マウスで無快感を誘導するため予測不可能な慢性的な軽度ストレス プロトコル

この技術の主な利点は、うつ病の病因、病因、および治療に関係する主要な神経生物学的および行動特徴を適切に翻訳することです。この方法は、不安やうつ病の病態生理学を理解する上で重要な質問に答え、新しい薬理学的治療の開発を促進するのに役立ちます。この技術の意味は、うつ病の治療にも及び、ヒト患者に明らかな長引く寛解の経過に似た潜在的な抗うつ薬のスクリーニングを可能にするためである。

新鮮なおがくずで家のケージを充填し、豊かさのために綿毛を追加することで始めます。1週間の非難期間のために家のケージに動物を収容し、一貫した12時間の明暗サイクルを保ちます。げっ歯類のチョウと水へのアドリビタムアクセスを許可します。

7つのストレッサーのそれぞれが週に1回、毎週異なる日に利用される4週間のストレッサーレジメンを設計します。1週間の非難の後、UCMS室の4週齢のマウスにストレッサーの適用を開始する。最初のストレータの場合は、マウスをホームケージの相手と一緒に空のケージに入れます。

空のケージに24プラスマイナス1度の水を1センチメートルの深さまで満たし、マウスを濡れたケージに4時間入れておきます。その後、各マウスを、その上にヒートランプ、その下の暖房パッド、ペーパータオル寝具を備えた別々の個々の一時的な乾燥ケージに移します。温度計を過渡ケージに入れ、温度が摂氏37度を超えていないかどうかを確認します。

乾燥して活性化しそうになるまで一過性ケージに各マウスを保管し、マウスを同じ相手と一緒にホームケージに戻します。湿ったおがくずの場合、おがくずが適度に湿るまで、貧しい水は24プラスマイナス1度で家庭のケージに入れ続けました。4時間後、マウスを一過性ケージで乾燥させます。

その後、ホームケージの対応するマウスを新鮮なおがくずと一緒に滅菌ケージに入れます。次のストレータの場合は、ケージを壁に対して45度傾けます。空のケージの場合は、5匹のマウスと特定のホームケージの対応するマウスをすべてホームケージから空のケージに4時間移します。

5番目のストレータの場合、マウスをホームケージから、ストレータ適用の少なくとも3日前に別のマウスグループによって収容されたケージに特定のホームケージと一緒に移動させる。マウスを不慣れなケージに4時間保管してください。6番目のストリッサーの場合は、各マウスを別々に清潔なマウスの抑制剤に4時間置きます。

その後、マウスを同じ相手と一緒にホームケージに戻します。最後のストレータの場合は、ホームケージ内のマウスを特定の相手と共にUCMS室に移します。24時間連続してライトを点灯してください。

最後に、ストリッサー塗布後、UCMSグループのケージをUCMS室からハウジングルームに戻す。ストレス暴露の4週間の間に、住宅室に位置する彼らのホームケージにナイーブグループを保ちます。UCMSプロトコルの停止後の日に、推定治療薬理学的薬剤の投与を開始する。

処理段階の後、ホームケージから各マウスを取り出し、新鮮なおがくずと綿毛で満たされたケージに個別に入れて濃縮します。その後、蒸留水で1本、2%スクロース溶液で2本を調製します。2本のボトルの重さを量り、ケージの蓋の両端にセットし、2つのボトルの間にげっ歯類のチャウを置き、マウスが24時間、48本、72本、または144時間の間、溶液と食品の両方にアクセスできるようにします。

12時間後、または試験期間が24時間を超える場合は1日1回、ボトルの重量を量って各ボトルからの消費量を推定し、ノズルの位置を切り替えて、結果が位置の好みによって混乱した可能性を相殺する。最後に、ボトルの重量を毎日測定して、各ボトルの消費量を見積もります。UCMSグループは、ナイーブ群と比較してショ糖の好みが減少したことを示し、UCMSプロトコルがアンヘドニアを誘導するのに有効であることを示唆した。

さらに、UCMSグループは、ナイーブ群と比較して海馬BDNFレベルの低下を示し、UCMSプロトコルがヒトうつ病に明らかな海馬BDNFレベルの減少につながったことを示唆した。結果は、UCMS生理食糸群がナイーブ生理食肉群と比較してスクロースの好みが有意に減少したことを示し、UCMSエスシタロプラム群およびUCMSNHT群の両方と比較して、エスシタロプラムとNHTの両方がUCMS誘導アンヘドニアを正常化したことを示唆した。さらに、UCMS生理食糸群は、ナイーブ生理食肉群と比較して海馬BDNFレベルの低下を示し、UCMSエスシタロプラム群およびUCMS NHT群の両方と比較して、エスシタロプラムおよびNHTの両方が海馬におけるBDNFレベルのUCMS誘導減少を正常化したことを示唆した。

この手順に従って、尾の懸濁液試験、強制水泳テスト、および上昇プラス迷路のような他の方法を行うことができる。これらのテストは、行動の絶望だけでなく、行動のような探索的および不安を評価するために使用されます。