Name: 準備・手順・膝変形性関節症の治療における多血小板血漿注入の評価 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-04T13:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 38 s
Description: 学ぶ膝変形性関節症のPRP注入療法の準備・手順・評価方法。二段遠心分離法で血小板濃度を標準化し、関節腔内投与による軟骨修復と骨再生促進効果を検証する治療プロトコルです。

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本研究は、中国の国家自然科学基金 (81371991) および科学および技術の広東省 (2015B020225007) の主要なプログラムによって支えられました。

説明されている方法は、広東省総合病院の倫理委員会によって承認されました。
1. 手動遠心分離によって PRP を取得します。
<ol><li>快適な室温と湿度滅菌流の手術室で仰臥位で患者の準備: 部屋の温度は 22 ° C と部屋の湿度は 60%。</li>
	<li>ヘパリン ナトリウム (2 mL = 12,500 U)、0.2 mL を描画し、50 mL シリンジを湿らせて 1 mL 注射器を使用します。 注: クエン酸ナトリウムの 3 mL、ヘパリン ナトリウムを置き換えるこの手順では典型的なも。</li>
	<li>止血帯をリグ、2-3 回、肘を滅菌、湿った 50 mL シリンジを使用して肘静脈から 30 mL 末梢血を描画します。</li>
	<li>最初の遠心分離を行います。<ol>
<li>2 つの 50 mL 滅菌遠心チューブに末梢血を均等に分割します。</li>
		<li>水平ロータで放置、遠心分離機、無菌条件の下で 2 つの管を置きます。</li>
		<li>800 x g で 6 分間遠心します。</li>
		<li>滅菌手袋着用を水平ローターを取るし、遠心管を取り出します。</li>
		<li>末梢血は二層に層状になっていることを確認する成層を観察します。</li>
		<li>きれいな遠心管にこれら 2 つの遠沈管から上澄み液を収集するのにきれいな 10 mL 注射器を使用します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>2 回目の遠心分離を行います。<ol>
<li>きれいな 10 mL 注射器を使用すると、バランスの別のきれいな遠心管に滅菌水や生理食塩の相当量を追加できます。水平ロータのチューブを入れてください。絆創膏で上澄み層液体のいずれかをマークします。</li>
		<li>1400 x g で 5 分間遠心します。</li>
		<li>うち、水平ローターを取り出して観察することによって、成層チェック マーク チューブの液が三層に分かれていること。</li>
		<li>10 mL 注射器を使用して、中間の顆粒細胞層 (白血球の豊富な PRP 層) と清の層からの液体 4 mL を描きます。中間層の量は十分ですが場合、は、それから 4 mL を描画します。</li>
		<li>3.6 mL 注射器に残りの液体を残して評価のため滅菌の抗凝固管 (K2EDTA、3.6 mg) の液 0.4 mL を置きます。 注: プロトコルはここで一時停止することができます。</li>
	</ol>
</li>
</ol>2 PRP の関節内投与
<ol><li>手術台の上に仰臥位の患者の嘘と膝を 90 度に曲げます。</li>
	<li>膝蓋骨と膝蓋靭帯外側から 1 cm の下縁で穿刺部位を探します。マーカー ペンを使用して、サイトをマークします。</li>
	<li>Anerdian III、滅菌手袋の着用で 3 回穿刺部位の皮膚殺菌を行い、無菌穴-タオルでカバーします。</li>
	<li>注射器を脛骨プラトーに平行に配置し、45 度の角度で穿刺を行います。完全に皮膚に針を挿入します。</li>
	<li>膝の関節腔に注射器から PRP の 3.6 mL を注入します。</li>
	<li>滅菌ガーゼで穿刺位置をカバーし、絆創膏で固定します。</li>
	<li>10 分間傷口に圧力を適用されます。30 分の任意の深刻な有害反応を観察します。</li>
	<li>毎月の間隔で 3 回の注射の合計を管理します。 注: プロトコルはここで一時停止することができます。</li>
</ol>3. 術後評価 prp 血小板注入
<ol><li>PRP に血小板の濃度を評価します。<ol>
<li>抗凝固のチューブ (K2EDTA、3.6 mg) から PRP の 0.4 mL を使用します。</li>
		<li>自動血球アナライザーを使用して prp 血小板濃度を分析します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>Prp 血小板注入の術後結果を評価します。<ol>
<li>相談 1 日それぞれ 3 つのトリートメントの前に、と実施さらに患者フォロー アップ 1 日各治療、それぞれの治療、それぞれの治療、第 3 の治療、第 3 治療後 3 ヶ月、6 ヶ月後 1 ヶ月後 1 週後の 3 日後第 3 回投与。</li>
		<li>ビジュアル アナログ スケール (VAS)、ウェスタン オンタリオ ・ マック マスター大学変形性関節症インデックス (WOMAC)、膝社会スコア (KSS)、Lysholm 膝機能スケールを使用して、術後の効果を評価します。</li>
	</ol>
</li>
</ol>

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</ol>

著者が明らかに何もありません。

正常ひと全血液で血小板の濃度は 150,000/μ L と 350,000/μ L の間、prp 血小板濃度が 5 回通常濃度9三 1,000,000/μ L、到達することを広く信じられています。前足の階層システムによるといわれている PRP したことがない明らかな効果血血小板濃度が 3 回以上通常濃度、PRP は、血小板濃度が 6 を超える抑制効果通常濃度12回します。したがって、このプロトコルのための最低限の要件は、これらのレベル間の PRP 血小板濃度であることです。
単一の遠心分離によってまたは遠心分離の 2 つのラウンドで、手動の PRP 作製を実現できます。異なる遠心分離パラメーターの設定によって 2 つの方法で得られる PRP の品質は異なります。単一の遠心分離によって得られた血小板濃度が低いが、PRP に白と赤の血液細胞が含まれていません。二重遠心分離によって得られた血小板濃度が高いと PRP には通常白血球と赤血球も13の...

膝変形性関節症 (KOA) は整形外科部門で最も多く見られる病気の一つ65 歳以上の人の 30%-50% の経験この病1。現時点では、コアの保守的な管理には主に軟骨の栄養剤と非ステロイド性抗炎症薬の内服、関節内注射、ヒアルロン酸ナトリウムと理学療法が含まれています。ただし、これらのメソッドは、膝関節2のプロセスを止めることはできません。関節軟骨は、コア3の病因の一部である代謝の変化、関節の不安定性、関節表面の摩耗を引き起こす可能性が。しかし、血管、神経、関節軟骨のリンパ系組織の不在のため損傷後の回復は難しいです。軟骨を修復するの効果的な方法は、コアの治療のため特に重要です。Osteoclasia の治療もコア治療で重要な焦点です。
多血小板血漿 (PRP) は、自己の生理活性物質と PRP の骨や関節の問題への応用はますます研究されています。PRP の臨床使用のための生物学的根拠には、成長因子のローカル配信と炎症反応の修飾に及ぼす影響とその細胞増殖・分化4肯定的な効果が含まれています。PRP が脱顆粒によって α 顆粒を解放し、さまざまな成長因子、血小板由来成長因子、変換の成長因子 β、インスリン様成長因子などを分泌する活性関節内注入後、上皮成長因子、血管内皮増殖因子、線維芽細胞成長因子。骨芽細胞と軟骨細胞の増殖を促進するこれら、軟骨の変性を抑制する、軟骨と軟骨下骨の安定性を強化、マトリックスメタロプロテアーゼ遺伝子発現組織阻害剤を調節する、合成のバランスを維持し、プロテオグリカン5,6の劣化。したがって、PRP は、軟骨損傷を修復し、骨の再生を加速できます。
Prp 血小板注入の結果は、サンプリング サイト7、遠心分離機の準備法8の種類抗凝固薬9活性剤10の使用など、さまざまな要因に影響されます。PRP を準備する約 3 種類遠心方法があります。手動遠心分離、遠心分離の機器ベースまたは血漿濾過技術が利用可能な手動および機器ベースのメソッドは、最もよく使用されます。手動の方法以上の機器が必要です、便利です、低コストし、は (図 1) を実行する簡単です。PRP は、手動遠心分離二度のパフォーマンスによって準備されます。混合末梢血液と抗凝固剤は血漿と血小板から血液細胞を分離する遠心分離します。下のレイヤーに赤の血液細胞を破棄した後上澄み液は再分離、培養上清中の血小板貧しい血しょう、中間の PRP と subnatant 残留赤血球に分けて遠心分離します。膝関節腔注入用中間層 (数量が不足している場合、上清の一部描画できます)。方式の評価は、血液中の血小板濃度と臨床転帰の評価を含みます。
PRP の準備のプロトコルの臨床試験での報告は非常に一貫したではなく、研究の大半は再現11プロトコルを許可するための十分な情報を提供しません。ここでは、PRP と結果の評価と PRP の関節内注入、KOA の治療を準備する再現性のある手法について述べる。選択基準 (アセトアミノフェン) など単純な鎮痛薬と治療のための悪い痛みを軽減できる膝変形性関節症患者であった。除外基準に静脈の戻りやリンパの還流障害の患者が含まれています。膝関節感染症患者皮膚病または注入領域における感染症熱患者凝固機能異常の患者深刻な心血管疾患患者。全体の治療は 30 分以内と prp 血小板濃度標準化された測定に達することが証明されます。近いフォロー アップ中に成果を評価でその有効性を発揮します。

<table><tbody><tr><td>遠心分離機</td><td>エッペンドルフ</td><td>5702</td><td></td></tr><tr><td>遠心分離管</td><td>コーニング</td><td>430828</td><td></td></tr><tr><td>水平ローター</td><td>エッペンドルフ</td><td>LL080</td><td></td></tr><tr><td>アネルディアン III</td><td>上海リカン 消毒剤 HiTech Co., Ltd</td><td>310173</td><td>皮膚を消毒する</td></tr><tr><td>1ml シリンジ</td><td>KDL&nbsp;Medical Equipment Co., Ltd</td><td>0.4*13 RWLB</td><td></td></tr><tr><td>10ml シリンジ</td><td>KDL&nbsp;医療機器株式会社</td><td>1.2 * 38 TWSB</td><td></td></tr><tr><td>50mlシリンジ</td><td>KDL&nbsp;医療機器有限公司</td><td>0.7 * 32 TWLB</td><td></td></tr><tr><td>医療止血帯</td><td>常州Jinliラテックス製品有限公司</td><td>0087-2011</td><td></td></tr><tr><td>使い捨て滅菌ゴム手術用手袋</td><td>上海jinxiangラテックス製品有限公司</td><td>17060</td><td></td></tr>使い捨て<tr><td>ドロー血液針</td><td>KDL&nbsp;Medical Equipment Co., Ltd</td><td>0.55*20 L(II) RWLB</td><td></td></tr><tr><td>ヘパリンナトリウム注射</td><td>SPH No.1 生化学 &製薬株式会社</td><td>1706101</td><td>2ml:12500U</td></tr><tr><td>Jifro ハンド消毒剤リンスフリージェル</td><td>上海リカン消毒剤 HiTech Co., Ltd</td><td>311793</td><td></td></tr><tr><td>医療用綿棒</td><td>Foshan Kangzheng Medical Supplies Co., Ltd</td><td>KZ3-12</td><td>皮膚を消毒します</td></tr><tr><td>10ml 生理食塩水&nbsp;</td><td>Jiangxi Shuangshi Pharmecutical Co., Ltd</td><td>140211458</td><td></td></tr><tr><td>自動血液細胞分析装置</td><td>ベックマン・コールター</td><td>LH-750</td><td></td></tr><tr><td>穴から滅菌</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>抗凝固チューブ(採血管、K2E 3.6mg)</td><td>ベクトン、ディキンソン・アンド・カンパニー</td><td>CNL17-COO56</td><td>摂氏4度から25度以内の涼しく乾燥した場所に保管</td></tr>してください ピン<tr><td>セット</td><td>RWDライフサイエンス</td><td>F12006-10</td><td></td></tr><tr><td>滅菌ガーゼ</td><td>広東省 Ze Chang Trade Co. , Ltd</td><td>170915</td><td></td></tr><tr><td>接着絆創膏</td><td>3M トランスポア</td><td>1527C-0</td><td></td></tr><tr><td>スキンマーカーペン</td><td>広州 Mingjia Medical Device Manufacturing Co. , Ltd</td><td>10110</td><td></td></tr></tbody></table>

準備・手順・膝変形性関節症の治療における多血小板血漿注入の評価

Preparation, Procedures and Evaluation of Platelet-Rich Plasma Injection in the Treatment of Knee Osteoarthritis

膝変形性関節症 (コア) は、整形外科で最も頻繁に発生の病気の一つです。既存の非外科的治療は、軟骨の修復と骨再生限定効果を持っています。多血小板血漿 (PRP) は、軟骨損傷を修理でき、骨の再生を効果的に加速自家生理活性物質です。ただし、PRP 準備のプロトコルの臨床試験での報告で再現するプロトコルを許可する十分な情報を提供する研究の大半と、整合性の高いではないです。視覚的に、PRP を準備する再現性のある手法について述べるコア PRP 関節内注入、および結果の評価の方法を使用しての治療。PRP は、手動二重遠心分離を使用して準備されました。PRP 層は末梢血から抽出され、膝関節腔注入に使用します。評価には、血液中の血小板濃度と臨床転帰の評価が含まれています。手動遠心分離によって PRP の準備は、以下の装置が必要で、プラズマろ過または遠心分離装置を使用してより低コストです。二重遠心分離方式の遠心分離当時は、6 と標準化された PRP の一貫性のある準備のため許可する 800、1400 x g の力でそれぞれの遠心の 5 分をそれぞれ。しかし、手動の方法はオペレーターのエラーを受けやすい、PRP バッチ準備は利用できません。PRP の関節内注入は、膝関節症の効果的な治療法をあることを証明しました。全体の治療の施術時間は 30 分以内、prp 血小板濃度を標準化できる、治療フォロー アップ評価する際に有効であることが証明されました。

その結果、血小板は 1121 x 103/µL のレベル標準濃度に達した PRP のカウントします。初期コアで 55 歳の男性患者のプロトコルで説明した 15 の追跡調査を行った。明らか PRP (図 2) の関節内投与後早期臨床結果は良好だった。しかし、中期的効果はやや劣る。著しく有意な鎮痛効果を認めた (図 2 a)。KSS 膝スコアだった KSS 関数よりも高いスコア (図 2 C、 2 D 図)、自覚症状に及ぼす PRP は客観的症状よりも優れていたことを意味します。Lysholm 膝機能スケール スコア本手法が証拠軟骨損傷 (図 2 e) 軟部組織損傷の症状の改善に効果を持っていたことを示した。全体的にみて、PRP プロトコルの治療効果が著しかっ...

膝変形性関節症は整形外科でよく見られています。多血小板血漿注入、準備、手順、評価など全体膝変形性関節症治療の過程を詳しく紹介します。

Knee osteoarthritis (KOA) is one of the most frequently encountered diseases in the orthopedic department. Existing non-surgical treatments have a limited ...

変形性膝関節症は整形外科で頻繁に見られます。血小板が豊富な血漿注射による膝変形性関節症治療プロセス全体を詳細に紹介します。準備、手順、および評価を含みます。変形性膝関節症は、整形外科で最も頻繁に見られる疾患の1つです。65歳以上の人々の30〜50%がこの病気を経験しますが、既存の非外科的治療は軟骨の修復および骨再生に限定的な影響を及ぼします。血小板が豊富な血漿PRPは、軟骨損傷を修復し、骨再生を効果的に促進することができる自己生理活性物質です。そして、骨や関節の問題へのPRPの適用はますます研究されています。PRPの臨床使用のための生物学的合理的な成長因子の局所送達および炎症反応の修飾および細胞増殖および分化に対するその肯定的な効果が含まれる。しかし、臨床研究におけるPRP調製プロトコルの報告は非常に矛盾している。そして、研究の大半は、プロトコルを再現するための十分な情報を提供していません。手動方式は、最小の機器を必要とし、便利で、低コストで、実行が簡単です。まずは手動二重遠心の性能でPRPを準備します。末梢血からPRP層を抽出する。次に、この層を使用して膝関節腔注入を行う。この方法の評価は最後に、血小板濃度および臨床結果の評価を含む。ここでは、PRPを調製する再現性のある方法と、PRP関節内注射によるKOAの治療について述べる。結果の評価により、治療手順全体が30分未満かかり、PRPの血小板濃度が標準化された測定に達することが証明される。その有効性は、クローズフォローアップ中に結果を評価することによって実証される。患者を、快適な室温と湿度の無菌層流れ手術室で、患者をスピーヌ位置に準備します。2ミリリットルヘパリンナトリウムを引きます。50ミルシリンジを湿らせた。止血帯をリグします。肘を殺菌する。肘の静脈から30ミルの末梢血を引き出す。最初の遠心分離を行います。末梢血を2本の50ミル滅菌遠心分離チューブに均等に分けます。水平ローターに2本のチューブを入れ、次に無菌状態で遠心分離機に入れます。800G遠心力で6分間遠心分離機。水平ローターを取り出します。滅菌手袋を着用してください。その後、遠心分離チューブを取り出します。層を観察して、末梢血が2つの層に成層されていることを確認します。1つの遠心チューブからスーパーナテントの液体をクリーンな遠心管に集める。別の遠心管に対してこのステップを繰り返します。スーパーナテント層液を同じ遠心管に加えます。第2の遠心分離を行う。別のきれいな遠心分離管に無菌水または通常の生理焼片の同等量を追加します。水平ローターにチューブを入れます。粘着石膏でスーパーナテント層液を持つものをマークします。遠心分離機は1400G遠心力で5分間。水平ローターを取り出します。マークされたチューブを選択します。そして、成層を観察することによって、マークされたチューブの液体が3つの層に分かれていることを確認してください。10ミルのシリンジを使用して、PRP層とスーパーナテントの底層の一部である中間顆粒状細胞層から4ミルの液体を引き出します。中間層の量が十分であれば、ちょうどそれから4ミルを引きます。評価のために無菌抗凝固チューブに液体のポイント4ミルを入れて、注射器に残っている液体の3.6マイルを残す。患者は手術台の上に仰向けに置き、膝を90度に曲げましょう。膝蓋骨の内側のマージンで穿刺部位を見つけ、膝蓋靭帯から1センチメートル離れた場所に位置付ける。滅菌手袋を着用し、3回の穿刺部位で皮膚の滅菌を行う。無菌の穴タオルで覆います。シリンジを脛体高原に平行に置き、45度の角度で穿刺を行います。針は完全に皮膚に挿入する必要があります。注射器から膝関節腔に3.6ミルPRPを注入します。穿刺位置を滅菌ガーゼで覆い、接着石膏で固定します。創傷に10分間圧力をかける。30分間の重篤な有害反応を観察する。全体の治療は、毎月の間隔で投与された3つの注射の合計で構成されています。PRPにおける血小板の濃度を評価する。抗凝固管から4ミルPRP点を使用します。自動血球分析装置を用いて、PRPの血小板濃度を分析する。PRP注入の術後の結果を評価する。3つの治療の1日前に診察を受け、各治療の1日後、各治療の3日後、各治療後1週間、3回目の治療後1ヶ月、3回目の治療後3ヶ月、および3回目の治療の6ヶ月後に、さらに患者のフォローアップを行う。ビジュアルアナログスケール、ウェスタンオンタリオ大学とマクマスター大学変形性関節症指数、膝協会スコア、および関節座膝機能スケールを使用して術後効果を評価します。Joveビデオで調製されたPRPの血小板数は、マイクロリットル当たり10倍の10倍の標準濃度レベルに達した。我々は、早期KAOを有する55歳の男性患者に関する議定書に記載された15のフォローアップ調査を実施し、PRPの関節内投与後の早期の結果が満足であることが明らかであった。しかし、中期効力は若干劣っていた。著しく有意な鎮痛効果が認められた。KSS膝スコアはKSS機能スコアよりも高く、客観的な症状よりも主観的な症状に対するPRPの効果が優れていた。リスホルム膝の機能的スケールスコアは、我々の方法が軟骨損傷および軟部組織損傷症状を改善する際に明らかな効果を有することを示した。全体として、当社のPRPプロトコルの治療効果は顕著であった。PRPの血小板濃度は、通常の濃度の3〜5倍であるマイクロリットル当たり約100万に達するはずだと広く信じられている。したがって、このプロトコルの最小要件は、PRPの血中血小板濃度がこれらのレベル間にある。より高い濃度で血小板を得るために、我々は二重遠心分離を使用する。血小板の採取率は遠心力と時間に関連しています。チームの探査を通じて、1番目と2番目の遠心分離機に対して6分と5分の二重遠心分離に最適な遠心時間を設けた。力はPRPを準備するためにそれぞれ800、1400Gの。最後に、患者の転帰の評価のために、我々は、スケールの数を使用しました。要約すると、PRPの関節内注射は、変形性膝関節症に対する有効な治療法である。この研究報告書は、信頼性の高い品質のPRPの調製、標準的な注射手順の導入、科学的および実用的な評価計画を含む、治療手順全体を詳細に提供する。

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