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DOI: 10.3791/57837-v
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ここでは、末梢関連タンパク質の蛍光タグ付きのプラズマ膜協会のレベルの定量的分析を実行するためのプロトコルを提案する.メソッドは、膜の計算の分解、細胞膜蛍光マーカーの付いた信号の細胞質成分に基づいています。
この方法は、細胞シグナル伝達経路の解明など、細胞生物学における重要な疑問に答えるのに役立ちます。したがって、この手法の主な利点は、実際には洗練された顕微鏡的なアプローチを必要としないことです。また、非常に高速であるため、細胞内のタンパク質分布をリアルタイムで観察するために使用できます。
末梢関連タンパク質の膜分配の評価と定量化は、顕微鏡下で原形質膜と細胞質蛍光の混合を引き起こす光回折のために複雑です。この手順は、テキストプロトコルに記載されている生物学的材料の準備から開始します。調製した材料をFM 4-64色素で染色し、研究した材料に適した染色プロトコルを適用します。
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