2019年10月26日
ここでは、外科的鼓膜穿刺による複製導電性難聴誘導を確立するプロトコルを提示し、拍手驚きによる耳鏡可視化と行動評価による検証を行う。
この研究の全体的な目標は、外科的鼓膜穿刺を介して信頼性の高い難聴誘導を確立し、拍手驚かによる内視鏡の視覚化と行動評価による検証を確立することである。私たちの実用目的は、ヒトの聴覚導電性障害のモデルを開発することです。マレウス除去の簡素化である実用的な導電性難聴手術、オトスコープの可視化による導電性難聴を検証する方法、および導電性難聴が発生したことを検証する単純な行動拍子驚起を実証する。
我々が説明した手順の主な利点は、非侵襲的な手順、オトスコープによる導電性難聴の検証、および拍手驚起による検証です。本研究・手続は、動物研究倫理委員会、香港市立大学、香港大学、香港特別行政区保健学科により承認された。現在のプロトコルでは、我々はラットを選択しますが、あなたは任意のげっ歯類を選択することができます。
IP注入のための適切な麻酔を保障するために動物の重量を量る。麻酔の場合、動物が適切な用量を持つことは重要です。あなたのネズミを擦り傷で拾う。
IP注入のためのケタミンとキシラジンのあなたの正しい用量を確認し、注入する。痛みの感覚を確認するためにつま先ピンチを実行することを確認してください。外科用セットアップのためにあなたの麻酔のラット、マイクロシザー、およびあなたのオトスコープで構成される。
手術領域をエタノールで十分に清掃してください。クリーニングされたベンチに外科用カーテンを置きます。その後、あなたのはさみ、オトスコープ、およびラットを導入します。
あなたのはさみの大きさは、あなたのげっ歯類の大きさに依存します。耳鏡の下で、ラットの左右の耳を視覚化して、健康な鼓膜を確保します。らせんをつかみ、外部の耳道を伸ばして、隠れ、黒くなるようにします。
ここでは、マイクロシザーを紹介します。組織をニックしないように細心の注意を払って、耳道の中心にマイクロシザーを導入します。ポップな音を聞いてから、マレウスの変位を確実にするためにひねりを加えます。
成功した導電性難聴手術の確認は、オトスコープで行われるべきです。小径の鏡を用いた耳鏡で手術前後の各ラット耳を評価する。眼鏡で可視化する場合、正常な鼓膜と穿刺された鼓膜の違いを調べるべきである。
ここでは、左側の正常な鼓膜は、マレウの頭部を所定の位置に持ち、右側の穿刺鼓膜とは大幅に異なる。穿刺された鼓膜は、導電性難聴手術の後、マレウを置き換え、パルテンサはマレウスと頭部のウンボで破裂し、頭は完全に欠落している。げっ歯類の術後ケア。
ホームケージにげっ歯類を暖かいランプの下に置き、抗菌剤とブドウ糖を注入します。行動拍子驚きとの結合性難聴を腐食させる。CHLラットは、2つの隣接するケージで正常なラットの隣に置かれます。
これらは静かな部屋に置かれます。半メートル離れたところに立ち、等間隔で特定の回数だけ拍手します。ここでは、5つを選択します。
ここでは、代表的な行動結果です。底部のネズミは大きな拍手音にジャンプしないことに注意してください。画面の上部にあるネズミは、これらの大きな拍手音に驚きます。
この2匹のネズミの拍出の違いの前後を調べてください。導電性難聴を誘発する失敗。導電性難聴を誘発する失敗は、片方または両方の耳の出血によって引き起こされる可能性があります。
そして、この場合、げっ歯類は安楽死させるべきです。これは、はさみが鼓膜と接触しなかったことを示すであろう。プロシージャの間に飛び出さない音。
飛び出さない音は、導電性難聴手順が悪く、きれいではないことを示します。飛び出さない音は、あなたのマイクロシザーが鼓膜と直接接触しなかったことを意味します。オトスコープの視覚化。
もし、もし、内視鏡によって視覚化するとき、鼓膜が正常に見えるならば、これはCHLが起こっていないことを示すであろう。大きな拍手音のテストへの応答。これは、CHLが発生しておらず、げっ歯類が導電性難聴を持たないことを示します。
これは、ネズミがジャンプしたり、大きな拍手音に驚いたりしたときに発生します。我々が説明した手順の主な利点は、非侵襲的な手順、オトスコープによる導電性難聴の検証、および拍手驚起による検証である。実用的な行った後、げっ歯類モデルで導電性難聴を誘発し、この聴覚障害の行動および精神物理学的症状を探ることができる。
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本研究では、外科的な鼓膜穿刺によりげっ歯類に伝音難聴を誘発させる信頼性の高いプロトコルを確立します。耳鏡による可視化と行動評価を用いて難聴の誘発を確認することで、ヒトの伝音性疾患を探索するためのモデルを提供します。
伝音難聴(CHL)の信頼性の高いげっ歯類モデルは、初期段階における聴覚ターゲット探索のリスク軽減や、聴覚障害が行動および神経に及ぼす影響を評価するために不可欠です。本プロトコルでは、CHLの再現性のある誘導および検証を可能にし、聴覚疾患パイプラインにおけるトランスレーショナルリサーチおよび前臨床モデルの開発を支援します。本手法により、疾患に関連するシステムにおける聴覚損失介入の標準化された評価およびメカニズム研究が促進されます。
このCHL誘導および検証プロトコルは、初期探索と前臨床モデル開発の接点に位置し、聴覚研究ポートフォリオにおける堅牢な仮説検証とアッセイの準備を可能にします。