Name: マウスにおける急性心筋梗塞のリアルタイム圧解析 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-07-02T13:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 28 s
Description: 学ぶマウスの急性心筋梗塞におけるリアルタイム左室圧解析法。カテーテルによる高度な血液動態評価で虚血・再灌流中の心機能変化を詳細に解析し、心血管研究の新たな知見を得る。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

著者は次の資金源を認める: 他 Kröner フレゼニウス財団 (Tienush Rassaf);ハンス ・ ウント Gertie フィッシャー財団 (Tienush Rassaf)、医学部、デュースブルク-エッセン ドイツ大学 (Tienush Rassaf、ラース ・ ミシェル) から付与します。エルンスト ・ ウント ベルタ Grimmke ・財団 (クリストス Rammos)。

に従って、すべての関連する規制へのコンプライアンスにすべての実験が完成 (' 実験と他の科学的な目的の (ディレクティブ 2010年/63/EU) や動物のケアのため使用される脊椎動物の保護に関する欧州条約は、制度のガイドラインに従って。すべての実験は、6 ヶ月の年齢で男性の C57BL/6JRj マウスで行われています。
1. 準備
<ol><li>手術顕微鏡加熱パッドと体の温度を監視する直腸プローブを準備します。きれいにし、すべての手術器具を滅菌します。</li>
	<li>血管結紮、5 cm 6-0 ポリプロピレン糸と LCA の結紮用 2 mm シリコン チューブを 10 cm の 2 個セット 5-0 絹糸を準備します。</li>
	<li>前 37 ° C で加熱する太陽光発電カテーテル校正キュベットを準備し、H2O 生理食塩水のキャリブレーションのための 15% 塩化ナトリウム (NaCl) 満ちているハミルトン シリンジ 100 μ L を準備します。</li>
	<li>場所 PV カテーテル (3 cm、1.4 F) 37 ° C に予熱 0.9% NaCl H2O (生理食塩水) 測定する前に、少なくとも 30 分。カテーテルをデータ集録デバイスに接続し、デバイスをアナログ/デジタル変換器に接続します。両方のデバイスをコンピューターに接続します。</li>
	<li>ソフトウェアを設定します。8ソフトウェア ガイド付きワークフローの要求に従い、ソフトウェア ガイド付き圧力調整とコンダクタンスの調整を実行します。</li>
</ol>2. 麻酔と鎮痛
<ol><li>ケタミン 100 mg/kg 体重とキシラジン塩酸塩 10 mg/kg を腹腔内投与によるマウスを麻酔します。私の先頭に/R 外科 0.05 mg/kg 本体重量ブプレノルフィン鎮痛効果を維持するために腹腔内を管理します。</li>
	<li>10 分後 20 G の静脈内投与 (iv) カテーテルを用いた気管内挿管を行い 40% 酸素 (O2) 2% (v) イソフルランとマウスを換気します。適切な換気パラメーター (例えば220 μ L ストローク ボリューム、150/分 25 30 g C57BL/6JRj マウス) を設定します。</li>
	<li>直腸プローブを介して体内温度を継続的に監視します。加熱平板上捜査官に向かって指して頭でマウスを固定します。マウスの正常な体温は 36.5-38 ° C です。加熱温度の調整による体温 1 度以内を維持します。</li>
</ol>3. 左心室カテーテル
<ol><li>胸や betadine と 70% アルコールの 3 つの交互になるスクラブと首を消毒します。 皮膚消毒乾燥するを待ちます。胸の毛を削除するには、小さな動物シェービング システムを使用します。</li>
	<li>10 mm 縦正中切開手術用のハサミを使用して胸骨に向かって下唇の下に 5 mm を実行します。</li>
	<li>左と右、鉗子を用いた鈍準備を介して顎下腺部を解剖します。右のコミューンの頚動脈を公開する右傍部の筋肉や脂肪組織形態を区切ります。動員、曲がった鉗子で容器と一緒に入念な鈍準備を介して結合組織から 5-10 mm の長さの合計のために船を区切ります。 注: は、重度の低血圧、徐脈の原因にすることができますすべての時に迷走神経や内頸動脈体の機械操作を避けます。</li>
	<li>船の下で 2 つの準備された絹の糸を渡します。タイトな結び目と遠位血管を結紮し、まだカテーテルの通過を可能にする近位の露出部の緩い結び目を配置します。</li>
	<li>これはカテーテルの導入を促進する船に軽い緊張を適用するマウスの頭の横にある頭蓋 (タイト) 結び目のスレッドを修正します。元に戻せる状態の血流をブロックする緩い結び目の近位近位血管の止血血管クランプを配置します。</li>
	<li>くさび状切開 1 mm マイクロのハサミで容器を開くに頭蓋の結び目に近位を実行します。 注: 小さい血のしたたりはこのステップの適切な実行を示します。</li>
	<li>10 mm。 カテーテル データの記録の開始のために慎重にカテーテルを挿入します。 注: 切開部を鉗子でストレッチ、このプロセス容易になります。</li>
	<li>血管クランプを抽出します。カテーテルの動きを容易にするために切開部に生理食塩水 1 〜 2 滴を追加します。別に 10 mm 程度のカテーテルを導入することを続行します。結び目を慎重にちょうど固定センサー先端部と近位部の結び目を通過した後カテーテルの動きを損なうことがなくカテーテルの薄い部分と一緒に逆流の血を防ぐために十分な。 注: 血管クランプを抽出するとき、カテーテルの先端にセンサーのサイズは血液の逆流を防ぎます。</li>
	<li>優しく圧力解析 (図 3 a) 大動脈にカテーテルが置かれることを示す血圧プロファイルが表示されるまで、カテーテルの挿入を続行します。 注: カテーテル大動脈弁を達するは、耐光性とカテーテルのパルスに同期した動きで示されます。</li>
	<li>いつ大動脈弁を進めるに抵抗を発生して、プル カテーテル再び 5 mm と事前 LV カテーテル、拡張期血圧が 0 件に達するので PV 解析の変化に示されますまで 20 mmHg (図 3 b)。さらにセンサー チップ (図 3) の左の心室の配置を確認するための監視量の変化に注意してください。カテーテルの動きを防ぐために近位の結び目をよりしっかりと固定します。</li>
</ol>4. 虚血/再灌流外科
<ol><li>肋骨を視覚化することができますまで、全長の 15 ミリメートル。 進む 2 つの筋層の鈍的準備のため左腋窩に向かって尾側の胸骨から皮膚切開を実行します。</li>
	<li>3 番目と 4 番目の左肋骨間切開を介して胸郭を開きます。心膜へのアクセスを得るために手術のフックを使用します。心臓より心膜を切除します。LCA 結紮、有効な解析の太陽光発電データを記録する動物に触れることがなく待機 30 秒を続ける前に。</li>
	<li>左耳介の下で新興と降順の決戦に向けて心の左側で LCA をローカライズします。左耳介の下に 2 mm のループで動脈を取り囲むように 6-0 ポリプロピレン縫合糸を使用します。ループの下の小さなシリコン チューブを置き、上記のタイトな結び目を配置します。 注: 回っている灰色の遠位心筋は LCA オクルー ジョン6のポジティブ コントロールとして機能します。私/営業調査から独立して 5 分以内 R 手術を行う必要があります。</li>
	<li>1 mm の長さで縫合糸をカットします。手術のフックを解除し、上記の切開部の筋層を手動で閉じる。太陽光発電データを継続的に記録しながら 45 分を待ちます。</li>
	<li>45 分後に再度切開を開くし、再灌流を誘導するためにシリコン チューブを削除します。別の 20 分のデータを記録します。 注: 虚血前に見られる赤い色への変更は再灌流成功を示します。</li>
</ol>5. 校正
注: PV カテーテル システムのキャリブレーションは、測定後に実行する必要がある 2 つの 4 つの必須ステップで構成されています。校正は、有効な結果を確保するためのすべての実験の後で繰り返す必要があります。
<ol><li>圧力校正とコンダクタンス ステップ 1.5 で説明されているように実験の前にキャリブレーションを実行します。</li>
	<li>実験自体は終了後カテーテルは左心室に置かれた生理食塩水の調整を実行します。準備された領域で頚動脈の外側を右頸静脈をローカライズします。注入 10 μ 25% データを記録しながら注射器 H2Oでハミルトンの塩化ナトリウム。</li>
	<li>ボリューム曲線 (図 5) で上昇相を強調することによって取得ソフトウェアを使用して校正を計算します。3 回の合計のためのこのプロセスを繰り返します。注射器抽出後血液の損失を回避するには、急速に圧縮、穿刺する血管クランプを使用します。</li>
	<li>標準化されたボリュームの解析によるボリューム データ集録を調整するボリューム調整を実行します。心臓穿刺から若干ヘパリン 1 mL 注射器 (例えば、200 の IE ヘパリンあたり 5 μ L) で約 500 μ L マウス血を取得します。太陽光発電のカテーテルを引き戻す、カテーテルの損傷を避けるために 10-15 mm。</li>
	<li>37 ° C 予熱校正キュベット (図 5 a) に得られた血液を入力します。泡を避けるため、それが結果を妨げる可能性があります。各レコードとデータにカテーテル先端を追加します。ソフトウェア ガイド分析 (図 5 b) によって標準曲線を得します。3 回の合計のためのプロセスを繰り返します。</li>
	<li>十分なイソフルラン麻酔はすべての時間を維持したまま、急激または頚部転位によるマウスを安楽死させます。</li>
</ol>6. データの分析
<ol><li>校正の手順を完了すると、ソフトウェア ガイド データ解析を実行します。したがって、 PV ワークフローの分析セクション内で適切なセクション (少なくとも 10 サイクル) を強調表示し、ベースライン分析を実行します。必要に応じて換気または操作のための偏差とサイクルを除外する (図 3 D)。</li>
	<li>直前に、LCA 閉塞後大動脈弁 (動脈圧のみ) の通路の前に PV ベースライン解析を実行します。太陽光発電ベースライン解析を実施して、虚血と再灌流後 5 分の間隔で進んでください。実験の終わりに、左心室 (血圧) からカテーテルの撤回後圧力データの分析を実行します。</li>
	<li>サンプリング エラーを避けるために、少なくとも 10 の連続したサイクルを分析します。換気、5 の最大の換気の一時的な中断と値を得た場合の強い干渉が発生して s を考えることができます。</li>
	<li>ベースライン分析(図 3 D) 左心室機能を特徴付けるための計算は、次のパラメーターを使用します。<ol>
<li>ストローク量 (μ L)</li>
		<li>駆出分画: ストローク ボリューム/末期量 (%)</li>
		<li>心拍出量: ストローク ボリューム * 心拍数 (μ L/分)</li>
		<li>心係数: 心拍出量/体表面積 (µL/(min*cm²) のボディ</li>
		<li>打撃の仕事: 太陽光発電のカーブの内側領域 (mmHg * μ L)</li>
		<li>最高圧力 (Pmax);平均圧 (Pmean)</li>
		<li>左室収縮機能のパラメーターとして最大 dP/dt (mmHg/秒)</li>
		<li>左心室コンプライアンスのパラメーターとして分 dP/dt (mmHg/秒)</li>
		<li>等容弛緩の時定数: タウ (ms)</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Sanchis-Gomar, F., Perez-Quilis, C., Leischik, R., Lucia, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+coronary+heart+disease+and+acute+coronary+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of coronary heart disease and acute coronary syndrome.</a> Annals of Translational Medicine. 4 (13), 256(2016).</li>
<li>Anderson, J. L., Morrow, D. A. <a target="_blank" href="http://www.nejm.org/doi/full/10.1056/NEJMra1606915">Acute Myocardial Infarction.</a> New England Journal of Medicine. 376 (21), 2053-2064 (2017).</li>
<li>McNamara, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predicting+in-hospital+mortality+in+patients+with+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Predicting in-hospital mortality in patients with acute myocardial infarction.</a> Journal of the American College of Cardiology. 68 (6), 626-635 (2016).</li>
<li>Kurian, G. A., Rajagopal, R., Vedantham, S., Rajesh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Role+of+Oxidative+Stress+in+Myocardial+Ischemia+and+Reperfusion+Injury+and+Remodeling%3A+Revisited%5BTitle%5D)+AND+%22Oxidative+Medicine+and+Cellular+Longevity%22%5BJournal%5D)">The Role of Oxidative Stress in Myocardial Ischemia and Reperfusion Injury and Remodeling: Revisited.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. , (2016).</li>
<li>Turer, A. T., Hill, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+of+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+and+rationale+for+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis of myocardial ischemia-reperfusion injury and rationale for therapy.</a> American Journal of Cardiology. 106 (3), 360-368 (2010).</li>
<li>Totzeck, M., Hendgen-Cotta, U. B., French, B. A., Rassaf, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+practical+approach+to+remote+ischemic+preconditioning+and+ischemic+preconditioning+against+myocardial+ischemia%2Freperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biological+Methods%22%5BJournal%5D)">A practical approach to remote ischemic preconditioning and ischemic preconditioning against myocardial ischemia/reperfusion injury.</a> Journal of Biological Methods. 3 (4), (2016).</li>
<li>Respress, J. L., Wehrens, X. H. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3144600/">Transthoracic echocardiography in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (39), (2010).</li>
<li>Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P., Batkai, S., Kass, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+cardiac+function+using+pressure-volume+conductance+catheter+technique+in+mice+and+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats.</a> Nature Protocols. 3 (9), 1422-1434 (2008).</li>
<li>Zhang, B., Davis, J. P., Ziolo, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+catheterization+in+mice+to+measure+the+pressure+volume+relationship%3A+Investigating+the+Bowditch+effect%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Cardiac catheterization in mice to measure the pressure volume relationship: Investigating the Bowditch effect.</a> Journal of Visualized Experiments. (100), e52618(2015).</li>
<li>Rossello, X., Hall, A. R., Bell, R. M., Yellon, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+Langendorff+perfused+isolated+mouse+heart+model+of+global+ischemia-reperfusion+injury%3A+Impact+of+ischemia+and+reperfusion+length+on+infarct+size+and+LDH+release%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiovascular+Pharmacology+and+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Characterization of the Langendorff perfused isolated mouse heart model of global ischemia-reperfusion injury: Impact of ischemia and reperfusion length on infarct size and LDH release.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology and Therapeutics. 21 (3), 286-295 (2016).</li>
<li>Task Force on the management of ST-segment elevation acute myocardial infarction of the European Society of Cardiology (ESC). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ESC+Guidelines+for+the+management+of+acute+myocardial+infarction+in+patients+presenting+with+ST-segment+elevation%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">ESC Guidelines for the management of acute myocardial infarction in patients presenting with ST-segment elevation.</a> European Heart Journal. 33 (20), 2569-2619 (2012).</li>
<li>Shigemitsu, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+myocardial+infarction+due+to+left+main+coronary+artery+occlusion.+Therapeutic+strategy%5BTitle%5D)+AND+%22Japanese+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Acute myocardial infarction due to left main coronary artery occlusion. Therapeutic strategy.</a> Japanese Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 50 (4), 146-151 (2002).</li>
</ol>

著者が明らかに何もありません。

リアルタイム体内心原性ショックと私の左心室機能障害の評価法として PV が急性心筋梗塞における左室血行動態のモニタリング/R 負傷。太陽光発電カテーテルは、左室収縮および拡張機能に関するパラメーターの広いスペクトルを提供できます。心エコー検査や MRI (商工会議所ボリューム、EF、拍出量と心拍出量) によって得られる通常 LV 体積パラメーターに加えて太陽光発電分析は左心室収縮期の対策を同時に提供して左心室機能のより完全なプロフィールを得られます。パフォーマンス (収縮 dP/dt、ストローク作業) と左心室コンプライアンス (-dP/dt、タウ) 拡張機能のパラメーターとして。
急性心筋梗塞患者における急性心不全は、早期の病院での罹患率と死亡率2の重要な予測因子は、急性の血行障害と急性心筋梗塞における心原性ショックの監視として役立つことができます。実験の設定で可能な保護メカニズムを識別するための貴重なツールです。
いくつかの要因が成功したデータ集録のために重...

心血管疾患は、西洋文明1の死の最も一般的な原因です。急性心筋梗塞は、急性および慢性の高死亡率2に関連付けられている重要なイベントです。血行再建術は、達成を介して緊急経皮的冠動脈インターベンション (PCI) は、たとえ死亡まま高、特に急性心筋梗塞の3症例では症状の発症後最初の 48 時間以内です。左心室 (LV) 関数で急性の減少に伴う心原性ショックは、これらの患者の3で院内死亡率の主要な原因です。この早期左室機能の低下、心筋障害による虚血と再灌流。このいわゆる虚血/再灌流 (私/R) 傷害活性酸素種4、5の誇張された生成など細胞メタボロームの変化によって媒介されます。
臨床設定で心筋の損傷の減少につながる可能性の保護メカニズムを調べるには、信頼性の高いマウス モデルがポスト R LV 関数6の評価方法を含むが不可欠です。この設定の経胸壁心エコー法7磁気共鳴画像 (MRI)6広く機能的なフェノタイピング8,9に使用されます。ただし、これらのメソッドは、重症左室不全および進行中の急性心筋梗塞における心原性ショックの評価には適していませんし、直接左心室圧データを表示できません。Ex vivoアッセイの心臓を用いた蛍光装置は初期段階の基礎となる病因についての情報を提供します私/R 負傷10。このメソッドは、生体内で自律神経系やホルモン調節、酸塩基の恒常性の調節などの適応メカニズムを再現できないのため制限されます。心原性ショック、心筋を中に現在進行中の左心室不全の完全な機能表現の現在いるメソッドがない私/R 負傷。
カテーテル検査圧力ボリューム (PV) と非定常手術左冠動脈 (LCA) 咬合の組み合わせで同期のアプローチは有益であるが、技術的に困難な可能性があります。私の中に心外血行動態安定/不安定な麻酔または血損失が大きく結果に影響するので、R の傷害が有効な結果のために不可欠。小説は私の血行力学的表現型解析のアプローチ/R 傷害を介してLV PV カテーテルと一時的な LCA 咬合が心原性ショックと急性心筋梗塞における左心室機能不全に関する新たな洞察をもたらすとの将来の分析の方法として耐性獲得。

<table><tbody><tr><td>Betaisodona Loesung</td><td>Mundipharma</td><td>4162-1606/89x30mm</td><td>Povidon-IOD</td></tr><tr><td>キャリブレーションキュベット</td><td>ミラー機器</td><td>910-1049</td><td>キャリブレーションキュベット</td></tr><tr><td>Conturaプロフェッショナルヘアトリマー</td><td>Wella</td><td>HS-60</td><td>小動物シェービングシステム</td></tr><tr><td>エクリプ針 27G</td><td>BD</td><td>REF 305770</td><td>27G 針</td></tr><tr><td>鉗子</td><td>FST</td><td>11203-25、11069-08、11616-15、11506-12、11051-10</td>外科<td>用鉗子</td></tr><tr><td>鉗子</td><td>Aesculap Braun</td><td>BN731R、BD 311R</td><td>外科用鉗子</td></tr><tr><td>Foris FS2434</td><td>Eizo</td><td>0FTD2033</td><td>モニター</td></tr><tr><td>ハミルトンシリンジ100&micro;l針</td><td>ハミルトン</td><td>80621</td><td>100&micro;l 針付きシリンジ</td></tr><tr><td>加熱された小動物 OPテーブル</td><td>ハーバード装置</td><td>15001</td><td>加熱されたOPテーブル</td></tr><tr><td>ヘパリン・ナトリウム 25000</td><td>レシオファーム</td><td>N68542.04</td><td>ヘパリン</td></tr><tr><td>ケタミン 10% 100 mg/ml</td><td>ベラ・ファーム</td><td>FS1670041</td><td>ケタミン</td></tr><tr><td>Labchart Pro 8 + Proモジュール</td><td>ADインスツルメンツ</td><td>MLS260/8</td><td>PVデータ分析ソフトウェア</td></tr><tr><td>LAS EZ</td><td>ライカ</td><td>LAS EZ</td><td>顕微鏡カメラソフトウェア</td></tr><tr><td>ライカIC80 HD</td><td>ライカ</td><td>IC80 HD</td><td>顕微鏡カメラ</td></tr><tr><td>ライカM80</td><td>ライカ</td><td>M80</td><td>顕微鏡</td></tr><tr><td>マイクロチップカテーテルトランスデューサ</td>ー <td>ミラー機器</td><td>SPR-839</td><td>PVカテーテル</td></tr><tr><td>MiniVent</td><td>ハーバード装置</td><td>845</td><td>換気</td></tr><tr><td>MPVS ウルトラ</td><td>ミラー機器</td><td>PL3508B48/M</td><td>PVカテーテルデータ収集装置</td></tr><tr><td>Octenisept</td><td>Sch&uuml;lke</td><td>20000832-A</td><td>消毒剤</td></tr><tr><td>Plastipak 1ml</td><td>PD</td><td>REF 303172</td><td>1ml シリンジ</td></tr><tr><td>PowerLab 8/35</td><td>AD Instruments</td><td>PL3508</td><td>アナログ/デジタル コンバーター</td></tr><tr><td>Prolene 6-0</td><td>Ethicon</td><td>XNEH7814.P31</td><td>ポリプロピレン縫合糸</td></tr><tr><td>引き込みキット</td><td>FST</td><td>18200-20</td><td>手術部位の引き込み</td></tr><tr><td>セラフレックス 5-0</td><td>ナイラ</td><td>IC108000</td><td>シルク縫合糸</td></tr><tr><td>小型およびマイクロハサミ</td><td>FST エッセン</td><td>14059-11、15007-08、14064-11</td><td>手術用ハサミ</td></tr><tr><td>小型シリコンチューブ</td><td>LCA閉塞用</td>ライ<td>ヒェルト Chemietechnik</td><td></td>チューブ</tr><tr><td>ナトリウム塩化物</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S7653</td><td>塩化ナトリウム</td></tr><tr><td>testo 108</td><td>testo</td><td>5631080</td><td>直腸体温計</td></tr><tr><td>Thinkcentre デスクトップコンピュータ</td><td>Lenovo</td><td>PC0EJS2V</td><td>コンピュータ</td></tr><tr><td>Vasofix Safety 20G</td><td>ブラウン</td><td>4269110S-01</td><td>挿管カテーテル</td></tr><tr><td>Windows 10</td><td>マイクロソフト</td><td>KW9-00240</td><td>オペレーティングシステム</td></tr><tr><td>キシラジン 2%</td><td>セバ</td><td>6324464.00.00</td><td>塩酸キシラジン</td></tr></tbody></table>

マウスにおける急性心筋梗塞のリアルタイム圧解析

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

急性心筋梗塞は、急性心不全、心原性ショックにつながることができます。血行動態の評価は、急性左心室 (LV) に対して指示される任意の潜在的な治療アプローチの評価にとって重要です。現在の画像診断 (e.g。、心エコー検査や磁気共鳴画像) 左心室圧のデータは直接測定できないのでいくつかの制限があります。LV カテーテル冠動脈閉塞を受けているマウスでは、左心室機能のリアルタイム評価手法として勤めるかもしれません。
プロシージャの先頭にマウスは続いて気管内挿管麻酔をかけられました。LV のカテーテル法、右頚動脈だった中間首切開を介して公開されています。カテーテルは導入され、LV キャビティに置かれます。左開胸を行い左主冠動脈 (LCA) を結紮します。再灌流を誘導して、すべての回で 45 分圧ボリューム データが記録された後の縫合がリリースされました。
LCA の結紮は行程容積、左室駆出率 (EF) と心拍出量の 30% の減少によって証明されるよう左心室収縮機能の低下を発生します。左心室の収縮性のパラメーターとして最大 dP/dt も有意に減少したし、拡張機能は重度に障害 (最低 dP/dt-40%)。20 分の期間にわたって再灌流は左心室機能の完全な回復には至らなかった。
リアルタイム圧容積解析は、マウスにおける急性心筋梗塞における心機能をモニタリングのための有効な処置として提供しています。安定した麻酔と標準化された外科的アプローチを維持することは、有効な結果を確保するために重大だった。急性心筋梗塞の初期段階は罹患率と死亡率の重要な線引きの方法は耐性獲得の新しい戦略の前臨床評価のために有益かもしれない。

LV カテーテル検査後再灌流の 10 分に続いて 45 分リバーシブル LCA 結紮を行った。太陽光発電データは、(図 1) 回で記録されました。
PV カテーテルの正しい配置特性 LV PV グラフ (図 2 a) を取得することによって確認されました。LV カテーテル留置が 0 - 最小限の典型的な心室圧力範囲を示した 20 mmHg PV カテーテル大動脈の偽配置 30 〜 60 mmHg (拡張期血圧の最小圧力をもつ典型的な動脈圧曲線に示されていたに対し) とを示す (図 3 b 、3 C) を閉じて大動脈弁収縮期の終わりに小遠足。LCA の正常咬合は視覚的に遠位左心室心筋 (図 2 b</...

マウスにおける急性心筋梗塞は、急性が不完全に特徴付けられる左心室 (LV) の機能変化を誘導します。LV カテーテル冠動脈閉塞を受けているマウスでは、左心室機能のリアルタイム評価手法として提供しています。

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...

この方法は、急性心筋梗塞の早期保護メカニズムの特定など、心血管研究の分野における重要な質問に答えるのに役立ちます。この技術の主な利点は、心筋梗塞を受けたマウスで高度な血行動態特性評価をリアルタイムで実行し、その後に再灌流を行うことができることです。気管内挿管と虚血再灌流手術は、当研究室の生物学者であるPia Stockが行います。動物に麻酔をかけた後、電動バリカンを使用して首と胸の毛を取り除きます。次に、ベタジンと70%アルコールを交互に3回スクラブして肌をきれいにします。次に、小さな手術用ハサミを使用して、下唇の下5ミリメートルと胸骨に向かって縦10ミリメートルの中央切開を行います。次に、鉗子を使用して顎下腺の左右の部分を鈍く解剖します。次に、右傍気管領域の筋肉組織と脂肪組織を分離して、右コミューンの腐食動脈にアクセスします。湾曲した鉗子を使用して、血管を慎重に鈍く解剖し、血管の5〜10ミリメートルを動員して分離します。腐食した体内の迷走神経を動かすことは、重度の低血圧や徐脈につながる可能性があるため、常に避けてください。血管の動員後、準備された2つの5/0シルク縫合糸を血管の下に通過させます。次に、きつい結び目を使用して遠位血管を結紮し、カテーテルが行く近位縫合糸に緩い結び目を置きます。次に、露出した血管の近位端、縫合糸の近位に止血血管クランプを配置します。これは、血流を可逆的に遮断するために使用されます。次に、マイクロハサミを使用して、頭蓋結びの近位1ミリメートルにくさび形の切開部で血管を開きます。小さな血滴が見えるはずです。次に、切開部を伸ばし、カテーテルを血管に10ミリメートル挿入します。次に、カテーテルプローブによって収集されたデータの記録を開始します。次に、血管クランプを抜出し、切開部に生理食塩水を1〜2滴加えて、カテーテルを血管内にさらに10mmスライドさせます。次に、結び目を締めて、カテーテルを所定の位置に固定せずにカテーテルに沿って血液が逆流するのを防ぎます。次に、カテーテルが大動脈に到達したときに圧力分析で動脈血圧プロファイルが示されるまで、カテーテルをゆっくりと前進させ続けます。大動脈弁では、軽い抵抗と引っ張り同期運動も感じられるはずです。カテーテルを大動脈弁を通して前進させようとするとき、カテーテルを5ミリメートル引き戻して再び前進させるのに役立ちます。適切な左心室カテーテル法は、拡張期血圧の変化によって示されます。体積の変化は、センサーが左心室に進んでいることの指標でもあります。カテーテルが左心室にあることを確認したら、近位結び目をよりしっかりと固定して、カテーテルが動かないようにします。カテーテル挿入後、45分間の虚血を準備します。まず、尾側胸骨から左腋窩にかけて皮膚を切開します。次に、肋骨を露出させるために2つの筋肉層の鈍い準備を進めます。次に、左肋骨の3本目と4本目の肋骨の間に切開して胸部を開きます。外科用フックを使用して心膜にアクセスし、心臓を覆っている心膜を切除します。左主冠動脈結紮を続行する前に、動物に触れずに30秒間待って、有効な分析のための圧力と体積のデータを記録します。次に、左の主冠状動脈を特定します。それは左のオラクルの下に現れ、心臓の左側から頂点に向かって下降します。次に、6/0ポリプロピレン縫合糸を左オラクルの2ミリメートル下の動脈の周りにループします。次に、ループの下に小さなシリコンチューブを置き、結び目で固定します。遠位心筋が灰色に変わり始めたら、左主冠状動脈が閉塞しています。続行するには、縫合糸を1ミリメートルの長さで切断し、次に外科用フックを放し、切開部の上の筋肉層を手動で閉じます。その後、圧力と体積のデータを連続して記録しながら45分間待ちます。45分後、切開部を再度開き、シリコンチューブを取り外して再灌流を誘導します。その後、さらに 20 分間データを記録します。心臓が赤に戻ると、再灌流は成功します。再灌流期間の後、結び目を緩めてカテーテルを抜き、結び目をすばやく固定して、さらなる研究に血液が必要な場合に失血を防ぎます。テキストプロトコルに詳述されているキャリブレーション手順が完了したら、ソフトウェアガイド付きのデータ解析を実行します。ベースライン データについては、カテーテルが大動脈弁を通過する前に少なくとも 10 サイクル経過したことを強調表示します。必要に応じて、換気や操作による逸脱のあるサイクルを除外します。次に、虚血と再灌流を通じて5分間隔で10サイクルブロックを分析します。この分析によって計算されたさまざまなパラメータは、左心室機能の特性評価に十分です。実験の最後に、カテーテルが左心室から引っ込められた後、圧力データの最終分析を行います。プロトコルに続いて、左心室カテーテル法の後、可逆的な左主冠動脈結紮術が 45 分間行われ、続いて 20 分間の再灌流が行われました。容積と圧力カテーテルの正しい配置は、特徴的な左心室圧力-容積グラフを取得することにより確認されました。左主冠状動脈の閉塞の成功は、遠位左心室心筋のブランチングによって視覚的に確認されました。左主冠動脈閉塞後、圧力と体積のデータを 5 分間隔で分析しました。圧力データは、最大左心室収縮期血圧に変化を示さず、末梢灌流が維持され、麻酔が安定していることを示しています。左心室容積の解析により、虚血の初期段階では、駆出率と絶対脳卒中容積が有意に減少したことが明らかになりました。左心室収縮性のパラメータである圧力の最大変化は、心筋虚血を受けているマウスの30%の減少を示しました。圧力の最小変化も大幅に減少し、左心室コンプライアンスが損なわれていることを示しています。このビデオを見た後、圧力容量カテーテル技術を使用して急性心筋梗塞を受けているマウスの左心室収縮期および拡張期機能を特徴付ける方法について十分に理解しているはずです。

real-time-pressure-volume-analysis-acute-myocardial-infarction

Research

JoVE Journal

Medicine

医学

マウスの心臓のMRIおよびPETイメージングの実行方法について説明します。このプロトコルは、心筋梗塞と心不全のモデルにおける治療効果を評価するように調整されています。...

心筋梗塞マウスモデルにおけるMRIとPET

最小限の侵襲操作によるマウスの心筋梗塞の再現性の高いモデルが記述されています。モデル化が容易に行えるため、高い再現性と生存率を実現しています。したがって、記載されているモデルは、3Rの原則(Replacement(置換)、Refinement(改良)、Reduction(リペアメント)、Refinement(リファインメント)、Reduction(リダクション)の要求に応じて、必要な動物の数を減らします。...

マウスにおける心筋梗塞を誘発する低侵襲手術手順

心不全は入院の主な原因であり、主要な死亡原因です。マウスにおける左前下行冠動脈の永久結紮のモデルを適用して、心室リモデリングと心筋梗塞後の心機能障害を調査します。マウスにおける侵襲的血行動態測定の技術が提示されます。...

マウスの左前下冠動脈の動脈の常設ライゲーション：心筋梗塞後のリモデリングおよび心不全のモデル

この方法は、実験的に誘発された心筋虚血のマウスにおいて、心臓の形態、機能、灌流、代謝、および生存率を評価するための量子マイクロコンピュータ断層撮影法(MicroCT)の使用を概説しています。この技術は、ヒト心臓病のさまざまな動物モデルの非破壊ハイスループット縦断的in...

心筋の構造、機能の in vivo定量的評価では 、灌流および生存率は、心臓マイクロコンピュータ断層撮影法を使用しました

信頼できる正確なアウトカム評価は、臨床治療への臨床前治療の翻訳のための鍵です。現在の用紙は、ブタ急性心筋梗塞モデルにおける心機能および損傷の3つの臨床的に関連する主要な結果パラメータを評価する方法を説明します。...

急性心筋梗塞の豚モデルにおける主要アウトカム評価

本明細書では、マウスにおける左前皮下冠動脈の永久的なライゲーションを達成する方法を示す外科的処置について説明する。このモデルは、心筋梗塞の病態生理学とそれに付着した生物学的プロセスを調べるために高い関連性がある。...

左前皮下冠動脈の永久的なライゲーションを用いたマウス心筋梗塞モデル

この記事では、マウスの心筋凍結傷害後の心臓リモデリングを研究するモデルを示す。...

マウスの心筋梗塞を研究する凍結傷害モデル

適切な麻酔下で、マウスの心臓を肋間腔から外在化し、ほとんどの検査室で容易に入手できる材料を使用して左前下行動脈(LAD)を結紮することにより、心筋梗塞の誘発に成功しました。...

マウスにおける心筋梗塞の誘導のための改良簡便法

ここでは、マイクロマニピュレーションによる左前下行冠動脈の精密結紮により、マウスの心筋梗塞または心筋虚血再灌流障害を誘発できる簡便で再現性のある方法について述べる。...

マウスにおける心筋梗塞および心筋虚血再灌流障害の誘発

本プロトコルは、左前下行動脈の迅速かつ正確な局在化のための修正された胸骨傍長軸ビューを説明しています。このアプローチは、マウスの心筋虚血再灌流後の冠状動脈血流予備能の動的変化の検査を容易にする一方で、よりシンプルでユーザーフレンドリーになるように設計されています。...

マウスにおける心筋虚血再灌流後の冠動脈血流予備能の動的評価

学ぶマウスの急性心筋梗塞におけるリアルタイム左室圧解析法。カテーテルによる高度な血液動態評価で虚血・再灌流中の心機能変化を詳細に解析し、心血管研究の新たな知見を得る。

マウスにおける急性心筋梗塞のリアルタイム圧解析

さらに動画を探す