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DOI: 10.3791/58176-v
Weikun Xiao1, Arshia Ehsanipour1, Alireza Sohrabi1, Stephanie K. Seidlits2
1Department of Bioengineering,University of California, Los Angeles, 2Department of Bioengineering, Jonsson Comprehensive Cancer Center, Broad Stem Cell Research Center, Brain Research Institute,University of California, Los Angeles
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
ここでは、脳マトリックスを模倣するように設計された直交可変生体内神経膠芽腫患者由来細胞の三次元培養のためのプロトコルを提案する.このアプローチは、生体外で、通常文化で失われた神経膠芽腫細胞体内の多くの特徴を維持する実験のプラットフォームを提供します。
この方法は、膠芽腫腫瘍に関する重要な疑問や、細胞外マトリックスが治療抵抗性をどのように促進できるかについての答えを出すのに役立ちます。この技術により、適応性のある3D細胞培養プラットフォームのモジュール構築が可能になり、ネイティブの脳により近い環境で患者由来の膠芽腫細胞を培養するために使用できます。まず、清潔で乾燥したシリコーンゴム型を非組織培養処理済み12ウェルプレートの各ウェルに置き、ピペットチップの清潔な鈍い端を使用して型をプレートの底に接着します。
型と井戸底との間のシールを確認した後、解離した神経膠腫球を膠芽腫細胞培養物から遠心分離により回収し、ペレットを1ミリリットルの細胞解離酵素に再懸濁します。室温で5分後、チューブを優しく叩いて撹拌し、4ミリリットルの完全培地で酵素反応を停止します。細胞を再度遠心分離し、ペレットを1ミリリットルの新鮮な完全培地に再懸濁してから、70マイクロメートルのフィルターで細胞を濾します。
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