Characterization of Thymus-dependent and Thymus-independent Immunoglobulin Isotype Responses in Mice Using Enzyme-linked Immunosorbent Assay

Almin I. Lalani; Sining Zhu; Ping Xie

doi:10.3791/57843

酵素抗体法を用いたマウスにおける胸腺依存性および胸腺非依存性免疫グロブリンアイソタイプ反応の評価

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Immunology and Infection

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Characterization of Thymus-dependent and Thymus-independent Immunoglobulin Isotype Responses in Mice Using Enzyme-linked Immunosorbent Assay

酵素抗体法を用いたマウスにおける胸腺依存性および胸腺非依存性免疫グロブリンアイソタイプ反応の評価

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06:15 min

September 7, 2018

DOI: 10.3791/57843-v

Almin I. Lalani¹, Sining Zhu¹, Ping Xie^2,3

¹Department of Cell Biology and Neuroscience and Graduate Program in Cellular and Molecular Pharmacology,Rutgers University, ²Department of Cell Biology and Neuroscience,Rutgers University, ³Rutgers Cancer Institute of New Jersey

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

本稿では elisa 法を用いたマウスの T に依存し、T 独立免疫グロブリン (Ig) アイソタイプを特徴付けるためのプロトコルについて述べる.このメソッドは、単独で使用またはフローと組み合わせてフローサイトメトリーは T に依存し、T 独立した抗原免疫したマウスの B 細胞の Ig アイソタイプ応答の違いを識別するために研究者をできるようになります。

この方法は、抗原免疫によって誘導される依存性および非依存性の抗体応答、ならびにB細胞の活性化および胚中心反応に関する免疫学分野の重要な質問に答えるのに役立ちます。この手法の主な利点は、マウスのB細胞活性化と体液性免疫を直接比較することで、信頼性と定量的なIgアイソタイプ反応測定を提供することです。TNP多糖類の免疫には、マウス1匹あたり1ミリリットルのインスリン注射器に100マイクロリットルの新たに調製した抗原溶液を装填し、下臓器注射を避けるために各動物の右下象限に針を約30度の角度で挿入します。

すべてのマウスを注射したら、動物をケージに戻して、特定の病原体のない施設に収容します。適切な実験時点で、眼窩後出血により免疫した各動物から150〜200マイクロリットルの血液を採取し、サンプルを室温で1〜2時間凝固させます。インキュベーションの終了時に、凝固した血液サンプルを遠心分離し、各血栓の上部から透明な血清を滅菌済みの1.5ミリリットルの微量遠心チューブに移します。

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