかにします。私たちのアッセイは、精製された酵素ではなく生きた細菌を使用したため、EETのネイティブプロトン管理を反映しています。
しかし、私たちの課題は、他の細胞プロセスからのノイズを取り除くことでした。KIEと呼ばれる重水素速度論的同位体効果は、関連する電子輸送プロセスに対するプロトン輸送の寄与を調べるための最良の手法の1つです。Shewanella MR-1細胞を増殖させるには、寒天プレート上で増殖させた細胞の1コロニーを15ミリリットルのLB培地に移します。
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