Analysis of AtHIRD11 Intrinsic Disorder and Binding Towards Metal Ions by Capillary Gel Electrophoresis and Affinity Capillary Electrophoresis

Markus Nachbar; Jorrit Maul; Matthias Stein; Hermann W&#228;tzig

doi:10.3791/57749

AtHIRD11 本質的な障害とキャピラリー電気泳動と親和性キャピラリー電気泳動による金属イオンへの結合の...

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Biochemistry

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Analysis of AtHIRD11 Intrinsic Disorder and Binding Towards Metal Ions by Capillary Gel Electrophoresis and Affinity Capillary Electrophoresis

AtHIRD11 本質的な障害とキャピラリー電気泳動と親和性キャピラリー電気泳動による金属イオンへの結合の解析

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07:54 min

August 22, 2018

DOI: 10.3791/57749-v

Markus Nachbar¹, Jorrit Maul¹, Matthias Stein¹, Hermann Wätzig¹

¹Institute of Medicinal and Pharmaceutical Chemistry,TU Braunschweig

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

このプロトコルは、アフィニティキャピラリー電気泳動キャピラリー電気泳動と荷電配位子の高速バインドスクリーニングによる蛋白質のサンプルの特性を兼ね備えています。天然変性タンパク質などの柔軟な構造を持つタンパク質は、異なる conformers のバインドの違いを決定するそれをお勧めします。

この方法は、金属鉄の結合による構造変化など、天然変性タンパク質のテクトニクスに関する重要な質問に答えるのに役立ちます。この手法の主な利点は、必要な機器が非常に少なく、結果が非常に迅速に得られることです。その手順を実演するのは、私の研究室の大学院生であるMatthias Steinです。

まず、ガラスプレート上のガラスカッターを使用して、ポリアミドの外部コーティングと内径50ミクロンの裸の溶融シリカキャピラリーを33センチメートルと30センチメートルの長さに切断します。CGE実験ではキャピラリーの一端から24.5センチメートルの距離、ACE実験ではキャピラリーの一端から21.5センチメートルの距離で、幅1センチメートルの検出ウィンドウの中央をペンでマークします。ブロートーチを使用して、各マークの前後0.5センチメートルでポリアミド外部コーティングを焼き払います。

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