2019年1月7日
ここでは、うつ病マウスモデルを確立し、慢性的な予期しない穏やかなストレス (CUMS) に関連付けられている動作の変更を観察 Xiaoyaosan の抗うつ効果の評価プロトコルを提案します。
この方法は、中国の何千年もの間、心理疾患で広く使用されている製剤であるXiaoyaosanのような伝統的な中国医学を使用して、うつ病、予防および治療の分野で重要な質問に答えることができます。この技術の主な利点は、うつ病の予防と治療におけるXiaoyaoanの可用性のための実験的なサポートを提供することです。この技術の意味は、伝統的な中国医学を使用して抗うつ効果を感知するための標準化されたプロトコルを提供するため、うつ病の治療に関するプレクリニック研究にまで及ぶ。
一般的に、この方法に新しい個人は、モデリングプロセスが非常に複雑であり、抑うつ行動のための重要な測定パラメータを習得することは容易ではないので、苦労します。うつ病を誘発するために、21日間連続して、次の7つのストレータのうちの任意の2に毎日マウスを曝露する。なお、モデリング前に2つの治療群のマウスに薬を毎日投与し、コントロール群およびモデル群のマウスに0.5ミリリットルの蒸留水を提供する。
各ケージの飼料を空にしてマウスを食物欠乏にさらします。または24時間水筒を取り除くことによって水の剥奪。マウスを拘束ストレスにさらし、そこでマウスは小さなプラスチック製の浴槽で3時間拘束されます。
またはパディングを取り外した空のケージ。別のオプションとして、各ケージに水を注ぎ、24時間濡れた状態に保つことによって、マウスを濡れた汚れたケージにさらします。5匹のマウスを1つのケージに25時間置く混雑したケージにマウスを曝します。
最後のオプションでは、各マウスを氷水で透明なガラスの水族館で5分間泳ぐことによって、マウスを氷冷水泳にさらします。最後に、21日目のモデル終了まで毎週コート状態と体重を記録し、コート状態の合計スコアを算出する。ショ糖の選好テストの最初の2日間に、蛇口水で満たされた2本のボトルでマウスを個別に収容します。
次の2日間、マウスに1%スクロース溶液で満たされた2本のボトルを与える。最終日には、マウスに2本のボトルを24時間与え、1本は水道水、もう1本は1%スクロース溶液を使用します。飲酒行動におけるマウスの側の好みを排除するために、12時間後に2本のボトルの位置を切り替える。
消費されたスクロース溶液と水道水の両方の体積を記録します。最後に、スクロースの好みを計算します。4つの面付きの木製の黒い光沢のない箱の床を青い線で25の等しい正方形に分割することから始めます。
開いているフィールドボックスを、各マウスにアクセスする前に5%アルコールで掃除してください。次に、開いているフィールドの中央にマウスを置きます。フィールドのすぐ上に約200センチメートルの高精細デジタルカメラをサスペンドし、各マウスの動作を5分間記録します。
最後に、ビデオトラッキングシステムソフトウェアによるマウスの行動ビデオを評価して分析し、合計走行距離と中央ゾーンへのエントリ数のデータを記録します。マウスのコート状態は、モデル群と比較してシャオヤオサンまたはフルオキセチンによる連続処理後に顕著に改善された。体重の有意な減少は、第3週までに明らかになった。
ベースラインでは、すべての群のマウスは同様のショ糖好みを持っていた。しかし、モデル群における3週間の応力処置後にスクロースの好みの有意な低下が観察された。また、全てのマウスは、ベースラインでのストレス暴露前に同様の行動状態を示した。
しかし、3週間の応力暴露後、モデル群では5分間の総移動距離が対照群よりも有意に低かった。モデル グループの中央ゾーンへのエントリ数は、コントロール グループと比較して大幅に減少しました。この手順を試みる間、この行動検査を行うだけでなく、2つの薬を毎日のモデリングの1〜2時間前に投与して、薬自体の効果を確認することが重要です。
この手順に従って、強制水泳テストでシャオヤオサンがうつ病のマウスの絶望的な行動を改善することができるような追加の質問に答えるために強制水泳テストのような他の方法を実行することができます。開発後、この技術は、うつ病の予防と治療の分野における中国医学の効果と根本的なメカニズムの探求における研究者のための道を開いた。
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本記事では、慢性予測不能軽度ストレス(CUMS)を用いてマウスのうつ病モデルを構築するプロトコルを提示し、伝統的な中医学製剤である逍遥散(Xiaoyaosan)の抗うつ効果を評価します。
マウスを用いた慢性予測不能軽度ストレス(CUMS)などの標準化された行動モデルは、新規の抗うつ薬候補の評価や、初期段階の神経精神薬資産のリスク低減において極めて重要です。定量的な行動エンドポイントと制御された群間比較により、ターゲットへの結合および機能的な結果評価に対する予測的な信頼性が得られます。本プロトコルは、伝統薬候補を含む神経活性化合物の、創薬から前臨床評価に至るトランスレーショナルな連続性を支援します。
本プロトコルでは、CUMSベースの行動試験を、神経精神疾患治療薬開発における初期探索から前臨床リード評価への橋渡しとして位置づけています。