非筋ミオシン II 収縮を介して折り返されている陥シグナル伝達経路ショウジョウバエS2R + 細胞を調査する細胞ベースのアッセイ

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2018年8月19日

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2018年8月19日

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Kimberly A. Peters¹ , Elizabeth Detmar¹ , Liz Sepulveda² , Corrina Del Valle² , Ruth Valsquier² , Anna Ritz² , Stephen L. Rogers¹^,³^,⁴ , Derek A. Applewhite²

¹Department of Biology, The University of North Carolina at Chapel Hill, ²Department of Biology, Reed College, ³Carolina Center for Genome Sciences, The University of North Carolina at Chapel Hill, ⁴Lineberger Comprehensive Cancer Center, The University of North Carolina at Chapel Hill

ここで我々はショウジョウバエS2R + 細胞を用いた収縮アッセイをについて説明します。外因性リガンド、折原腸陥入 (霧) のアプリケーションは、シグナル伝達経路と細胞の収縮性の霧の活性化にします。この試金を使用して、シグナル伝達経路霧の中で細胞の収縮性蛋白質の規制を調査できます。

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頂端収縮アッセイ

Fog調整培地処理

位相差顕微鏡観察

パラホルムアルデヒド固定

RNAiによる遺伝子ノックダウン

細胞形態解析

巾着絞り様収縮構造の形成

Chapters in this video

0:04

Title

1:10

Preparation of Concanavalin-A-coated Glass-bottomed Dishes and the Plating of S2R+ Cells

2:25

Efficacy Test of the Fog-conditioned Medium and the Cellular Contractility Assay

3:16

Fixing and Staining of Constricted S2R+ Cells

5:18

Imaging and Quantification of the Cellular Contractility Assay

5:41

Results: Post-treatment with Fog-Myc, RLC Forms Rings Indicative of Non-Muscle Myosin II Constriction

6:40

Conclusion

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