Name: イナゴ Palp 触角 Basiconica の単一ゴキブリ録音 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-06-23T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 16 s
Description: 学ぶイナゴの触角Basiconicaからの単一感覚器記録法。タングステン電極を用いて嗅覚ニューロンの応答を測定し、化学受容メカニズムを解明する信頼性の高い手法です。

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この作品は、中国の国家自然科学基金 (No.31472037) からの助成金によってサポートされます。商号またはこの資料の商用製品の一切の言及は特定の情報を提供する目的、勧告とは限りません。

1. 楽器や昆虫の準備
<ol><li>
タングステン電極と刺激のソリューションの準備
	<ol>
<li>マイクロマニピュレーターに新しいタングステン ワイヤ (0.125 mm の直径、長さ 75 mm) を修正し、10 V (40 倍) 顕微鏡の下で約 1 分の電源供給によって提供されるで注射器で 10% (w/v) ナトリウム亜硝酸塩 (ナノ2) ソリューションでそれを磨きます。</li>
		<li>繰り返し 10% ナノ2ソリューション < 1 分 (図 1 a) で 5 V で約 4 mm に削ったタングステンワイヤーを浸しなさい。</li>
		<li>いいイナゴ palp 嗅覚ゴキブリ (図 1 b) のキューティクルに浸透するまで、実体顕微鏡下でよく尖ったタングステン先端の直径を確認します。</li>
		<li>刺激ソリューションを準備します。各鉱物油の化学的刺激物質を希釈します。1-ノナノール、ノナン酸 10% 希釈液で希釈します。E 2 ヘキサナールと 10-510-410-310-2でヘキサナールを希釈します。</li>
		<li>パスツールの刺激を運ぶ管を準備: パスツール チューブ挿入濾紙片 (長さ 2 cm、幅 0.5 cm) 濾紙片に希薄刺激ソリューション (各 10 μ l) を追加して、パスツール ピペット チップ (1 ml) 管を接続します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>
虫を準備します。
	<ol>
<li>60% の相対湿度、28-30 ° C の温度と 18:6 h (光: 暗い) の日長で混雑した条件の下で新鮮な小麦幼植物と後部イナゴ (トノサマバッタ)。選択 1-3 日古い 5thイナゴの幼虫の齢期し、いいハサミを記録するとき、任意の干渉を避けるためにアンテナを取り外します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>
イナゴ上顎 palp ホルダーを準備します。
	<ol>
<li>上顎 palp ホルダー (MPH) の拠点として (25 mm × 75 mm) スライド ガラスを使用します。両面接着テープでスライド ガラスの隅にプラスチック片 (長さ 35 mm、幅 10 mm、高さ 1 mm) を添付し、最後に両面粘着テープでプラスチックの部分の上にカバーガラス (18 mm × 18 mm) を修正します。滑り止め層として、カバーガラスの上に赤いゴム製テープの小片を置きます。プラスチック部分とカバーガラスは、イナゴ palp のプラットフォームを構成します。プラットフォームの高さは約 1.5 mm です。</li>
		<li>1.5 mm 内側に平行の距離でタングステン線 (0.125 mm の直径、長さ 36 mm) をインストール プラットフォームの端。両面粘着テープでプラットフォームにワイヤーの両端を固定します。</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. イナゴ上顎 Palps の準備
<ol><li>遠心分離機管 (1.5 ml) を垂直方向に半分にカットし、底を切り取り。準備管にイナゴを配置します。腹側領域と公開されているローカストの頭を残します。両面粘着テープ (図 2 a) でスライド ガラスにアセンブリを固定します。</li>
	<li>プラットフォームに右側上顎 palp を引き出します。</li>
	<li>Palp の 4 番目のセグメントにタングステン線を置きます。タングステン線、上顎 palp (図 2 aおよび2 b) から約 2 mm の両側に接着パテを配置します。</li>
</ol>3. 単一ゴキブリ録音
<ol><li>低倍率 (100 X) に顕微鏡下でイナゴ上顎 palp 準備を配置します。Palp が記録電極 (図 3 a) に対して垂直になるまでの準備の位置を調整します。</li>
	<li>マニュピュレーターを使用してバッタ目に参照電極 (タングステン電極) を挿入します。マイクロマニピュレーター (図 3 b 3 C) を用いた上顎 palp に近い記録電極 (タングステン電極) を移動します。</li>
	<li>上顎 palp (図 3 b) から約 1 cm に匂いの配信デバイスを調整します。</li>
	<li>自動スパイク 32 記録ソフトウェアを開きます。録音パラメーターを次のように設定: 500 μ V; 記録スケール300 Hz、200 Hz の低カットオフ フィルターの高いカットオフ10 のプレトリガー s。</li>
	<li>普遍的な ac/DC アンプ x 10 に記録電極を接続します。</li>
	<li>スイッチ (500 倍) の高倍率顕微鏡。上顎 palp の basiconic ゴキブリのベースに記録電極を挿入し、繊細な良い自発スパイク (図 3 D) を取得する記録電極を調整します。</li>
	<li>20 ml で連続的なエアー ストリームを配信する刺激コント ローラーを開く/s. 10 1, 記録信号刺激時間を設定開始 10 の刺激パルスの発症前に s。</li>
	<li>10 x の普遍的な ac/DC アンプを使用して、信号を増幅します。加齢医学研究 4 に信号を送ります。自動スパイク 32 ソフトウェア信号を分析します。AC 信号は、バンドパス フィルターの間 200 に 300 Hz。 使用自動スパイク 32 音からピーク ・ トラフ振幅を区別するためにです。自発頻度の活動電位の周波数 (1 秒あたりのスパイク) の増加としてニューロンの応答を計算します。グラフパッド プリズム 7 を使用して統計分析を実行します。</li>
</ol>

<ol><li>Carey, A. F., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insect+olfaction+from+model+systems+to+disease+control%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Insect olfaction from model systems to disease control.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 108 (32), 12987-12995 (2011).</li>
<li>Leal, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odorant+reception+in+insects%3A+roles+of+receptors%2C+binding+proteins%2C+and+degrading+enzymes%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Entomology%22%5BJournal%5D)">Odorant reception in insects: roles of receptors, binding proteins, and degrading enzymes.</a> Annual Review of Entomology. 58, 373-391 (2013).</li>
<li>Zhang, J., Walker, W. B., Wang, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pheromone+reception+in+moths%3A+from+molecules+to+behaviors%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Molecular+Biology+and+Translational+Science%22%5BJournal%5D)">Pheromone reception in moths: from molecules to behaviors.</a> Progress in Molecular Biology and Translational Science. 130, 109-128 (2015).</li>
<li>Vosshall, L. B., Amrein, H., Morozov, P. S., Rzhetsky, A., Axel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+spatial+map+of+olfactory+receptor+expression+in+the+Drosophila+antenna%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">A spatial map of olfactory receptor expression in the Drosophila antenna.</a> Cell. 96 (5), 725-736 (1999).</li>
<li>Benton, R., Vannice, K. S., Gomez-Diaz, C., Vosshall, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variant+ionotropic+glutamate+receptors+as+chemosensory+receptors+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Variant ionotropic glutamate receptors as chemosensory receptors in Drosophila.</a> Cell. 136 (1), 149-162 (2009).</li>
<li>Vosshall, L. B., Stocker, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+architecture+of+smell+and+taste+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Molecular architecture of smell and taste in Drosophila.</a> Annual Review of Neuroscience. 30, 505-533 (2007).</li>
<li>de Bruyne, M., Foster, K., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odor+coding+in+the+Drosophila+antenna%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Odor coding in the Drosophila antenna.</a> Neuron. 30, 537-552 (2001).</li>
<li>Roelofs, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+pheromone+production+and+perception+in+European+corn+borer+moths+is+determined+by+both+autosomal+and+sex-linked+genes%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Sex pheromone production and perception in European corn borer moths is determined by both autosomal and sex-linked genes.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 84 (21), 7585-7589 (1987).</li>
<li>Larsson, M. C., Leal, W. S., Hansson, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+receptor+neurons+detecting+plant+odours+and+male+volatiles+in+Anomala+cuprea+beetles+%28Coleoptera%3A+Scarabaeidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">Olfactory receptor neurons detecting plant odours and male volatiles in Anomala cuprea beetles (Coleoptera: Scarabaeidae).</a> Journal of Insect Physiology. 47 (9), 1065-1076 (2001).</li>
<li>Zhang, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+basis+of+alarm+pheromone+detection+in+aphids%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">Molecular basis of alarm pheromone detection in aphids.</a> Current Biology. 27 (1), 55-61 (2017).</li>
<li>Cui, X., Wu, C., Zhang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+response+patterns+of+16+olfactory+neurons+from+the+trichoid+sensilla+to+odorant+from+fecal+volatiles+in+the+locust%2C+Locusta+migratoria+manilensis%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Insect+Biochemistry+and+Physiology%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological response patterns of 16 olfactory neurons from the trichoid sensilla to odorant from fecal volatiles in the locust, Locusta migratoria manilensis.</a> Archives of Insect Biochemistry and Physiology. 77 (2), 45-57 (2011).</li>
<li>Sharma, K. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cuticular+hydrocarbon+pheromones+for+social+behavior+and+their+coding+in+the+ant+antenna%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Cuticular hydrocarbon pheromones for social behavior and their coding in the ant antenna.</a> Cell Reports. 12 (8), 1261-1271 (2015).</li>
<li>de Bruyne, M., Clyne, P. J., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odor+coding+in+a+model+olfactory+organ%3A+the+Drosophila+maxillary+palp%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Odor coding in a model olfactory organ: the Drosophila maxillary palp.</a> Journal of Neuroscience. 19 (11), 4520-4532 (1999).</li>
<li>Syed, Z., Leal, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maxillary+palps+are+broad+spectrum+odorant+detectors+in+Culex+quinquefasciatus%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Senses%22%5BJournal%5D)">Maxillary palps are broad spectrum odorant detectors in Culex quinquefasciatus.</a> Chemical Senses. 32 (8), 727-738 (2007).</li>
<li>Lu, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odor+coding+in+the+maxillary+palp+of+the+malaria+vector+mosquito+Anopheles+gambiae%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">Odor coding in the maxillary palp of the malaria vector mosquito Anopheles gambiae.</a> Current Biology. 17 (18), 1533-1544 (2007).</li>
<li>Pellegrino, M., Nakagawa, T., Vosshall, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+sensillum+recordings+in+the+insects+Drosophila+melanogaster+and+Anopheles+gambiae%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Single sensillum recordings in the insects Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae.</a> Journal of Visualized Experiments. 36, e1725(2010).</li>
<li>Grant, A. J., Wigton, B. E., Aghajanian, J. G., O'Connell, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+responses+of+receptor+neurons+in+mosquito+maxillary+palp+sensilla+to+carbon+dioxide%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Physiology+A%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological responses of receptor neurons in mosquito maxillary palp sensilla to carbon dioxide.</a> Journal of Comparative Physiology A. 177 (4), 389-396 (1995).</li>
<li>Blaney, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ultrastructure+of+an+olfactory+sensillum+on+the+maxillary+palps+of+Locusta+migratoria+%28L.%29%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+and+Tissue+Research%22%5BJournal%5D)">The ultrastructure of an olfactory sensillum on the maxillary palps of Locusta migratoria (L.).</a> Cell and Tissue Research. 184 (3), 397-409 (1977).</li>
<li>Hassanali, A., Njagi, P. G. N., Bashir, M. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+ecology+of+locusts+and+related+acridids%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Entomology%22%5BJournal%5D)">Chemical ecology of locusts and related acridids.</a> Annual Review of Entomology. 50, 223-245 (2005).</li>
<li>Chapman, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contact+chemoreception+in+feeding+by+phytophagous+insects%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Entomology%22%5BJournal%5D)">Contact chemoreception in feeding by phytophagous insects.</a> Annual Review of Entomology. 48, 455-484 (2003).</li>
<li>Chapman, R. F., Sword, G. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/BF01049149">The importance of palpation in food selection by a polyphagous grasshopper (Orthoptera: Acrididae).</a> Journal of Insect Behavior. 6, 79-91 (1993).</li>
<li>Winstanley, C., Blaney, W. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.1570-7458.1978.tb02839.x/abstract">Chemosensory mechanisms of locusts in relation to feeding.</a> Entomologia Experimentalis et Applicata. 24, 750-758 (1978).</li>
<li>Blaney, W., Duckett, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+significance+of+palpation+by+the+maxillary+palps+of+Locusta+migratoria+%28L.%29%3A+an+electrophysiological+and+behavioural+study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">The significance of palpation by the maxillary palps of Locusta migratoria (L.): an electrophysiological and behavioural study.</a> Journal of Experimental Biology. 63, 701-712 (1975).</li>
<li>Blaney, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+responses+of+the+terminal+sensilla+on+the+maxillary+palps+of+Locusta+migratoria+%28L.%29+to+some+electrolytes+and+non-electrolytes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological responses of the terminal sensilla on the maxillary palps of Locusta migratoria (L.) to some electrolytes and non-electrolytes.</a> Journal of Experimental Biology. 60, 275-293 (1974).</li>
<li>Jin, X., Zhang, S., Zhang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+odorant-binding+and+chemosensory+proteins+and+spatial+map+of+chemosensilla+on+labial+palps+of+Locusta+migratoria+%28Orthoptera%3A+Acrididae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Anthropod+Structure+%26+Development%22%5BJournal%5D)">Expression of odorant-binding and chemosensory proteins and spatial map of chemosensilla on labial palps of Locusta migratoria (Orthoptera: Acrididae).</a> Anthropod Structure & Development. 35 (1), 47-56 (2006).</li>
<li>Zhang, L., Li, H., Zhang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+olfactory+pathways+to+detect+aldehydes+on+locust+mouthpart%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Biological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Two olfactory pathways to detect aldehydes on locust mouthpart.</a> International Journal of Biological Sciences. 13 (6), 759-771 (2017).</li>
<li>Dweck, H. K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+channels+associated+with+the+Drosophila+maxillary+palp+mediate+short-+and+long-range+attraction%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Olfactory channels associated with the Drosophila maxillary palp mediate short- and long-range attraction.</a> eLife. 5, e14925(2016).</li>
<li>Bohbot, J. D., Sparks, J. T., Dickens, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+maxillary+palp+of+Aedes+aegypti%2C+a+model+of+multisensory+Integration%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Biochemistry+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">The maxillary palp of Aedes aegypti, a model of multisensory Integration.</a> Insect Biochemistry and Molecular Biology. 48, 29-39 (2014).</li>
<li>Delventhal, R., Kiely, A., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+recording+from+Drosophila+labellar+taste+sensilla%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological recording from Drosophila labellar taste sensilla.</a> Journal of Visualized Experiments. 84, e51355(2014).</li>
<li>Ng, R., Lin, H. H., Wang, J. W., Su, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+recording+from+Drosophila+trichoid+sensilla+in+response+to+odorants+of+low+volatility%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological recording from Drosophila trichoid sensilla in response to odorants of low volatility.</a> Journal of Visualized Experiments. 125, e56147(2017).</li>
<li>Syed, Z., Leal, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+measurements+from+a+moth+olfactory+system%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological measurements from a moth olfactory system.</a> Journal of Visualized Experiments. 49, e2489(2011).</li>
<li>Saha, D., Leong, K., Katta, N., Raman, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-unit+recording+methods+to+characterize+neural+activity+in+the+locust+%28Schistocerca+Americana%29+olfactory+circuits%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Multi-unit recording methods to characterize neural activity in the locust (Schistocerca Americana) olfactory circuits.</a> Journal of Visualized Experiments. 71, e50139(2013).</li>
<li>Liu, F., Liu, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+single+sensillum+recording+to+detect+olfactory+neuron+responses+of+bed+bugs+to+semiochemicals%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Using single sensillum recording to detect olfactory neuron responses of bed bugs to semiochemicals.</a> Journal of Visualized Experiments. 107, e53337(2016).</li>
</ol>

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昆虫は palps 食べ物のにおいを検出するために依存して、palps スペシエーション13,27で重要な役割を果たすと考えられています。Palps は単純な嗅覚器官であり、脳分子の探査のための魅力的なモデルは、基になるその28をネットワークとして注目を受けています。
昆虫昆虫および palp SSRs 正常に行った、キイロショウジョウバエ、に対する地域のネッタイイエカ13,14,,1516,17ビデオ プレゼンテーション<sup class=...

動物には、外因性化学手掛かりを感じる嗅覚器官の範囲が進化してきました。昆虫で最も重要な嗅覚器官がアンテナと palps です。これらの臓器に嗅覚の触角と呼ばれる、化学感覚毛のいくつかの種類は、毛の嗅覚ニューロン (CSNs) によって支配されています。嗅覚の触角の CSNs 認識中枢神経系1,報2,3 まで転送されるその後の電位に化学的刺激に対するシグナル伝達を介して特定の化学手掛かり.
CSNs エクスプレス様々 な嗅覚受容 [例えば、嗅覚受容体 (ORs)]、イオン型受容体 (IRs) とそのの種類に関連付けられている外因性化学手掛かりをエンコード、膜上の味覚受容体 (GRs)4,5,6。CSNs の特性は、昆虫化学受容の分子・細胞メカニズムの解明への鍵です。蛾8、甲虫9、アブラムシ10, イナゴ11, 単一ゴキブリ記録 (SSR) など多くの昆虫の触角感覚の昆虫 CSNs のキャラクタリゼーション ハエ7のため広く使われている手法ですが、今とアリ12。その触角の特定の構造を作るのでただし、いくつかの研究、SSR 昆虫 palps13,14,15,16,17に適用が、電気生理学的記録困難18。
イナゴ (直翅目) は、しばしば深刻な農作物被害と経済的損失19を引き起こします。Palps はイナゴ20,21,22,23,24の食品の選択に重要な役割を果たすと考えられています。走査型電子顕微鏡 (SEM)、嗅覚の触角の 2 種類を調べた。通常、イナゴ palps18の各ドーム、350 触角 chaetica と 7-8 触角 basiconica を観察します。触角 chaetica が非揮発性化学手掛かりを感じる味覚のワモンゴキブリ触角 basiconica 揮発性化学手掛かりを感知、嗅覚機能があります。
イナゴ palps 触角 basiconica (ca. 12 μ m) の髪ソケットの直径は触角 chaetica のそれらよりはるかに大きい (ca. 8 μ m)18,25。Palps で触角 basiconica のクチクラの壁は触角感覚18のそれよりもはるかに厚いです。さらに、palp のドームは柔軟性の高いキューティクル内流体の内容です。これらの特性は、電極と良好な電気生理学的信号の集録と浸透が触角感覚のよりも難しいという意味します。本稿でビデオ イナゴ palp 触角 basiconica の詳細と非常に効果的な SSR のプロトコルが表示されます。

<table><tbody><tr><td>タングステン ワイヤー</td><td>アドベン</td>ト <td>W559504</td><td>電極を作り、palp</td></tr><tr><td>NaNO2</td><td>Sigma-aldrich</td><td>563218-25G</td><td>タングステン ワイヤーを研ぐために使用され</td></tr>、<tr><td>AC 電源</td><td>Syntech</td><td>A2-70</td><td>タングステン ワイヤーを研ぐ電圧を提供する</td></tr> ステレオ<tr><td>スコープ</td><td>Motic</td><td>SMZ-163</td><td>観察のために使用されますタングステンワイヤーの削り出し</td></tr><tr><td>顕微鏡</td>オ<td>リンパス</td><td>W-51</td><td>イナゴの上顎の手の感性を観察するために使用されます</td></tr><tr><td>インテリジェントデータ収集コントローラ</td><td>Syntech</td><td>IDAC-4</td><td>記録前および記録中のすべての信号の画面上にリアルタイム表示</td></tr><tr><td>刺激コントローラ</td><td>Syntech</td><td>CS-55</td><td>刺激アプリケーションの制御に使用されます</td></tr><tr><td>電子マイクロマニピュレーター</td><td>C.M.D.T</td><td>CFT-8301D</td><td>記録電極のマイナーな動きに使用</td></tr><tr><td>マイクロマニピュレーター</td><td>成重</td><td>MN-151</td><td>基準電極のマイナーな動きに使用</td></tr><tr><td>スピーカー</td><td>EDIFIER</td><td>R101T06</td><td>IDAC-4と接続し、信号に音を供給</td></tr><tr><td>マグネットベース</td><td>PDOK</td><td>PD-101</td><td>電極と刺激送達管の保持に使用</td></tr><tr><td>防振テーブル</td><td>TianHe</td><td>HAP-100-1208</td><td>装置からの振動を分離するために使用</td></tr><tr><td>ガラススライド</td><td>CITOGLAS</td><td>ZBP-407</td> MPHの<td></td></tr><tr><td>Blu-tack</td><td>Bostik</td><td>Blu-tack-45g</td>のベースを作るために使用 <td>タングステンワイヤーを固定</td></tr><tr><td>する パスツールチューブ</td><td>YARE</td><td>WITEG</td><td>刺激刺激液の入った濾紙を置く</td></tr></tbody></table>

イナゴ palp 触角 basiconica の単一ゴキブリ録音

Single Sensillum Recordings for Locust Palp Sensilla Basiconica

イナゴ口器の palps はローカストの食品の選択、特に非揮発性化学手がかり (旧称ターミナル ワモンゴキブリ触角 chaetica の検出のために重要な役割を果たして従来の味覚器官と見なされますまたは紋付き触角)。今増加するこれらの palps も嗅覚機能があること証拠があります。嗅覚受容体 (LmigOR2) と匂い物質結合蛋白質 (LmigOBP1) にローカライズされているニューロンおよびアクセサリー細胞でそれぞれ palps の触角 basiconica。単一のゴキブリ (SSR) の記録は、特定の嗅覚の受容器のアクティブな配位子をスクリーニングするための効果的な方法である嗅覚受容体ニューロンの応答を記録するため使用されます。SSR は palp 触角嗅覚受容体の機能解析に使用されます。Palps のドームにある触角 basiconica の構造は、これらのアンテナの構造からは多少異なります。したがって、匂いによって誘発される SSR を実行すると、いくつか具体的なアドバイスは最適な結果を得るために有用かもしれません。昆虫 palp 触角 basiconica から SSR の詳細と非常に効果的なプロトコルを導入する.

イナゴ上顎 palp 上の 2 つの触角サブタイプ (pb1 ・ pb2) は、化学の匂い (10 %1-ノナノールと 10% ノナン酸) に異なる応答ダイナミクスに基づいて識別されます。Pb1 のニューロンは、1-ノナノール pb2 のニューロン中ノナン酸が大幅 1-ノナノール ノナン酸 (図 4) と比較して少ない活性化よりもはるかに大きなスパイクを生成します。ヘキサナールと E-ヘキサナール応答 (POR)26を開くイナゴ palp を呼び起こすことができます。ヘキサナールは、豊富なホスト植物緑葉揮発性食品ソース26にさらに確認に貢献するかもしれないです。最後 pb1 ニューロンのスパイク pb2 E-ヘキサナール (図 4) によって刺激される彼らの耳より長い。Pb1、pb2 のニューロンを表わす同様に堅牢なレスポンス ヘキサナール (<strong ...

昆虫の口器の palps で単一ゴキブリ触角 basiconica から録音の詳細と非常に効果的なプロトコルについて述べる。

イナゴ Palp 触角 Basiconica の単一ゴキブリ録音

The palps of locust mouthparts are considered to be conventional gustatory organs that play an important role in a locust&#39;s food selection, especially ...

この手順の全体的な目標は、昆虫の触手Sensilla Basiconicaから単一の感覚記録を作成するための詳細で非常に効果的なプロトコルを導入することです。マスターされたので、解剖化学受容分野の重要な質問に答えるのに役立ちます。手のひら感帯に特定の匂い受容体を許容することにより。これの主な利点は、手のひらのイナゴのレコーダーSensilla Basiconiaを使用することです。タングステン電極を調製するには、まず新しいタングステンワイヤーをマイクロマニピュレータに取り付け、40倍の倍率で観察します。次に、注射器を使用して10%亜硝酸ナトリウムを塗布しながら、ワイヤーに10ボルトを供給してワイヤーを研ぎます。次に、電力を5ボルトに下げ、1分以上かけて、鋭利なワイヤーの4ミリメートルを亜硝酸ナトリウム溶液に繰り返し浸します。使用時には、先端がイナゴの触覚嗅覚のキューティクルを貫通するほど細くなければなりません。次に、刺激溶液を準備します。各化学刺激物質を鉱物油で希釈します。鉱油中の1-ノナノールとノナノ酸を10%希釈します。次に、鉱油中のE-2-ヘキセナールとヘキサナールの一連の10倍の段階希釈を行います。次に、刺激をロードしたパスツールチューブを準備します。濾紙ストリップをチューブに挿入し、希釈した刺激溶液10マイクロリットルを濾紙ストリップに加えます。次に、1ミリリットルのピペットチップでチューブを差し込みます。録音から、スライドガラス、プラスチック片、カバースリップ、両面テープとゴムテープからイナゴの上顎触手ホルダーを作ります。両面テープを使用してプラスチック片をスライドの角に取り付け、次に別のテープを使用してカバースリップをプラスチック片に取り付けます。次に、カバーガラスに赤いゴムテープの小片を取り付けて、滑り止めの表面にします。次に、テープを使用して、プラットフォームの内側の端に平行に1.5ミリメートルのタングステンワイヤーを取り付け、ワイヤーの両端をプラットフォームに固定します。これでホルダーは完成です。新鮮な小麦の苗木で、湿度60%、摂氏28〜30度、18時間の光サイクルでイナゴを飼育します。アンテナを収集するには、1日齢から3日齢の5番目のインスターローカストのニンフを選択します。アンテナが録音の邪魔にならないように、細いハサミでアンテナを取り外してください。イナゴを固定するには、1.5ミリメートルのチューブを垂直に1/2に切り込みます。腹側領域とイナゴの頭を露出させたままにします。次に、ローカストとチューブを両面粘着テープでスライドガラスに固定します。次に、右の上顎触子を引き出し、プラットフォームに配置します。タングステンワイヤーを触手の4番目のセグメントに置きます。次に、上顎の触覚から約2ミリメートルのところにタングステンワイヤーを青いタ

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Research

JoVE Journal

Neuroscience

神経科学

臭気物質の嗅覚ニューロンの電気生理学的応答は、単一感覚子記録を使って昆虫で測定することができます。このビデオの記事では、ショウジョウバエの触角の単一感覚子記録を実行する方法を紹介します（...

昆虫における単一感覚子録音キイロショウジョウバエとハマダラカ</em

昆虫の嗅覚システムは、アンテナ上にあるすべての嗅覚受容体の神経細胞（ORNs）から、個々に収容されたものからの応答を加算しているelectroantennograms（EAG）と、単一感覚子記録（SSR）の形で記録嗅覚誘発応答のためのユニークな機会を提供するそれぞれ感覚器、。...

蛾嗅覚系の電気生理学的測定

この記事では、ミネラルオイル下外、先端録音を経由して個々の感覚器に化学的刺激を単離するための電気生理学的方法を説明します。...

スコーピオンペグ感覚器の電気生理学

このビデオでは、生きたショウジョウバエを電気生理学的研究のためにチューブに取り付けています。電極はセンシラムの基部に配置され、ハエの嗅覚受容体ニューロンによるフェロモンに対する特定のニューロン応答を記録します。...

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我々は、無脊椎動物の嗅覚経路の最初の3つの段階で臭気誘発反応を特徴づける細胞外マルチユニット記録技術のバリエーションを示しています。これらの技術は簡単にだけでなく、他の神経系において、アンサンブル活動を調べるために適合させることができます。...

ローカスの神経活動を特徴づけるためにマルチユニット記録方法（<em&gt; Schistocercaアメリカーナ</em&gt;）嗅覚回路

このプロトコルは、 ショウジョウバエにおいてlabellar味覚ニューロンによって発射活動電位応答の細胞外記録を記述する。...

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トコジラミは、触角の嗅覚感覚に収容された嗅覚受容体ニューロンに依存して、環境中の記号化学物質を検出します。シングルセンシラム記録を利用して、セミオケミカルに対するトコジラミの反応を評価する方法を示し、関連するコーディングプロセスを探求します。...

情報化学物質にトコジラミの嗅覚ニューロンの応答を検出するために単一感覚子録音を使用しました

この論文では、ジゴキシゲニン（DIG）標識またはビオチン標識プローブを用いた昆虫アンテナにおいて、特に低レベル発現匂い受容体（OR）遺伝子ならびに他の遺伝子の詳細かつ非常に有効なRNA in situハイブリダイゼーションプロトコルについて記載している。...

Locust AntennaeにおけるRNAによる嗅覚受容体遺伝子の局在<em&gt;現場で</em&gt;ハイブリダイゼーション

このプロトコールの全体的な目標は、長鎖クチクラフェロモンに応答するショウジョウバエの嗅覚受容体ニューロンからの単一感覚記録のための低揮発性の付臭剤を提示する方法を示すことである。...

からの電気生理学的記録<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt;低揮発性の臭気物質に対するトリコイドセンシラ

昆虫センシラの超構造を観察するために、走査電子顕微鏡と透過電子顕微鏡(それぞれSEMおよびTEM)のサンプル調製プロトコルを研究で提示した。TEMでサンプル変形を避けるためにTween...

木管化カブトムシの付属物の走査型および透過型電子顕微鏡の試料調製方法

電気生理学的記録のめったに使用されない方法である塩基記録は、従来の記録方法では調べることができなかった味覚コーディングの特徴を分析することができます。塩基記録により、従来の電気生理学的手法では研究できない疎水性刺激に対する味覚応答の分析も可能になります。...

塩基記録:ショウジョウバエの味覚ニューロン応答解析技術

学ぶイナゴの触角Basiconicaからの単一感覚器記録法。タングステン電極を用いて嗅覚ニューロンの応答を測定し、化学受容メカニズムを解明する信頼性の高い手法です。

イナゴ Palp 触角 Basiconica の単一ゴキブリ録音

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