Name: 子育てと研究のEristalis テナックスハナアブの長期メンテナンス (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-05-19T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 50 s
Description: 学ぶEristalis tenaxの長期飼育法。ハナアブの行動と神経機構を研究するための標準化プロトコルを確立し、1年以上の飼育を可能にします。研究室での維持管理と繁殖技術を詳しく解説しています。

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私たちの研究室での研究活動は現在オーストラリア研究会議 (ARC、DP170100008、DP180100144)、米国空軍科学研究局 (AFOSR、FA9550-15-1-0188) Stiftelsen オルレ Engkvist Byggmästare によって資金を供給 (2016/348)。我々 は過去のハナアブ株、Cederholms Lantbruk と C M & T L グリーン、牛糞やハナアブの農場へのアクセスのための息子の開発に貢献している研究室のメンバーに感謝、アデレードとコレクションのウプサラ植物園などにより、継続的なサポート。

1. 捕虜を確立するE. テナックスコロニー
<ol><li>成熟した幼虫 (ステップ 1.2) のコレクションを介してコロニーを確立または自由飛行ハナアブ (ステップ 1.3) のコレクション。</li>
	<li>
成熟した幼虫のコレクション
	<ol>
<li>2 番目を収集し、第三齢幼虫牛農場で肥料ピットから。 注: 成熟した幼虫は、蛹になる暗い乾燥した環境を積極的に求めていると、渡り鳥の段階の開始時に検索する最も簡単です。これは湿った糞尿が、ピットは大量のわらを含む乾燥地域に近い肥料の境界線の近くになりがち。スウェーデンのウプサラ近郊の農場で牛からアクセス許可の下を集めました。</li>
		<li>ステップ 3.2 のとおり牛の糞尿で成熟した幼虫をリア.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
野生のハナアブのコレクション
	<ol>
<li>植物園や公園から通常のフィールドに網で野生ハナアブを収集開花植物の豊かさがあります。 注: [アクセス許可のいずれか 3 つのアデレード植物園などの様々 な植物園とウプサラ、スウェーデン各地の公園、マイゴンガ、南オーストラリア州で酪農を含むいくつかの場所から集めました。</li>
		<li>ハウス フィールドは、ステップ 2 で説明したようにハナアブを収集しました。</li>
	</ol>
</li>
</ol>2 ハナアブの住宅と長期のメンテナンス
<ol><li>グループ 20 以下のビニール袋を 30 cm × 45 cm のケージ飼育昆虫ハナアブの家 (25 cm × 25 cm × 25 cm) より大きいグループのため。</li>
	<li>広告自由、いくつかの湿った脱脂綿の上に置かれた蜂花粉と 2-3 mL 蜂蜜の 10-20 粒の形でを水し、食糧を提供します。 注: ビニール袋に住宅、重要だ、綿球湿ったが、過度に飽和ではなく、袋の中の水のすべての蓄積は生存率に悪影響することができます。逆に、昆虫飼育ケージ内に住宅、メッシュ面は、重要な蒸発が発生します。コットン ボールしたがって浅いコンテナーに配置する必要があり、完全に飽和状態になります。<ol>
<li>室温で 6 時間を供給するハナアブを残します。</li>
		<li>8-10 ° C で冷蔵庫の中に、自分の住宅に食料と水とハナアブを置き、完全な暗闇の中で保持します。 注: 暗闇の中で 8-10 ° C でハナアブを格納するハナアブ活性と代謝率の減少と、休止状態の状態を入力するが発生します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>ごとに 3-4 日間は、冷蔵庫、したがって人工冬眠を壊すと、両方の栄養とする手入れをすることを許可からハナアブを削除します。<ol>
<li>新しいビニール袋または生鮮食品および水ときれいな虫かごにハナアブを転送します。この転送は小さい数のハエ、または多数の走光性を利用しても、手動で実行できます。</li>
		<li>走光性を利用して、きれいな虫かごを古いものに参加、エスケープせず 2 つの間を自由に移動する、ハナアブの開口部があることを確認します。不透明な生地で古い虫かごをカバーします。ハナアブは光に向かって、きれいな虫かごに移動します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>フィードし、6 時間室温で新郎にハナアブを許可します。</li>
	<li>ハナアブ、食料や完全な暗闇の中で 8-10 ° C で冷蔵庫の中に、自分の住宅に水を返します。これは別段、ハナアブの人工冬眠です。</li>
	<li>捕らわれの身の間健康とハナアブの長寿を保証するごとに 3-4 日間、休止状態の周期的な破壊を続けます。</li>
</ol>3 E. テナックスの研究所飼育
<ol><li>後部の成熟した幼虫は牛農場 (ステップ 3.2) から収集または妊娠野生つかまえられた女性 (ステップ 3.3) の卵をまたリアします。</li>
	<li>
牛の農場から成熟した幼虫の飼育研究所
	<ol>
<li>牛の糞尿で 30 L バケツの畜産農家から採取した幼虫を配置します。</li>
		<li>大きな箱や袋 (50-60 L の最小ボリューム) 内の成熟した幼虫を含む、バケツを置き、20-30 リットル バケツの縁の高さまで木の削りくずを配置します。 注: これは 3rd令幼虫は木の削りくずをクロールし、蛹にことができます。</li>
		<li>幼虫も、新興のハナアブが脱出できるようにボックスや袋、上にドレープすることができます天井から二重層状蚊帳をハングします。 注: セットアップを囲む任意のエスケープの幼虫は、はまりこのテープに蛹と念のため、両面粘着テープを使用できます。彼らが行う場合は、羽化前に蛹を削除します。</li>
		<li>幼虫と蛹室内温度 (21.5 ± 2.5 ° C) で、営業時間中に間接太陽光と室内灯のいずれかへの露出または暗い光: 12 h の 12 h: 明暗サイクルで維持します。 注: 24 h ライトへの露出は生存率に悪影響することができます。仔牛農場蛹化時から収集されたコレクションの時に自分の成熟度に応じてコレクション後 1-20 日から変わります。</li>
		<li>食べ物や水の掛かる蚊内予想羽化日の前に、(ステップ 2.2 で準備) エンクロージャを net し、2-3 日毎に交換を提供します。羽化蛹化後 7-10 日が発生します。</li>
		<li>新興住宅のステップ 2 で説明したようにそれらを配置する前に室温で 6 時間を供給するハナアブを許可します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>
妊娠野生キャッチ女性から生まれた卵の所飼育
	<ol>
<li>卵、ハナアブ住宅住宅 (ステップ 2) を変更する前と冷蔵庫へそれらを戻す前に確認してください。妊娠女性が野生のつかまえ産卵は、両方の 8-10 ° c と室温でに発生します。<ol>
<li>100 mm × 20 mm シャーレ水道水 70 mL を含む卵を置き、孵化が発生すると、通常は産卵後 2-3 日まで室温で維持します。</li>
		</ol>
</li>
		<li>場所には、新鮮なウサギの糞 1 L と 1 L の水道水を含む 2.3 L バケツで幼虫が孵化しました。<ol>
<li>2-3 日毎のスラリーを確認し、3rdの幼虫が出てくる前にスラリーがに乾燥しませんように、必要に応じて追加の水道水を追加します。</li>
		</ol>
</li>
		<li>兎糞便スラリー、大きいボックス (最小容積 30 L) 内で幼虫を含む、バケットの位置 20 L の木の削りくずを含みます。木の削りくずは、バケツの縁の高さを確認します。 注: これは 3rd令幼虫は木の削りくずをクロールし、蛹にことができます。<ol>
<li>幼虫も、新興のハナアブが脱出できるようにボックスに二重層状蚊帳を置きます。</li>
		</ol>
</li>
		<li>幼虫と蛹室内温度 (21.5 ± 2.5 ° C) で、営業時間中に間接太陽光と室内灯のいずれかへの露出または暗い光: 12 h の 12 h: 明暗サイクルで維持します。 注: 24 h ライトへの露出は生存率に悪影響することができます。</li>
		<li>15-20 日後に蛹化を期待してください。蛹を収集し、虫かご、eclose そこにハナアブを可能にします。</li>
		<li>羽化予定日の前に (手順 2.2 で準備)、食料や水を提供 - 羽化、蛹化の後の 6-10 日が発生して 2-3 日毎を置き換えます。</li>
		<li>ステップ 2 で説明している住宅にそれらを配置する前に室温で 6 時間を供給するハナアブを新興を許可します。 注: 両方の幼虫の蛹化と蛹の羽化を延期できる記憶域で 8-10 ° c. で暗闇の中でこの目的のためには、兎糞便液および木の削りくずで蛹に幼虫を格納します。</li>
	</ol>
</li>
</ol>

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当社の技術 (図 1) を使用してハナアブ研究室で 1 年以上の期間保持され正常に捕われの身の39の 7 ヶ月後行動実験に使用します。確かに、だが直感的より自然な環境で、ハナアブを維持する場合でも 12 h ライト: 12 下 h 暗い条件で、部屋の温度、大幅に減少余命 2-3 カ月。E. テナックス年間の我々 の人工冬眠のサイクルでは以前よりも大幅に長く維持する (77 日33、4 ヶ月9、18 週間30) 別のプロトコルを使用して試行します。この増加の寿命に影響を与える主な要因は 8-10 ° c. で人工冬眠の使用である可能性が高い休止状態を壊す周期、すべての 3-4 日 (ステップ 2、図 1)、我々 によりハナアブ フィードし、自己を育てる、栄養状態と健康、ハナアブの重量 (観察された増加によって証明されるよう維持の両方に図4)、(図 3とを参照してください39) 捕われの身で長期間後も自発運動に変化なし。確かに、人工冬眠で不成功な試みの文学のレポートは金型9の存在と死亡率の増加につながる、休止状態のサイクルを壊さない。
さらに、食糧源として花粉の規定として文学の中でいくつかの論争があります。いくつかの論文は、蜂の花粉は十分で、産卵のために特別ではなく、乾燥や確かに新鮮な花粉の規定のみが適切な9,29状態します。我々 の調査結果を示す、水と蜂蜜の蜂の花粉を補完する、わかります長寿と捕われの身、男女 (図 4) や産卵で起こっているに見られる体重増加での長い期間の後にも、産卵捕われの身の39の 5 ヶ月以上後の女性。この長寿の増加によりすべてのライフ ステージでハナアブの挙動を調べることができます。
フィールドに、女性ハナアブは季節休止状態前に受精、生殖休眠、精子の保存場所および低開発、卵母細胞をまで春28のまま。典型的な女性は、60 日間293000 産卵できるこれらの卵の飼育はそのための私たちの捕虜の人口増加に迅速かつ効率的な方法。ただし、休止状態の期間の後の卵の開発につながる要因の私達の現在の理解は限られています。温度、湿度、光量、栄養状態はすべて生殖休眠28,40の制御の役割をプレーするように提案されています。などの実験操作は、産卵のタイミングと速度の大きい統治をもたらすかもしれない。
同様に、我々 が正常に遅延幼虫の開発だけでなく、蛹、羽化 8-10 ° C で 2 週間、暗闇の中で記憶域によって生存率が大幅に長くなる可能性があります。確かに、蛹の温度が 10 ° C に 25 ° C から落とされたとき 37 日間の蛹期間増加したと報告ヒール30捕虜の人口の人口統計の大きい操作のこれらの戦略を採用し、卵の生産および/または蛹の開発を遅らせることになります。
大規模降伏よりも私たちの要件の多くの大きい重要性の供給の時間的一貫性ですが、これは温室で受粉など、他の用途により重要かもしれません。兎糞便で私たちの技術を使用するとき私たちから得たこと 163 ± 34 このハナアブ卵 (N = 3) の各クラッチがわかった。我々 はこれらが大幅9 幼虫の生育に影響を与えるとして関与している、いずれかの減少の過密と食品の競争によってまたは、温度を調整することによってこの収量を増やすことができるかもしれないことを考えると典型的な女性は産むまで 200 卵40、 ,31,40,41。ただし、表示メディアの基礎が大きく収量32に影響を及ぼすことはありません。さらに、他の脊椎動物の29,の30,31,の42からの排泄物にではなく兎糞便は比較的臭気無料で、通常の実験室の条件の下に保持するコロニー追加の換気をしなくて。だけでなく、酵母などのサプリメントはメディアで幼虫の密度を減少または栄養の追加、利回り31,32,を完全に最適化するためにおそらく十分です 20-25 ° C の一定した温度を維持します。40。
自由に飛んでハナアブ、または遺伝的に多様な捕虜の人口を維持の十分な数を収集するための実用性は両方の実用的で、小規模な研究プロジェクトのための制限時間します。したがって、野生の交配雌の仔を飼育し、収穫成熟幼虫7供給を補完は、研究の場で大腸菌テナックスの通年利用の最も実用的なオプションをできます。これらのメソッドは両方大人ハナアブの寿命を確保するため必要があるし、によって置かれたすべての卵を飼育でコレクションが発生することができます季節によって限られる、妊娠女性を捕獲しました。

ハナアブなどの飛行挙動1、モーション ビジョン2、受粉効率3,4,のメカニズムの科学的な質問の範囲を調査するための有用なモデルとして浮上しています。5,6と微生物免疫7。しかし、ショウジョウバエ8などいくつかの他の双翅目モデルではなくラボは科学研究に使用するハナアブの飼育のための標準化されたプロトコルがないです。確かに、現在の文献では、 Eristalis テナックスハナアブを繁殖させるための方法について説明します、たとえこれらの多くは作物の受粉、生分解性の有機性廃棄物、または解剖学的研究のハナアブの大量培養の開発9,10,11します。 したがって、人口の遺伝的フィットネスを維持しながら健康的な堅牢なハナアブの一貫した供給を提供する容易なプロトコルの必要性に対処しません。
ミツバチとマルハナバチ、ハナアブ、最も重要な野生、ジェネラ リスト送グループ12,13の 1 つであります。約 6000 ハナアブ種世界14,15、スウェーデン16 75 属よりも 300 種とインド17,18,1969 属の 300 以上の種があります。たとえば、農学上重要なマーマレード ハナアブEpisyrphus balteatusとドローンのハエは、我々 はここに焦点を当てるEristalis テナックスにあるヨーロッパ、アメリカ、アジアの6,16、 17,18,19,20,21,22,23,24,25。ハナアブは年間を通しても 1 日を通して均等にアクティブではありません。確かに、季節や日も光強度の変動の時間だけでなく、温度、湿度、風速、影響ハナアブ26,27の活動パターン。フィールドに、地中海気候11年の任意の時間でEristalisを見つけることができますが、冬のアクティブなハナアブの数字が低く。逆に冷たい温帯気候でEristalisは冬の間休止状態し、フィールドを 10 月頃から 3 月28で積極的に動作しているが見つからない。
ハナアブを自由に飛んでは、フィールドに網で収集できます。確かに、温帯気候で、彼らは最大の豊かさでに発見されます、半ば、昼前に穏やかな秋26,27中夏の終わりで、晴れの日。また、第二にE. テナックス幼虫を成熟または 3 齢を識別しヒープ肥料などの有機物を腐敗または有機的汚染された小川10,11から収穫することができます。確かに、公開のラボは、 E. テナックスの飼育技術はすべてに基づいて有機的に汚染された水、植生や糞便問題9,10,29,のいくつかのフォームを介していずれかの幼虫を上げる30,31,32,33。 しかし、幼虫コレクション シーズンによって制限されます、秋11のスタートを春の終わりからツールでのみ実行可能なコレクションです。さらに、幼虫の豊かさは、周囲温度の変化は産卵と幼虫の発育率9,28回数に影響を与えるローカル気象パターンに影響されます。
したがって、季節や地元の天気予報イベントに関係なく実験を年間に行うことができるように飼育幼虫や卵室のハナアブの健全な株式を維持するために戦略が必要です。重要なは、ここで説明する手法は、野生交配雌のみからハナアブを繁殖させます。これはフランクスキらによる研究として重要です。10 、ことがわかった研究所の遺伝的多様性ハナアブの人口を飼育、もともと 120 成熟した幼虫から設立が急速に失われました。彼らは商業作物受粉目的に使用されるコロニーの補充、または完全に再確立、野外採集個体それぞれの春10これらの必要性の遺伝的多様性を維持するためにことを示唆します。
ビジョン、または求愛や交尾で使用される他の感覚で作業する場合、再植民地を確立することによって、または野外採集個体、植民地を定期的に補充することで遺伝的多様性を維持することをこうしてお勧めします。これは性選択に影響を与える人口の遺伝的浮動は重要です。確かに、野生では、男性のハナアブの識別し適切な仲間を傍受し同様に34彼らの領土を防御することによって権利を交配するため他の男性と競う必要があります。このプロセスにより、最高のビジョンと空間的注意と男性の交配で最も成功する可能性が高い、したがってこれらの特徴が次世代に伝わる。これらの継続的なプロセスの結果の効果を一部、ハナアブ35,36の視覚経路で性的二の存在によって発揮します。捕われの身で、男性はフィールドのように交尾する同じ障害を持っていない: まず、女性はすぐに利用できる、小型で限られたエンクロージャが他の交尾のアクセスを阻止するために行動する領土行動の効果を否定する第二に競争力のある男性。ショウジョウバエ、性選択の実験的除去が全体的なボディサイズ、精巣サイズと精子生産37, 男性の削減率の減少と捕獲下人口の有意な効果が示されています。求愛行動38。したがって、捕虜の繁殖プログラム、性選択の考慮せずその後実施された視覚的および動作試験の両方に大きな影響があります。
我々 はここで健全なハナアブの一貫した供給を提供するシンプルでコスト効果の高いソリューションをについて説明します。プロトコルは柔軟な再スタートおよび/または高級、研究の要求に応じて簡単です。

<table><tbody><tr><td>蜂の花粉</td><td>の森のスーパーフード</td><td></td><td>蜂の花粉の任意のブランドが適しています</td></tr><tr><td>蜂蜜</td><td>ブラムウェルズ</td><td></td><td>液体蜂蜜の任意のブランドが適しています</td></tr><tr><td>ウサギの糞便は</td><td></td><td></td><td>、牛や豚の糞尿で代用することができます スラリーに作られた</td></tr><tr><td>BugDome</td><td>オーストラリア 昆虫学用品</td><td>EM42222</td><td></td></tr><tr><td>ビニール袋</td><td>ウールワース ホームブランド</td><td></td><td></td></tr><tr><td>蚊帳</td><td>Clas Ohlson</td><td>34-1113</td><td></td></tr><tr><td>コットン ボール</td><td>ウールワース セレク</td><td></td><td></td>ト</tr><tr><td>冷蔵庫</td><td>Hisense</td><td></td><td>の冷蔵庫は、安定した 8-10&deg を維持する必要があります。C&nbsp;</td></tr><tr><td>バケツ(2-3L)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>大きなプラスチック浴槽(30L)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>木の削りくず</td>ポ<td>ラードおがくず用品</td><td>MaxiFlake(75)&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>バッグクリップ</td><td>IKEA</td><td>ベバラ303.391.70</td><td></td></tr><tr><td>ペトリ皿(100mm x 20mm)</td><td>コーニング</td><td>430167</td><td></td></tr></tbody></table>

子育てと研究のeristalis テナックスハナアブの長期メンテナンス

Rearing and Long-Term Maintenance of Eristalis tenax Hoverflies for Research Studies

世界的な推定 6000 種、ハナアブが飼いならされたミツバチに授粉を代替として生態学的重要です。しかし、彼らはまた管理されたラボ設定でモーション ビジョンと飛行力学を研究する有用な科学的なモデルです。幼虫は、有機的に汚染された水の開発、微生物免疫における投資を調査するための有用なモデルです。大規模商業繁殖農業のため既に行われている間、科学的研究のため捕虜の集団を維持するための標準プロトコルはありません。これは、期間が、一貫性のある、安定した、他の研究目的のために必要ですので、年間を通じて、堅牢な人口を提供するために失敗するピーク受粉中出力質量に焦点を当てて商業繁殖プログラムとして重要です。したがって、確立、維持および飼育下研究人口を更新する方法が必要です。ここでは、栄養と住宅の要件に加えての人工冬眠サイクル、 Eristalis テナックスの長期的維持のための利用について述べる。これらのメソッドを使用して、我々 は健康とE. テナックス以前のレポートと比較しての飼育個体の寿命を増加している大幅。我々 はさらに小規模な飼育方法と利回りを最適化および人口統計を操作するためのオプションについて説明します。

(図 1にまとめた) 視覚と行動の研究のための健全な人口を維持する 3 ウェイ戦略を開発しました。私たちのメソッドは、野生 (手順 1、図 1) からハナアブのコレクションを開始します。私たちの研究室でハナアブを収容昆虫ケージまたはビニール袋、人工冬眠サイクル (ステップ 2、図 1) の下で大幅に延長彼らの寿命。増加数の子孫は野生交配雌 (図 1の手順 3) から飼育することができます。
我々 は、時間の集中的な努力は、野生のハナアブの膨大な数を引く、たとえ環境の条件は有利なを発見しました。対照的に、私たちの 0.03 m3で最大 700 幼虫採集と農場ソース (ステップ 1、図 1) 野生のハナアブの多数にはるかに効率的な方法は、牛の糞尿ピットから収穫成熟した幼虫の飼育成功肥料。さらに、キャプチャされた妊娠女性の後部卵に私たちの技術が成功 (ステップ 3、図 1) ことが分かった。女性は秋の間に地中海性気候 (アデレード) でキャプチャされ、冬を施した 24 クラスター 19 女性から 20 週間の期間で、卵のいくつかのバッチ。これらの卵のバッチの 10 はすべての肥沃なされ、幼虫の孵化をもたらした水の中に置かれました。幼虫の 3 つのグループがこのポイントを超えて撮影し、兎糞便スラリーに配置、34 163 ± の結果でハナアブ、観測されたジェンダー バイアスなし (図 2) に登場 (平均 ± SD、N = 3)。
これらの飼育研究室ハナアブの健康は、キャプチャ フィールド個人に比べて女性のハナアブの自発運動と重量の比較によって決定されました。一般的な運動は、39を前述のように運動の活動の監視システム (LAMS) を使用して評価されました。重量 (図 3A) またはアクティビティ (図 3B) に有意差は認められなかった飼育実習と野生のつかまえられたハナアブの私たちの人工冬眠下で飼育下で 4 ヶ月サイクルの後.E. テナックスは人工冬眠のサイクルを使用せず実験室で維持されたとき、2.5-3 か月 (73 ± 5 女性のため 7 日間) と 79 ± 11 男性のため 4 日間の寿命と寿命が大幅に低下を見た。ハナアブが人工冬眠で保たれたとき彼らは 12 ヶ月以上住むことができます。
さらに、長期維持、説明した手法の効果はさらに飼育ラボ ハナアブの男女ともに時間をかけて重量の比較によって評価されました。一貫して重量を量る女性よりも男性の同等 (二元, N = 12,図 4p &lt; 0.0001) で、男女の 4 ヶ月の期間にわたって体重の大幅な増加を見ました。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57711/57711fig1.jpg"> 図1:フロー図のアウトラインの健全な捕虜の人口の維持のための方法E. テナックス.(1) ここに記載されている手順から始まりますか成熟した幼虫牛糞 (ステップ 1.2) からまたは自由に飛行ハナアブ (ステップ 1.3) のコレクション。(2)、ハナアブに入って昆虫ケージまたはビニール袋、番号に依存します。8-10 ° C は壊れていてすべての 3-4 日で人工冬眠サイクルで保持されます。(3) 収集の幼虫は、その牛糞 (ステップ 3.2) に保持されます。演習中に産んだ卵は、兎糞便スラリー (ステップ 3.3) に配置されます。成熟に達すると、3rdの幼虫はさなぎになるところ周囲の鋸の塵にクロールします。羽化が 6-10 日後に発生する、このハナアブが住宅 (ステップ 2) に配置されます。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/57711/57711fig1large.jpg">このファイルをダウンロードするここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57711/57711fig2v3.jpg"> 図2:  数と性比の E. テナックス正常に個々 の卵から飼育。E. テナックス蛹から、この数は、卵の 3 つのバッチから開発データを当研究室のレイアウト。卵は、野生で捕獲された女性によって築かれました。データは、ハエのセックスに色分けされています。率に有意差はありません。
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57711/57711fig3v3.jpg"> 図3:  研究室の人口健康の評価の飼育し、フィールドが長期飼育後女性ハナアブを収集します。(A)飼育実験室とフィールドの間の重量の比較が人工冬眠 (N = 12) 下で飼育下で 4 ヶ月後女性ハナアブをキャプチャします。育てられたの(B)活動レベルとフィールド、人工冬眠で捕われの身で 4 ヵ月後女性ハナアブをキャプチャしました。ハナアブの自発運動は、運動中に赤外線ビームを壊すそれらによって自発活動システムで測定しました。以前は、我々 は 6.7 時間自発活動モニター システム39完全 2 日目、一日の中で活動を平均として (Nフィールド キャッチNラボ飼育9 = = 12)。各箱型図の中央のマークは、中央を示していますボックス 75th百分位数に 25thのデータ、およびひげの端はデータの最大値を最小値から拡張します。
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57711/57711fig4v3.jpg"> 図4:  ラボの重量に及ぼす長期的メンテナンスの比較飼育どちらの性別のハナアブ。データは、人工冬眠で捕われの身で保持時間の関数としてハナアブ重量を表示します。すべてハナアブが私たちのラボ (各データ ポイントで N = 12) と t 中に産んだ卵から飼育した = 0 は蛹の孵化の時間、捕われの身で時間は動物の年齢と同じです。各箱型図の中央のマークは、中央を示していますボックス 75th百分位数に 25thのデータ、およびひげの端はデータの最大値を最小値から拡張します。

手順の全体的な目標は、確立、維持および研究の設定でEristalis テナックスの捕虜の人口を更新することです。

子育てと研究のEristalis テナックスハナアブの長期メンテナンス

With an estimated 6000 species worldwide, hoverflies are ecologically important as alternative pollinators to domesticated honeybees. However, they are ...

これらの手順の全体的な目標は、実験室の設定でEristalis tenaxの飼育下集団を確立、維持、およびリフレッシュすることです。この方法により、ハナアブ、Eristalis tenaxの長期的なメンテナンスが可能になります。ハナアブは、ハエの行動、受粉効率、運動視覚の根底にある神経メカニズムなど、さまざまな科学的問題を調査するための有用なモデルとして浮上しています。ヨーロッパではすでに農業用の大規模な商業育種が行われていますが、科学研究のために飼育個体群を維持するための標準化されたプロトコルはありません。私たちの方法を使用すると、Eristalis tenaxは飼育下で1年以上維持でき、卵と収集された幼虫の両方を飼育して飼育個体群を確立またはリフレッシュすることができます。飼育下のコロニーを開始するには、成虫のハナアブまたは成熟した幼虫のいずれかを収集する必要があります。2番目と3番目の幼虫は、牧場の糞尿ピットでよく発見されています。彼らは蛹になるために暗くて乾燥した環境を積極的に探しているので、彼らは渡りの段階の初めに見つけるのが最も簡単です。これは、湿った糞尿が大量のわらを含む乾燥した領域に近い糞尿ピットの境界近くになる傾向があります。採取した幼虫は、実験室で成虫まで育てることができます。成虫のハナアブは、通常、顕花植物が豊富な植物園や公園から、野外で網を張って収集できます。ハナアブは、花を食べているときや日光浴をしているときなど、静止しているときに捕まえるのが最も簡単です。住宅には、昆虫ケージまたはビニール袋のいずれかを使用する必要があります。これは、収容されているハエの数によって異なります。ハナアブは袋に入れることができるのが20匹未満ですが、20匹を超えるハナアブは昆虫ケージに保管する必要があります。ハエには、湿った綿球の上に置かれた蜂の花粉と蜂蜜の混合物が与えられます。コットンボールを浸し、余分な液体を取り除き、蜂蜜とミツバチの花粉を上に置きます。ビニール袋に収納する場合、綿球は湿っていることが重要ですが、袋内に水が溜まると生存率に悪影響を与える可能性があるため、過度に飽和していないことが重要です。逆に、昆虫ケージに収容する場合、メッシュの側面は大きな蒸発を発生させることができます。そのため、コットンボールは浅い容器に入れることができ、過度の乾燥を防ぐために完全に飽和させる必要があります。ハナアブに室温で最低4時間餌を与えた後、摂氏8〜10度の冷蔵庫に入れ、完全な暗闇に保たれました。この温度範囲は、人工的な冬眠を誘発します。長寿を確保するために、私たちのプロトコルでは、人工冬眠を中断し、ハナアブが餌をやったり毛づくろいをしたりできるようにするなど、厳格なメンテナンスルーチンが必要です。ハナアブは3〜4日ごとに室温に戻され、新しいビニール袋または清潔な昆虫ケージに移され、新鮮な食物と水が提供され、室温で6〜8時間保たれました。これにより、給餌とグルーミングの両方を行うことができました。ハナアブの移動は、ここで示されているように、少数の場合は手動で行うか、多数の場合はフォトタクシーを利用して行われました。この手順は、ハナアブがまだ冬眠状態にあり、取り扱いがはるかに容易になるため、冷蔵庫からハナアブを取り出してから最初の数分以内に行うのが理想的です。Eristalis tenaxの光戦術応答を利用し、多数のハナアブを効率的に移動させるには、まず古いケージを新しい清潔な昆虫ケージに接続し、生鮮食品を準備してケージ内に置きます。2つのケージをクリップで留め、ハナアブが這うのに十分なスペースを確保します。古いケージを不透明な生地で覆い、側面に押し込み、光が入り込まないように注意してください。ハナアブは素早く光に向かって移動し、きれいな昆虫ケージの中に入ります。産卵は、冷蔵庫内で、または給餌時に室温で発生する可能性があります。卵が特定された直後に、水道水を入れた小さなシャーレに卵を入れます。卵は通常、2〜3日かけて孵化します。動きは、新しく孵化した最初の幼虫の間で非常に明白になります。動きは、卵を飼育環境に移す準備ができていることも示しています。孵化した卵は、ウサギの糞便と水のスラリーに移されるべきです。スラリーを作成するには、使用後の廃棄が容易になるように、バケツにビニール袋を敷きます。裏打ちされたバケツをウサギの糞で4分の3満たします。バケツがほぼいっぱいになるまで、残りのスペースに水を注ぎます。スラリーは、混合物がまだ湿っていることを確認するために、2〜3日ごとにチェックする必要があります。混合物が乾燥しているように見える場合は、スラリーに追加の水道水を補充します。木の削りくずで満たされた大きなプラスチック製の浴槽の中にバケツを置きます。木の削りくずはバケツを完全に囲み、縁まで伸びている必要があるため、3番目の幼虫がおがくずに這い込んで蛹になることができます。これで、新しく孵化した最初の幼虫を移す準備が整いました。これが完了したら、幼虫や新しく出現したハナアブが逃げるのを防ぐために、セットアップを二重の蚊帳で覆います。Eristalis tenaxの幼虫は、一般にネズミの尾のウジ虫として知られています。これは、後端に尾のような構造があるためです。これは実際にはサイフォンと呼ばれる特殊な呼吸管です。これは、幼虫が完全に水没したままでも空気を吸うことができるように、体の長さの数倍に伸びることができます。表面を突き刺すサイフォン、または時折上部で餌を食べる幼虫は、スラリー内によく見られます。また、スラリーの一貫性に変化があることにも注意してください。これは、幼虫がウサギの糞便混合物の分解を発達させ、助けたためです。また、3匹目の幼虫がスラリーから出て木の削りくずに這い出して蛹になっているという明らかな兆候も見ることができます。これは、バケツの端に見えるトレイルがたくさんあり、木の削りくずが著しく変色していることから明らかです。これらの変化は、新たに孵化した幼虫がスラリーに入れられてから15〜20日後に見られると予想されます。これらの兆候は、蛹を探し始める時が来たことを示す良い兆候です。バケツを取り外し、木の削りくずをふるいにかけ、蛹を取り除きます。蛹を木の削りくずを入れた乾いた容器に入れ、次に餌と水を入れた昆虫ケージに入れます。蛹化から6〜10日以内に孵化が起こり、新たに出現するハナアブが見られます。孵化すると、翼は完全には機能しません。しかし、数時間以内に翼は広げられて乾きます。ハナアブはまもなく飛行できるようになります。これが起こり、新しく出現した成体が最低6時間の餌やりと手入れをしたら、彼らは食べ物と水のある清潔な住居に入れられ、人工冬眠サイクルを誘発するために冷蔵庫に入れることができます。捕獲された妊娠した雌が産んだ卵を育てる私たちの技術は、3つのバッチの卵を完成させて育てることで成功していることが証明されており、その結果、平均163匹のプラスマイナス33.65匹のハナアブが出現し、性別の偏りは観察されませんでした。次に、これらの実験室で飼育されたハナアブの健康状態は、野外で捕獲された個体と比較した雌のハナアブの体重と自発運動活動の比較によって決定されました。実験室で飼育されたハナアブと野生で捕獲されたハナアブの間で、体重や活動性に有意差は観察されませんでした。さらに、我々が説明した方法を用いた長期維持の効果は、実験室で飼育されたハナアブの雌雄の重量の経時的な比較によってさらに評価された。4ヶ月間で男女ともに体重の大幅な増加が観察され、女性は一貫して男性よりも体重が多かった。私たちは、成虫のハナアブを捕獲して維持することに成功し、牛の農場から成熟した幼虫を収穫し、野生の交配した雌の子孫を育てることにより、視覚研究と行動研究の両方で健康な個体群を維持する3方向の戦略を開発しました。

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