Name: 治療薬物モニタリング同位体希釈高速液体クロマトグラフィー-MS/質量分析法による重要な病気で抗生物質の多重化します。 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-30T15:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 17 s
Description: 学ぶ治療薬物モニタリングのためのHPLC-MS/MS法による抗生物質定量プロトコル。cefepime、meropenem、ciprofloxacinなどの血中濃度測定により、適切な投与量調整と抗菌薬管理を支援します。

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貴重な入力のための博士 Zoller について適切な校正範囲と著者は提案手法を確立する彼の助け博士 Schütze を感謝します。著者はまた質量分析施設の技術的なスタッフを認めます。

<ol><li>Fleischmann, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+Global+Incidence+and+Mortality+of+Hospital-treated+Sepsis.+Current+Estimates+and+Limitations%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+and+Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Assessment of Global Incidence and Mortality of Hospital-treated Sepsis. Current Estimates and Limitations.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 193 (3), 259-272 (2016).</li>
<li>Dellinger, R. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surviving+Sepsis+Campaign%3A+international+guidelines+for+management+of+severe+sepsis+and+septic+shock%2C+2012%5BTitle%5D)+AND+%22Intensive+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Surviving Sepsis Campaign: international guidelines for management of severe sepsis and septic shock, 2012.</a> Intensive Care Medicine. 39 (2), 165-228 (2013).</li>
<li>Lodise, T. P., Drusano, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetics+and+pharmacodynamics%3A+optimal+antimicrobial+therapy+in+the+intensive+care+unit%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care+Clinics%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetics and pharmacodynamics: optimal antimicrobial therapy in the intensive care unit.</a> Critical Care Clinics. 27 (1), 1-18 (2011).</li>
<li>Macedo, R. S., Onita, J. H., Wille, M. P., Furtado, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetics+and+pharmacodynamics+of+antimicrobial+drugs+in+intensive+care+unit+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetics and pharmacodynamics of antimicrobial drugs in intensive care unit patients.</a> Shock. 39, Suppl 1. 24-28 (2013).</li>
<li>Petersson, J., Giske, C. G., Eliasson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standard+dosing+of+piperacillin+and+meropenem+fail+to+achieve+adequate+plasma+concentrations+in+ICU+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Anaesthesiologica+Scandinavica%22%5BJournal%5D)">Standard dosing of piperacillin and meropenem fail to achieve adequate plasma concentrations in ICU patients.</a> Acta Anaesthesiologica Scandinavica. 60 (10), 1425-1436 (2016).</li>
<li>Abdul-Aziz, M. H., Lipman, J., Mouton, J. W., Hope, W. W., Roberts, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applying+pharmacokinetic%2Fpharmacodynamic+principles+in+critically+ill+patients%3A+optimizing+efficacy+and+reducing+resistance+development%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Respiratory+and+Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Applying pharmacokinetic/pharmacodynamic principles in critically ill patients: optimizing efficacy and reducing resistance development.</a> Seminars in Respiratory and Critical Care Medicine. 36 (1), 136-153 (2015).</li>
<li>Imani, S., Buscher, H., Marriott, D., Gentili, S., Sandaradura, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Too+much+of+a+good+thing%3A+a+retrospective+study+of+beta-lactam+concentration-toxicity+relationships%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Antimicrobial+Chemotherapy%22%5BJournal%5D)">Too much of a good thing: a retrospective study of beta-lactam concentration-toxicity relationships.</a> Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 72 (10), 2891-2897 (2017).</li>
<li>Ventola, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+antibiotic+resistance+crisis%3A+part+1%3A+causes+and+threats%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacy+%26+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">The antibiotic resistance crisis: part 1: causes and threats.</a> Pharmacy & Therapeutics. 40 (4), 277-283 (2015).</li>
<li>World Health Organization. Global Action Plan on Antimicrobial Resistance. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://www.who.int/antimicrobial-resistance/global-action-plan/en">http://www.who.int/antimicrobial-resistance/global-action-plan/en</a> (2015).</li>
<li>Pulcini, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibiotic+stewardship%3A+update+and+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Microbiology+and+Infection%22%5BJournal%5D)">Antibiotic stewardship: update and perspectives.</a> Clinical Microbiology and Infection. 23 (11), 791-792 (2017).</li>
<li>Cairns, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+a+multidisciplinary+antimicrobial+stewardship+team+on+the+timeliness+of+antimicrobial+therapy+in+patients+with+positive+blood+cultures%3A+a+randomized+controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Antimicrobial+Chemotherapy%22%5BJournal%5D)">The impact of a multidisciplinary antimicrobial stewardship team on the timeliness of antimicrobial therapy in patients with positive blood cultures: a randomized controlled trial.</a> Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 71 (11), 3276-3283 (2016).</li>
<li>Baur, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+antibiotic+stewardship+on+the+incidence+of+infection+and+colonisation+with+antibiotic-resistant+bacteria+and+Clostridium+difficile+infection%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Effect of antibiotic stewardship on the incidence of infection and colonisation with antibiotic-resistant bacteria and Clostridium difficile infection: a systematic review and meta-analysis.</a> Lancet Infectious Diseases. 17 (9), 990-1001 (2017).</li>
<li>Roberts, J. A., Norris, R., Paterson, D. L., Martin, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+drug+monitoring+of+antimicrobials%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Clinical+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Therapeutic drug monitoring of antimicrobials.</a> British Journal of Clinical Pharmacology. 73 (1), 27-36 (2012).</li>
<li>Paal, M., Zoller, M., Schuster, C., Vogeser, M., Schutze, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+quantification+of+cefepime%2C+meropenem%2C+ciprofloxacin%2C+moxifloxacin%2C+linezolid+and+piperacillin+in+human+serum+using+an+isotope-dilution+HPLC-MS%2FMS+method%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmaceutical+and+Biomedical+Analysis%22%5BJournal%5D)">Simultaneous quantification of cefepime, meropenem, ciprofloxacin, moxifloxacin, linezolid and piperacillin in human serum using an isotope-dilution HPLC-MS/MS method.</a> Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 152, 102-110 (2018).</li>
<li>Vogeser, M., Seger, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pitfalls+associated+with+the+use+of+liquid+chromatography-tandem+mass+spectrometry+in+the+clinical+laboratory%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Pitfalls associated with the use of liquid chromatography-tandem mass spectrometry in the clinical laboratory.</a> Clinical Chemistry. 56 (8), 1234-1244 (2010).</li>
<li>United States Pharmacopeia and National Formulary. Chapter <621>. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22CHROMATOGRAPHY+%28USP+37-NF+32+S1%29%22">CHROMATOGRAPHY (USP 37-NF 32 S1)</a>. , United Book Press, Inc. Baltimore, MD. 6376-6385 (2014).</li>
<li>Wong, G., Sime, F. B., Lipman, J., Roberts, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+do+we+use+therapeutic+drug+monitoring+to+improve+outcomes+from+severe+infections+in+critically+ill+patients%3F%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">How do we use therapeutic drug monitoring to improve outcomes from severe infections in critically ill patients?</a> BMC Infectious Diseases. 14, 288(2014).</li>
<li>EUCAST: European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing. Information on clinical breakpoint tables. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://www.eucast.org/clinical_breakpoints/">http://www.eucast.org/clinical_breakpoints/</a> (2017).</li>
<li>Surveillance der Antibiotika-anwendung und der bakteriellen Resistenzen auf Intensivstationen. SARI information for antibiotic consumption 2016 of all intensive care units participating at SARI. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://sari.eu-burden.info/auswertung/down/AD-ZEIT.pdf">http://sari.eu-burden.info/auswertung/down/AD-ZEIT.pdf</a> (2016).</li>
<li>Cefepime hydrochloride: Highlights of prescribing information. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/Label/2016/050679s040lbl.pdf">https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/Label/2016/050679s040lbl.pdf</a> (2016).</li>
<li>Meropenem: Highlights of prescribing information. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/Label/2008/050706s022lbl.pdf">https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/Label/2008/050706s022lbl.pdf</a> (2006).</li>
<li>Ciprofloxacin hydrochloride: Highlights of prescribing information. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/Label/2016/019537s086lbl.pdf">https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/Label/2016/019537s086lbl.pdf</a> (2016).</li>
<li>Moxifloxacin hydrochloride: Highlights of prescribing information. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/Label/2010/021277s038lbl.pdf">https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/Label/2010/021277s038lbl.pdf</a> (2010).</li>
<li>Linezolid: Highlights of prescribing information. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/Label/2012/021130s028lbl.pdf">https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/Label/2012/021130s028lbl.pdf</a> (2011).</li>
<li>Piperacillin and Tazobactam: Highlighs of prescribing information. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/Label/2017/050684s88s89s90_050750s37s38s39lbl.pdf">https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/Label/2017/050684s88s89s90_050750s37s38s39lbl.pdf</a> (2017).</li>
<li>Zander, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+biobanking+conditions+on+six+antibiotic+substances+in+human+serum+assessed+by+a+novel+evaluation+protocol%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Chemistry+and+Laboratory%22%5BJournal%5D)">Effects of biobanking conditions on six antibiotic substances in human serum assessed by a novel evaluation protocol.</a> Clinical Chemistry and Laboratory. 54 (2), 265-274 (2016).</li>
<li>Zander, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+piperacillin%2C+tazobactam%2C+cefepime%2C+meropenem%2C+ciprofloxacin+and+linezolid+in+serum+using+an+isotope+dilution+UHPLC-MS%2FMS+method+with+semi-automated+sample+preparation%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Chemistry+and+Laboratory%22%5BJournal%5D)">Quantification of piperacillin, tazobactam, cefepime, meropenem, ciprofloxacin and linezolid in serum using an isotope dilution UHPLC-MS/MS method with semi-automated sample preparation.</a> Clinical Chemistry and Laboratory. 53 (5), 781-791 (2015).</li>
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著者が明らかに何もありません。

本稿で報告する ICU の19セフェピム、メロペネム、シプロフロキサシン, モキシフロキサシン、リネゾリドの頻繁に使用される抗生物質の定量化のためのシンプルで堅牢なタンデム質量分析を用いた方法のためのプロトコルとピペラシリン14。スプレッドシートは、抗生物質の純度と、ポリマーの分子量を考慮して、品質管理、キャリブレータ、抗生の貯蔵液の準備のため原稿を伴います。抗生物質の濃度はかなり高いが、その定量化の分析の観点から特定の課題必要がありますできません。したがって、このプロトコルはさまざまな MS 機器プラットフォームに適用できると確信しております。メソッドの転送でユーザーは余分な列ボリュームを定量化することをお勧めし、ホールド アップ ボリューム ガスクロマト グラフ システムのグラデーションの開始に合わせて時間に応じて16。方法セットアップ中にシステムは、キャリー オーバーの評価すべきし、抗生物質濃度が高い最高のキャリブレータと患者のサンプルの後必要に応じて、空白のサンプルを組み込む必要がありま...

抗生物質は、医学の実践に革命をもたらしたが重篤な細菌感染症罹患率と重大な病気の1の死亡率の主要な原因のまま。この点で、適切な用量で適切な対策のプロンプトの管理は病気制御2の最重要です。
証拠の成長するボディは、広域スペクトル抗生物質による経験的治療が患者集団は複雑な問題がより深刻になっているを示します。これは集中治療室 (ICU)、特に重要な薬物動態 (PK) パラメーターの途方もない個体間変動はよく3,4を観察しました。したがって、ICU 患者不足治療成功5,6の危険とサブ治療レベルの差し迫った危険があります。再度、患者は臨床的利点7で重篤な有害事象があります過度の抗生物質濃度に不必要に公開されます。抗生物質の誤用と不十分な投与の両方はまた公衆衛生8に増え脅威となりつつある抗生の抵抗の普及を煽っています。
抗生物質の使用を改善するために、彼らの effectivenessas を維持するためには、可能な限り世界保健機関は 2015年9抗菌剤耐性に関する地球的行動計画を立ち上げた。抗菌薬の管理プログラムは、国立公衆衛生戦略10臨床医が患者ケア11のと同時に品質の大幅向上を支援に慎重な抗菌薬使用の本質的な基礎を構成します。12抗生物質耐性を削減します。抗菌治療薬のアプリケーションを通じて個々 の患者の投薬モニタリング (TDM) はこのコンテキスト13キー楽器です。
までに、市販の TDM アッセイ、糖ペプチド抗生物質やアミノグリコシド系抗生物質の利用のみ。他のクラスの物質の定量化は、社内法の開発や検証が面倒なことに通常必要です。、したがって、提案の詳細、臨床関連性の高い濃度の範囲14内 ICU で最も関連性の高い抗生物質の定量化のために使用できる堅牢な質量分析を用いた試金のためのプロトコル。メソッドは、最近私たちの質量分析施設で確立されたし、以来 ICU における TDM のルーチンに適用されています。手順は、質量分析機能を備えた多くの施設における抗菌薬の TDM の迅速な実装を可能にする均一サンプル クリーンアップ簡単解析設定を使用します。
ここで説明されているプロトコルはセフェピム、メロペネム、シプロフロキサシン, モキシフロキサシン、リネゾリドのタンデムとの組み合わせで同位体希釈液体クロマトグラフィー (LC) を用いる血清中ピペラシリンの定量化のために最適化された質量分析 (MS/MS)。同位体希釈 - LC/MS MS 方法論、安定同位体標識化合物が特定のマトリックス (例えば血清) と利子のサンプルに追加されます。同位体標識の基準は、そのラベルのない相手、すなわち天然分子と親イオン-娘イオン転移と呼ばれる、その断片化製品の異なる分子量のための興味の analyte と区別できます。同位体標識化合物があると比べて、そのラベルのないほぼ同じ全体的な物理化学的現象は、彼らがの高度でほぼ行列に依存しない試料の定量を許可する MS/MS の理想的な社内基準精度15。最近では、市販されている多く安定同位体標識内部標準小分子の定量化, 抗菌薬の TDM を含めて使用することができます。
分析 C8 アルキル鎖長逆相カラム (100 mm x 2.1 mm、3 μ m 粒子径) と抗生物質の分析記述プロトコルにクロマト グラフの分離が実行されます。メソッド開発時にすべての検体の内部標準正規化行列因子は 94.6%、105.4%、≤8.314の変動係数との間でした。

<table><tbody><tr><td>セフェピム塩酸塩</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1097636</td><td>USP 参照 標準</td></tr>物質 <tr><td>メロペネム三水和物</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Y0001252</td><td>EP 標準</td></tr><tr><td>シプロフロキサシン</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>17850</td><td></td></tr><tr><td>モキシフロキサシン塩酸塩</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>SML1581</td><td></td></tr><tr><td>linezolid</td><td>トロント研究化学薬品</td><td></td><td></td>L466500</tr><tr><td>ピペラシリンナトリウム塩</td><td>シグマアルドリッチ</td><td>93129</td><td></td></tr>セ<tr><td>フェピム-13C12D3硫酸アル</td><td>サキム</td><td>C1297</td><td>同位体は、セフェピム</td></tr><tr><td>メロペネム-D6</td>トロント<td>研究化学M225617</td><td></td>メロペネムシプロフロキサシン-D8トロント研究化学薬品のための<td>同位体ラベル内部標準の内部標準</td></tr><tr><td></td><td></td><td>C482501</td><td>シプロフロキサシンの同位体標識内部標準</td></tr><tr><td>モキシフロキサシン-13C1D3塩酸塩</td><td>トロント研究化学物質</td><td>M745003</td><td>同位体標識モキシフロキサシンの内部標準 リネゾロキサ</td></tr><tr><td>シン-D3</td><td>トロント研究化学物質</td><td>L466502</td><td>同位体標識リネゾリ</td></tr><tr><td>ドピペラシリン-D5</td>の内部標準 <td>トロント研究化学物質</td><td>P479952</td><td>同位体標識内部ピペラシリン</td></tr><tr><td>メタノール</td>の標準 <td>JTベイカー</td><td>8402</td><td></td></tr><tr><td>HPLCグレードの水</td><td>JTベイ</td><td>カー4218</td><td></td></tr><tr><td>ギ酸</td><td>バイオソルブ</td><td>6914132</td><td></td></tr><tr><td>酢酸</td><td>バイオソルブ</td><td>1070501</td><td></td></tr><tr><td>ギ酸アンモニウム</td><td>シグマ-アルドリッチ</td><td>70221-25G-F</td><td></td></tr><tr><td>tert-ブチルメチルエーテル</td><td>メルク</td><td>101845</td><td></td></tr><tr><td>フォルティス3 &mu;m C8 100 * 2.1 mm</td><td>Fortis</td><td>F08-020503</td><td></td></tr><tr><td>Ti-PEEK包み込みプリフィルター(2 &mu;m)</td><td>Chromsystems</td><td>15011</td><td></td></tr><tr><td>2795 Alliance HPLCシステム</td><td>Waters</td><td>176000491</td><td></td></tr><tr><td>Quattro micro API タンデム四重極システム</td><td>Waters</td><td>720000338</td><td></td></tr><tr><td>QuanLynx 4.1ソフトウェア</td><td>Waters</td><td>/</td><td>Data 評価ソフトウェア 質量分析計メーカー提供</td></tr><tr><td>Supplemental File</td><td></td><td></td><td>Stock Solutions</td></tr></tbody></table>

治療薬物モニタリング同位体希釈高速液体クロマトグラフィー-ms/質量分析法による重要な病気で抗生物質の多重化します。

Multiplex Therapeutic Drug Monitoring by Isotope-dilution HPLC-MS/MS of Antibiotics in Critical Illnesses

特に病院抗菌薬の管理プログラムの実施に関し、多くの臨床施設における抗生物質の治療薬物モニタリングのためにますます需要があります。
現在の仕事で提案するセフェピム、メロペネム、シプロフロキサシン, モキシフロキサシン、リネゾリド、ピペラシリン、一般的に使用されるの定量化のための多重化、高性能液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析 (hpcl ペ ・ MS/MS) プロトコル集中治療室における抗生物質。メソッドは、欧州医薬品庁のガイドラインによると総合的に検証以前されました。
急速なサンプルのクリーンアップ後、検体を 4 分以内 C8 逆相 HPLC カラムに分離して対応する安定同位体標識内部基準に複数反応におけるエレクトロ スプレー イオン化 (ESI +) 質量分析法で定量時間 (MRM) を監視します。提案手法は、制服のクロマト グラフ条件設定、臨床検査の毎日で堅牢な抗生物質薬剤モニタリングを可能にする単純なインストルメンテーションを使用してください。検量線にまたがる感受性菌と、食塊が得られるピーク濃度 (Cmax) の最小発育阻止濃度 (MIC) に近い抗生物質の量を含む薬物濃度範囲投与レジメン。サンプルのクリーンアップ前に、血清の希釈の必要のない複数の測定値を投与した抗生物質の曲線下面積が得られます。

記述のプロトコルを使用して、典型的なクロマト グラムは図 2で描かれています。米国薬局方 (USP) クロマトグラフィーのガイドライン16によると現在のシステムで列のデッド ボリュームが ~0.22 mL ~0.08 ml、余分な列ボリューム (インジェクター、チューブ、コネクタを含む) と決定されたこと~0.30 mL のホールド アップ量。すべての検体の計算された保持因子であった (用セフェピム) - 2.8 4.2 (ピペラシリン) のため。
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58148/58148fig2.jpg"> 図 2: 正規化された信号強度を持つ典型的な分析クロマト。抗生物質は次の順序で溶出性: セフェピム ...

ここで集中治療室、すなわちセフェピム、メロペネム、シプロフロキサシン, モキシフロキサシン, リネゾリドのピペラシリンで頻繁に使用される抗生物質の定量化のためのタンデム質量分析を用いたプロトコルを提案する.

治療薬物モニタリング同位体希釈高速液体クロマトグラフィー-MS/質量分析法による重要な病気で抗生物質の多重化します。

There is an ever-increasing demand for the therapeutic drug monitoring of antibiotics in many clinical facilities, particularly with regard to the ...

抗生物質の治療薬モニタリングは、国や地域の抗菌薬適正使用プログラムの実施における重要な要素としてますます認識されるようになっています。医療施設における抗生物質治療薬モニタリングのこの高まる需要を満たすために、私たちは、関与する病原体の感受性に投与量を調整することを目的とした、循環中の抗生物質の定量化のためのプロトコルを提示します。提示された質量分析ベースのプロトコルは、集中治療室で最も一般的に使用される抗生物質、すなわちセフェピム、メロペネム、シプロフロキサシン、モキシフロキサシン、リネゾリド、ピペラシリンの定量に最適化されています。キャリブレーション範囲が広いため、この方法は、投与された抗生物質の曲線下薬物動態面積を計算するためにも使用できます。合計所要時間は約30分で、提示されたプロトコルは、臨床検査室での日常的な抗生物質治療薬のモニタリングに適しています。まず、9容量の薬物を含まない血清を、あらかじめ調製した10倍濃縮スパイク溶液1容量でスパイクし、血清キャリブレーター0〜7および品質管理A〜D.例えば、10ミリリットルのポリプロピレンチューブ内の4.5ミリリットルの血清に0.5ミリリットルのスパイク溶液を加え、50rpmのローラーミキサーで摂氏4度で15分間インキュベートします。反復ピペットを使用して、1.5ミリリットルのポリプロピレンチューブ内のキャリブレーターと品質管理の100マイクロリットルのアリコートを生成します。キャリブレーター、品質管理、および以前に調製した抗生物質ストック溶液は、摂氏マイナス80度で最大6か月間保管してください。6つの内部標準ストック溶液を調製した後、それらを1.5 mLポリプロピレンチューブに混合して、5倍濃縮の内部標準混合物を得ます。所望の内部標準を965マイクロリットルの25%メタノール水に添加します。内部標準ストック溶液と5倍濃縮した内部標準混合物をマイナス80°Cで保存します。移動相Aを調製するには、約500ミリリットルのHPLCグレードの水を1, 000ミリリットルの容量フラスコに加えます。1ミリリットルのギ酸、10ミリリットルの1モルギ酸アンモニウムを加え、フラスコを1, 000ミリリットルにHPLCグレードの水で満たします。次に、移動相溶液をきれいなガラス瓶に移します。移動相 B を調製するには、HPLC グレードの無水メタノールを清潔なガラスボトルに加えます。パージ溶媒を調製するには、約500ミリリットルの蒸留水を1, 000ミリリットルのメスフラスコに加えます。70ミリリットルの無水メタノール、1ミリリットルのギ酸を加え、フラスコを蒸留水で1, 000ミリリットルに満たします。溶剤をきれいなガラス瓶に移します。移動相AおよびBのボトルとパージ溶媒をHPLCシステムに接続します。ニードルウォッシュ溶媒チ

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非標的メタボロミクスは、代謝プロファイルのスナップショットを生成する仮説を提供します。このプロトコルは、細胞、血清、または組織からの代謝物の抽出と分析を紹介します。代謝物の範囲は、液 -...

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液体クロマトグラフィーによるイオン移動 QTOF 質量分析法によるタンパク質のバイオ医薬品の宿主細胞蛋白質の定量化のための HS MRM アッセイ

組み合わせ前駆同位体標識およびアイソバリックタグ（cPILOT）は、アイソバリックタグのサンプル多重化機能を強化し、定量プロテオミクス戦略です。このプロトコルは、アルツハイマー病のモデルマウスと野生型対照からの組織へのcPILOTの適用を説明しています。...

拡張サンプル複合前駆同位体標識と同重体タグ付けを使用して組織の多重化（cPILOT）

このプロトコルは、サンプル抽出の効率的かつ便利な分析プロセスと心肺毒性 DOX 代謝物、生物学的に doxorubicinol (DOXol)、マイトマイシン C (MMC)、ドキソルビシン (DOX)...

サンプル抽出、ドキソルビシン、マイトマイシン C 以下の組み合わせへのドラッグデリバリー ナノ粒子の担癌マウスの同時のガスクロマトグラフィーによる定量

正確に高分解能質量分析計を接続した液体クロマトグラフィーによる定圧ラベリング、広範な分別、バイオインフォマティクス...

定圧ラベリング、豊富な液体クロマトグラフィー、質量分析法、およびソフトウェアによる定量化して深いプロテオームをプロファイリング

ここでは、結核の肉芽腫内の薬剤分布の定量化が空間的に LC/MS 分析と相まってマイクロダイゼクション...

レーザーによる肺の結核病変における薬物の空間の定量化をキャプチャ レーザーマイクロダイ セクション液体クロマトグラフィー質量分析法 (LCM-LC/MS)

マルチ セグメントの注入キャピラリー電気泳動質量分析法による高スループットかつ包括的な薬物監視

前駆体同位体標識とアイソバリックタグ(cPILOT)は、利用可能なアイソバリックタグで同時に分析できるサンプル数を増やすことができる、強化されたサンプル多重化戦略です。ロボットプラットフォームの組み込みにより、実験のスループット、再現性、定量的精度が大幅に向上しました。...

組み合わせ前駆体等位同位体ラベリングとアイソバリックタギング(cPILOT)を使用した自動サンプル多重化

核磁気共鳴(NMR)分光法は、さまざまな疾患を持つ患者の代謝産物の調節不全を特定するために使用されます。この技術により、乱れた代謝物の定量化が可能になり、病態生理学的な洞察が解き明かされます。ここでは、患者の代謝特性評価のためのNMRベースのアプローチの段階的な手順について説明します。...

NMRベースのメタボロミクスを用いた重症患者における代謝異常物の同定と定量

学ぶ治療薬物モニタリングのためのHPLC-MS/MS法による抗生物質定量プロトコル。cefepime、meropenem、ciprofloxacinなどの血中濃度測定により、適切な投与量調整と抗菌薬管理を支援します。

治療薬物モニタリング同位体希釈高速液体クロマトグラフィー-MS/質量分析法による重要な病気で抗生物質の多重化します。

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