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DOI: 10.3791/58244-v
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アルボ ウイルス複製とアルボ ウイルス複製を制限する 2) 真核生物の宿主因子を促進する免疫調整物質 1) ウイルス エンコードを識別するためにプロトコルを紹介します。これら蛍光や発光を用いる方法は、急速に量的な読み出し信号対雑音比の低い単純なアッセイのアルボ ウイルス複製を取得する研究者を許可します。
この方法は、どの宿主因子がアルボウイルスの複製を制限するのか、ひいてはどのウイルスにコードされた免疫回避タンパク質がこれらの宿主制限メカニズムを克服するのかなど、ウイルス免疫学の分野における重要な疑問に答えるのに役立ちます。この技術の主な利点は、単純な発光および蛍光空間アッセイを使用して、鱗翅目昆虫細胞の失敗にアルボウイルスが複製することを可能にする細胞条件を定義できることです。鱗翅目細胞におけるアルボウイルスのバックグラウンド複製は最小限であるため、アルボウイルスの複製を可能にする条件を検出することは比較的容易になります。
まず、LD652細胞を10cmの組織培養皿に保持し、80%のコンフルエント度に達したら細胞を継代します。培地を細胞単層に繰り返しピペットで移し、細胞を取り除いた後、増殖培地でサンプルを約10万細胞/ミリリットルの密度に希釈します。この後、希釈した培養物1ミリリットルを24ウェルプレートの各ウェルに移します。
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