Name: 単層カーボンナノ チューブ (SWCNT) による生体内での多発性骨髄腫細胞の増殖の抑制-MALAT1 アンチセンス Oligos を配信 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-12-13T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 24 s
Description: 学ぶ単層カーボンナノチューブを用いたオリゴヌクレオチド薬物送達法。MALAT1アンチセンスオリゴを多発性骨髄腫細胞に効率的に導入し、in vivoで治療効果を検証する革新的ナノ技術です。

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著者に感謝ラーナー研究所ゲノム、プロテオームと彼らの支援のためのイメージング コアとサポートします。資金: この作業は、財政的に NIH/NCI の助成 R00 CA172292 (J.J.Z.) に (J.J.Z.) をスタートアップ資金と臨床トランスレーショナル科学共同 (CTSC) (J.J.Z.) にケース ウェスタン リザーブ大学コア使用率のパイロット グラントのによって支えられました。この作品は、国立機関の健康 SIG グラント 1S10OD019972-01 からの資金で購入したライカ SP8 共焦点顕微鏡を利用されています。

すべての実験動物を含む事前クリーブランド クリニック IACUC (機関動物ケアおよび使用委員会) によって承認されました。
1. 機能性カーボンナノ チューブの合成
<ol><li>単層カーボンナノ チューブの 1 mg、5 mg DSPE ・ PEG2000 - アミンとシンチレーション バイアル (20 mL) での滅菌ヌクレアーゼ フリー水 5 mL を混ぜます。それを振るも完全にすべての試薬を溶解します。</li>
	<li>室温で 1 時間 40 W の電力レベルで水風呂超音波発生装置でバイアルを超音波 (20 分 x 3、RT は、過熱を避けるために水 20 分毎を変更)。6 時間 24,000 × gで遠心分離し、上澄みを収集します。この機能の SWCNT ソリューションは、2 ヶ月の 4 ° C で保存できます。</li>
	<li>滅菌ヌクレアーゼ フリー水 4 mL に続いて 100 kDa MWCO 遠心ろ過デバイスにステップ 1.2 から SWCNT 溶液 1 mL を追加します。余分な DSPE PEG2000-アミンを削除する RT で 4,000 x gで 10 分間遠心します。水および遠心分離 5 4 mL の添加を繰り返し x。各遠心分離後残った SWCNT 溶液 0.5 mL 以上フィルターにされません。</li>
	<li>808 で紫外/可視分光器を用いたフィルターの残りの SWCNT の溶液の濃度を測定後は最終的な洗浄。最終濃度は、通常 50 mg/L (カムら18によって開発された方法に従って算出) です。 注:DSPE PEG 修飾単層カーボンナノ チューブが水溶性で 1.4 の手順の後、数週間後表示される集計せず異なる生物学的ソリューションで安定していることを確認します。</li>
</ol>2. 2'-O 変更された Rna 機能性 SWCNT が並ぶ反 MALAT1 Gapmer DNA の活用
<ol><li>DSPE PEG2000 アミンの 450 μ L にスルホ LC SPDP の 0.5 mg 修飾 SWCNT を追加します。10 x PBS の 50 μ L を追加し、室温 2 時間インキュベート</li>
	<li>余分なスルホ-LC-SPDP を削除するには、ヌクレアーゼ フリー水 4 mL に続いて 100 kDa MWCO 遠心ろ過デバイスにステップ 2.1 からの反応を追加します。5 倍の水と遠心分離した繰り返しの 4 mL を加えて 4,000 x gで 10 分間遠心します。</li>
	<li>200 nM チオール修飾した反 MALAT1 Cy3 gapmer DNA に商業の DTT 溶液 1.5 mL を追加し、NAP 5 列、次の製造元のプロトコル製品した浄化で 90 分間インキュベートします。溶出が 500 μ L 滅菌ヌクレアーゼ フリー 1 のと反 MALAT1 Cy3 PBS x。 注:機能性の SWCNT はチオール抗 MALAT1 gapmer DNA の貯蔵の間に形成されるジスルフィド結合を切断可能性があります追加の DTT、と共に格納できます。追加の DTT を SWCNT と共役前に、aNAP 5 列で削除できます。</li>
	<li>スルホ LC SPDP 扱われる DSPE PEG2000 アミン SWCNT のソリューションがフィルターに残さを収集し、反 MALAT1 Cy3 ソリューションの 500 μ L で希釈します。その後、4 ° C 24 時間でそれを孵化させなさい。共役 SWCNT 反 MALAT1 は、3 週間の 4 ° C で保存できます。同じ手順に従って、スクランブル アンチセンス オリゴと共役の SWCNT を合成し、SWCNT コントロールとして使用できます。</li>
</ol>3 SWCNT 反 MALAT1 の尾静脈注射
<ol><li>
MM 播種性マウス モデルを生成します。
	<ol>
<li>比較の最良の結果を達成するために 14 うなずきをランダムに配置します。試用版または制御グループ (各グループのセブン) を同じ男性/女性の比率が CB17-Prkdcscid/J マウス (8 週齢)。</li>
		<li>操作ベンチをきれいにし、70% アルコールで消毒します。</li>
		<li>尾に表示される静脈のためマウスを暖める暖房ランプを使用します。尾注入落と正しくマウスを抑制します。</li>
		<li>50 μ L の PBS 尾静脈麻酔なしで 5 × 106 MM.1S リュック mCherry セルを挿入します。30 s. マーク挿入されたマウスのアルコール綿で注射部位を押すし、きれいなケージに戻ります。</li>
	</ol>
</li>
	<li>
MM.1S 細胞投与後 7 日目に治療を開始します。
	<ol>
<li>マウスの尾静脈に SWCNT アンチ MALAT1 を含む PBS の 50 μ L を注入します。SWCNT-コントロールをコントロールとしてを含む PBS を使用します。</li>
		<li>30 アルコール綿で注射部位を押して s。</li>
		<li>尾と、1 分間マウスの一般的な動作にローカル出血を観察し、清潔なケージに戻します。ケージをラックが、注射がよく容認されるかどうかを確認するに戻る前に再度すべて注入されたマウスを観察します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>
注入実験の終了まで 7 日ごとを繰り返します。
	<ol>
<li>マウスの一般的な健康の低下に実験を終了する: ない食事や飲酒、薄い足の外観、皮下出血、息切れの活動に触れることができる質量および/または、下肢の麻痺が減少し、腹部を観察すると。</li>
	</ol>
</li>
</ol>4。 病気の進行の評価
<ol><li>毎日 MM.1S リュック mCherry 細胞の注入後マウスの全般的な状態を評価します。マウスを開発する場合に特定の注意を払うは、下肢の麻痺します。</li>
	<li>
システムを使用して生体内イメージング 1 倍の週、SWCNT 反 MALAT1 注入前に腫瘍の成長を評価します。
	<ol>
<li>1x PBS で新鮮な 15 mg/mL D-ルシフェリンを準備します。</li>
		<li>イソフルラン気化器 (誘発のための 3-5% とマウスの状態によって、メンテナンスのための 1-3%) を持つマウスを麻酔します。</li>
		<li>各マウスにおける D-ルシフェリンを 150 mg/kg を腹腔内に注入、イメージ投射; 前に、5 分その後、イメージング システム、スペクトルと腹臥位でマウスをイメージします。</li>
		<li>発光飽和に達するまでマウス 2 分ごとの時系列画像を収集します。D-ルシフェリン取り込み/信号に応じて間隔を調整します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>実験の終了に達するマウスを犠牲にする CO2を使用します。</li>
	<li>
これは、MM 播種性モデルは、マウスのように処理します。
	<ol>
<li>解剖前にマウスの重量を量る。</li>
		<li>血球カウンター マシンによって実行される完全な血計算 (CBC) 分析のための中心から末梢血を収集します。白血球と赤血球のカウントだけでなく、リンパ球の比率は、プライマリ インデックスです。</li>
		<li>脾臓を隔離し、それの重量を量る。脾臓/体重比を計算します。検討 > 脾臓の腫大として 0.5%。</li>
		<li>目に見える転移組織骨髄、脾臓、リンパ節、腎臓の組織を収集します。</li>
		<li>マウス下肢の麻痺を開発する場合は、脊椎を収集します。</li>
		<li>骨髄のサンプルから RNA やタンパク質を抽出します。</li>
		<li>ホルマリンのすべての残りの組織を修正します。</li>
		<li>脱灰、固定の 24 h 後 5 日間 0.25 M EDTA 溶液 (pH 8.0) で骨標本を浸します。</li>
		<li>長期保存のための 75% アルコールのすべてのサンプルを浸します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>2 つのグループで同じ時点でルシフェラーゼの信号強度を比較します。両方のグループから各マウスの犠牲の日付を記録し、ソフトウェアで 2 つのグループの生存曲線を計算します。 注:図 1は、すべての手順をまとめたものです。</li>
</ol>

<ol><li>Jiang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RNase+non-sensitive+and+endocytosis+independent+siRNA+delivery+system%3A+delivery+of+siRNA+into+tumor+cells+and+high+efficiency+induction+of+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nanoscale%22%5BJournal%5D)">RNase non-sensitive and endocytosis independent siRNA delivery system: delivery of siRNA into tumor cells and high efficiency induction of apoptosis.</a> Nanoscale. 5 (16), 7256-7264 (2013).</li>
<li>Murakami, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Water-dispersed+single-wall+carbon+nanohorns+as+drug+carriers+for+local+cancer+chemotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nanomedicine+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">Water-dispersed single-wall carbon nanohorns as drug carriers for local cancer chemotherapy.</a> Nanomedicine (Lond). 3 (4), 453-463 (2008).</li>
<li>Kam, N. W., Dai, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carbon+nanotubes+as+intracellular+protein+transporters%3A+generality+and+biological+functionality%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Chemical+Society%22%5BJournal%5D)">Carbon nanotubes as intracellular protein transporters: generality and biological functionality.</a> Journal of the American Chemical Society. 127 (16), 6021-6026 (2005).</li>
<li>Kam, N. W., Liu, Z., Dai, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functionalization+of+carbon+nanotubes+via.+cleavable+disulfide+bonds+for+efficient+intracellular+delivery+of+siRNA+and+potent+gene+silencing%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Chemical+Society%22%5BJournal%5D)">Functionalization of carbon nanotubes via. cleavable disulfide bonds for efficient intracellular delivery of siRNA and potent gene silencing.</a> Journal of the American Chemical Society. 127 (36), 12492-12493 (2005).</li>
<li>Kam, N. W., Liu, Z., Dai, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carbon+nanotubes+as+intracellular+transporters+for+proteins+and+DNA%3A+an+investigation+of+the+uptake+mechanism+and+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Angewandte+Chemie+International+Edition+in+English%22%5BJournal%5D)">Carbon nanotubes as intracellular transporters for proteins and DNA: an investigation of the uptake mechanism and pathway.</a> Angewandte Chemie International Edition in English. 45 (4), 577-581 (2006).</li>
<li>Ntziachristos, P., Abdel-Wahab, O., Aifantis, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+concepts+of+epigenetic+dysregulation+in+hematological+malignancies%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Immunology%22%5BJournal%5D)">Emerging concepts of epigenetic dysregulation in hematological malignancies.</a> Nature Immunology. 17 (9), 1016-1024 (2016).</li>
<li>Evans, J. R., Feng, F. Y., Chinnaiyan, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+bright+side+of+dark+matter%3A+lncRNAs+in+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">The bright side of dark matter: lncRNAs in cancer.</a> Journal of Clinical Investigation. 126 (8), 2775-2782 (2016).</li>
<li>Ronchetti, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+lncRNA+transcriptional+fingerprints+characterize+progressive+stages+of+multiple+myeloma%5BTitle%5D)+AND+%22Oncotarget%22%5BJournal%5D)">Distinct lncRNA transcriptional fingerprints characterize progressive stages of multiple myeloma.</a> Oncotarget. 7 (12), 14814-14830 (2016).</li>
<li>Wong, K. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epigenetic+silencing+of+a+long+non-coding+RNA+KIAA0495+in+multiple+myeloma%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Cancer%22%5BJournal%5D)">Epigenetic silencing of a long non-coding RNA KIAA0495 in multiple myeloma.</a> Molecular Cancer. 14, 175(2015).</li>
<li>Schmidt, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+long+noncoding+MALAT-1+RNA+indicates+a+poor+prognosis+in+non-small+cell+lung+cancer+and+induces+migration+and+tumor+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+Oncology%22%5BJournal%5D)">The long noncoding MALAT-1 RNA indicates a poor prognosis in non-small cell lung cancer and induces migration and tumor growth.</a> Journal of Thoracic Oncology. 6 (12), 1984-1992 (2011).</li>
<li>Ji, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MALAT-1%2C+a+novel+noncoding+RNA%2C+and+thymosin+beta4+predict+metastasis+and+survival+in+early-stage+non-small+cell+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">MALAT-1, a novel noncoding RNA, and thymosin beta4 predict metastasis and survival in early-stage non-small cell lung cancer.</a> Oncogene. 22 (39), 8031-8041 (2003).</li>
<li>Luo, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptomic+and+genomic+analysis+of+human+hepatocellular+carcinomas+and+hepatoblastomas%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Transcriptomic and genomic analysis of human hepatocellular carcinomas and hepatoblastomas.</a> Hepatology. 44 (4), 1012-1024 (2006).</li>
<li>Guffanti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+transcriptional+sketch+of+a+primary+human+breast+cancer+by+454+deep+sequencing%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Genomics%22%5BJournal%5D)">A transcriptional sketch of a primary human breast cancer by 454 deep sequencing.</a> BMC Genomics. 10, 163(2009).</li>
<li>Cho, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MALAT1+long+non-coding+RNA+is+overexpressed+in+multiple+myeloma+and+may+serve+as+a+marker+to+predict+disease+progression%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">MALAT1 long non-coding RNA is overexpressed in multiple myeloma and may serve as a marker to predict disease progression.</a> BMC Cancer. 14, 809(2014).</li>
<li>Handa, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long+non-coding+RNA+MALAT1+is+an+inducible+stress+response+gene+associated+with+extramedullary+spread+and+poor+prognosis+of+multiple+myeloma%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Haematology%22%5BJournal%5D)">Long non-coding RNA MALAT1 is an inducible stress response gene associated with extramedullary spread and poor prognosis of multiple myeloma.</a> British Journal of Haematology. 179 (3), 449-460 (2017).</li>
<li>Hu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+the+MALAT1%2FPARP1%2FLIG3+complex+induces+DNA+damage+and+apoptosis+in+multiple+myeloma%5BTitle%5D)+AND+%22Leukemia%22%5BJournal%5D)">Targeting the MALAT1/PARP1/LIG3 complex induces DNA damage and apoptosis in multiple myeloma.</a> Leukemia. , (2018).</li>
<li>Lennox, K. A., Behlke, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+localization+of+long+non-coding+RNAs+affects+silencing+by+RNAi+more+than+by+antisense+oligonucleotides%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleic+Acids+Research%22%5BJournal%5D)">Cellular localization of long non-coding RNAs affects silencing by RNAi more than by antisense oligonucleotides.</a> Nucleic Acids Research. 44 (2), 863-877 (2016).</li>
<li>Kam, N. W., O'Connell, M., Wisdom, J. A., Dai, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carbon+nanotubes+as+multifunctional+biological+transporters+and+near-infrared+agents+for+selective+cancer+cell+destruction%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Carbon nanotubes as multifunctional biological transporters and near-infrared agents for selective cancer cell destruction.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 102 (33), 11600-11605 (2005).</li>
<li>Zeineldin, R., Al-Haik, M., Hudson, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+polyethylene+glycol+integrity+in+specific+receptor+targeting+of+carbon+nanotubes+to+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Letters%22%5BJournal%5D)">Role of polyethylene glycol integrity in specific receptor targeting of carbon nanotubes to cancer cells.</a> Nano Letters. 9 (2), 751-757 (2009).</li>
<li>Amodio, N., D'Aquila, P., Passarino, G., Tassone, P., Bellizzi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epigenetic+modifications+in+multiple+myeloma%3A+recent+advances+on+the+role+of+DNA+and+histone+methylation%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opinion+on+Therapeutic+Targets%22%5BJournal%5D)">Epigenetic modifications in multiple myeloma: recent advances on the role of DNA and histone methylation.</a> Expert Opinion on Therapeutic Targets. 21 (1), 91-101 (2017).</li>
<li>Ahmad, N., Haider, S., Jagannathan, S., Anaissie, E., Driscoll, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA+theragnostics+for+the+clinical+management+of+multiple+myeloma%5BTitle%5D)+AND+%22Leukemia%22%5BJournal%5D)">MicroRNA theragnostics for the clinical management of multiple myeloma.</a> Leukemia. 28 (4), 732-738 (2014).</li>
<li>Amodio, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drugging+the+lncRNA+MALAT1+via.+LNA+gapmeR+ASO+inhibits+gene+expression+of+proteasome+subunits+and+triggers+anti-multiple+myeloma+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Leukemia%22%5BJournal%5D)">Drugging the lncRNA MALAT1 via. LNA gapmeR ASO inhibits gene expression of proteasome subunits and triggers anti-multiple myeloma activity.</a> Leukemia. , (2018).</li>
<li>Highleyman, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FDA+approves+fomivirsen%2C+famciclovir%2C+and+Thalidomide.+Food+and+Drug+Administration%5BTitle%5D)+AND+%22BETA%22%5BJournal%5D)">FDA approves fomivirsen, famciclovir, and Thalidomide. Food and Drug Administration.</a> BETA. 5, (1998).</li>
<li>Smith, R. J., Hiatt, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+new+drugs+for+homozygous+familial+hypercholesterolemia%3A+managing+benefits+and+risks+in+a+rare+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Internal+Medicine%22%5BJournal%5D)">Two new drugs for homozygous familial hypercholesterolemia: managing benefits and risks in a rare disorder.</a> JAMA Internal Medicine. 173 (16), 1491-1492 (2013).</li>
<li>Aartsma-Rus, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FDA+Approval+of+Nusinersen+for+Spinal+Muscular+Atrophy+Makes+2016+the+Year+of+Splice+Modulating+Oligonucleotides%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleic+Acid+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">FDA Approval of Nusinersen for Spinal Muscular Atrophy Makes 2016 the Year of Splice Modulating Oligonucleotides.</a> Nucleic Acid Therapeutics. 27 (2), 67-69 (2017).</li>
<li>Nelson, S. F., Miceli, M. C. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28399245">FDA Approval of Eteplirsen for Muscular Dystrophy.</a> The Journal of the American Medical Association. 317 (14), 1480(2017).</li>
<li>Liu, Z., Sun, X., Nakayama-Ratchford, N., Dai, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Supramolecular+chemistry+on+water-soluble+carbon+nanotubes+for+drug+loading+and+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22American+Chemical+Society+Nano%22%5BJournal%5D)">Supramolecular chemistry on water-soluble carbon nanotubes for drug loading and delivery.</a> American Chemical Society Nano. 1 (1), 50-56 (2007).</li>
<li>Ali-Boucetta, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiwalled+carbon+nanotube-doxorubicin+supramolecular+complexes+for+cancer+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+communications+%28Cambridge%29%22%5BJournal%5D)">Multiwalled carbon nanotube-doxorubicin supramolecular complexes for cancer therapeutics.</a> Chemical communications (Cambridge). (4), 459-461 (2008).</li>
<li>Bianco, A., Kostarelos, K., Partidos, C. D., Prato, M. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/15672140">Biomedical applications of functionalised carbon nanotubes.</a> Chemical communications. (5), Cambridge. 571-577 (2005).</li>
<li>Hadidi, N., Kobarfard, F., Nafissi-Varcheh, N., Aboofazeli, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+single-walled+carbon+nanotube+solubility+by+noncovalent+PEGylation+using+experimental+design+methods%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">Optimization of single-walled carbon nanotube solubility by noncovalent PEGylation using experimental design methods.</a> International Journal of Nanomedicine. 6, 737-746 (2011).</li>
<li>Padilla-Parra, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+imaging+of+endosome+acidification+and+single+retrovirus+fusion+with+distinct+pools+of+early+endosomes%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Quantitative imaging of endosome acidification and single retrovirus fusion with distinct pools of early endosomes.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109 (43), 17627-17632 (2012).</li>
<li>Wu, H., Zhu, L., Torchilin, V. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((pH-sensitive+poly%28histidine%29-PEG%2FDSPE-PEG+co-polymer+micelles+for+cytosolic+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">pH-sensitive poly(histidine)-PEG/DSPE-PEG co-polymer micelles for cytosolic drug delivery.</a> Biomaterials. 34 (4), 1213-1222 (2013).</li>
<li>Oishi, M., Nagatsugi, F., Sasaki, S., Nagasaki, Y., Kataoka, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Smart+polyion+complex+micelles+for+targeted+intracellular+delivery+of+PEGylated+antisense+oligonucleotides+containing+acid-labile+linkages%5BTitle%5D)+AND+%22Chembiochem%22%5BJournal%5D)">Smart polyion complex micelles for targeted intracellular delivery of PEGylated antisense oligonucleotides containing acid-labile linkages.</a> Chembiochem. 6 (4), 718-725 (2005).</li>
<li>Dong, H., Ding, L., Yan, F., Ji, H., Ju, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+polyethylenimine-grafted+graphene+nanoribbon+for+cellular+delivery+of+locked+nucleic+acid+modified+molecular+beacon+for+recognition+of+microRNA%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">The use of polyethylenimine-grafted graphene nanoribbon for cellular delivery of locked nucleic acid modified molecular beacon for recognition of microRNA.</a> Biomaterials. 32 (15), 3875-3882 (2011).</li>
<li>Arunachalam, B., Phan, U. T., Geuze, H. J., Cresswell, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enzymatic+reduction+of+disulfide+bonds+in+lysosomes%3A+characterization+of+a+gamma-interferon-inducible+lysosomal+thiol+reductase+%28GILT%29%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Enzymatic reduction of disulfide bonds in lysosomes: characterization of a gamma-interferon-inducible lysosomal thiol reductase (GILT).</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 97 (2), 745-750 (2000).</li>
<li>Lelimousin, M., Sansom, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Membrane+perturbation+by+carbon+nanotube+insertion%3A+pathways+to+internalization%5BTitle%5D)+AND+%22Small%22%5BJournal%5D)">Membrane perturbation by carbon nanotube insertion: pathways to internalization.</a> Small. 9 (21), 3639-3646 (2013).</li>
<li>Thomas, M., Enciso, M., Hilder, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insertion+mechanism+and+stability+of+boron+nitride+nanotubes+in+lipid+bilayers%5BTitle%5D)+AND+%22J+Phys+Chem+B%22%5BJournal%5D)">Insertion mechanism and stability of boron nitride nanotubes in lipid bilayers.</a> J Phys Chem B. 119 (15), 4929-4936 (2015).</li>
<li>Jin, H., Heller, D. A., Strano, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-particle+tracking+of+endocytosis+and+exocytosis+of+single-walled+carbon+nanotubes+in+NIH-3T3+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Letters%22%5BJournal%5D)">Single-particle tracking of endocytosis and exocytosis of single-walled carbon nanotubes in NIH-3T3 cells.</a> Nano Letters. 8 (6), 1577-1585 (2008).</li>
<li>Jin, H., Heller, D. A., Sharma, R., Strano, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Size-dependent+cellular+uptake+and+expulsion+of+single-walled+carbon+nanotubes%3A+single+particle+tracking+and+a+generic+uptake+model+for+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22American+Chemical+Society+Nano%22%5BJournal%5D)">Size-dependent cellular uptake and expulsion of single-walled carbon nanotubes: single particle tracking and a generic uptake model for nanoparticles.</a> American Chemical Society Nano. 3 (1), 149-158 (2009).</li>
<li>Ruggiero, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paradoxical+glomerular+filtration+of+carbon+nanotubes%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Paradoxical glomerular filtration of carbon nanotubes.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (27), 12369-12374 (2010).</li>
</ol>

著者が明らかに何もありません。

証拠は lncRNAs MM7,8,9; を含む癌の多数の生理学的および病態生理学的プロシージャの規則の部分を取ることを示しています。アンチセンスオリゴヌクレオチド20,21,22では実現することができますがん治療の対象となる可能性があります。米国食品医薬品局 (FDA) は、サイトメガロ ウイルス網膜炎23、ホモ接合体家族性高コレステロール血症24の nusinersen の mipomersen の fomivirsen を含むいくつかのアンチセンス オリゴヌクレオチドの薬を承認しました。脊髄性筋萎縮症25日、デュシェンヌ...

SWCNT は理想的な忍容性と体外1と生体2で最小毒性安定的かつ効率的に薬、タンパク質、低分子核酸などの様々 なタイプを提供できる斬新なナノ材料です。機能性 SWCNT 素晴らしい生体適合性と水への溶解度が小さい分子シャトルとして使用することができます、細胞膜3,4,5を貫通するそれらを運ぶことができます。
lncRNAs は RNA のクラスター (> 200 nt) それはゲノムから mRNA に転写されますが、タンパク質に変換することはできません。増加する証拠は、lncRNAs 遺伝子式6の規制に参加し、開始と MM7,8,9を含むがんのほとんどの種類の進行に関与していることを示しています。MALAT1 は核濃縮の非翻訳転写 2 (NEAT2) と非常に節約された lncRNA10。MALAT1 転移性肺非小細胞癌 (NSCLC)11、当初認識されましたが数多く腫瘍5,12,13; で過剰に発現されています。それは最も高い表現の lncRNAs の一つで、MM8,14の予後と相関しています。MALAT1 の発現レベルは致命的なコース髄 MM 患者のみ15MM と診断されたものと比較して有意に高かった。
以前の研究では、ターゲット MALAT1 gapmer DNA アンチセンス オリゴヌクレオチドを使用してによって、反 MALAT1 oligos 確実 DNA 損傷と MM16アポトーシスにつながるを確認した (アンチ MALAT1) MM 細胞に。Gapmer DNA をアンチセンス DNA 構成・ 2'-青梅-Rna、RNase H 一度バインド活動17MALAT1 胸の谷間を促す可能性がありますしました。アンチセンス oligos の in vivo デリバリー効率はまだその臨床での使用を制限します。
配信をテストするには、DNA は DSPE PEG2000 アミン標識抗 MALAT1 gapmer 抗 MALAT1 gapmer oligos の SWCNT の効果は、SWCNT を官能基化。SWCNT 反 MALAT1、静脈内に注入 MM 播種性マウス モデル;4 回の治療後は、印象的な抑制が観察されます。

<table><tbody><tr><td>SWCNTs</td><td>ミリポアシグマ</td><td>704113</td><td></td></tr><tr><td>DSPE-PEG2000-アミン</td><td>アバンティ 極性脂質</td><td>880128</td><td></td></tr><tr><td>バス超音波処理装置</td><td>VWR</td><td>97043-992</td><td></td></tr><tr><td>4 mL 遠心フィルター</td><td>ミリポアシグマ</td><td>Z740208-8EA</td><td></td></tr><tr><td>UV/VIS分光計</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>accuSkan GO UV/Vis マイクロプレート分光光度計</td><td>808 nm での吸光係数 0.0465 L/mg/cm</td></tr><tr><td>Sulfo-LC-SPDP</td><td>ProteoChem</td><td>c1118</td><td></td></tr><tr><td>DTT solution</td><td>Millipore-Sigma</td><td>43815</td><td></td></tr><tr><td>NAP-5 column</td><td>GE Healthcare</td><td>17-0853-01</td><td></td></tr><tr><td>in vivo イメージングシステム</td><td>PerkinElmer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>NOD.CB17-Prkdcscid/J マウス</td><td>Charles River lab</td><td>250</td><td></td></tr><tr><td>Flow cytometer</td><td>Becton Dickinso</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lipofectamine</td><td>Invitrogen</td><td>11668019</td><td>Lipofectamine2000</td></tr><tr><td>ウシ胎児血清 (FBS)</td><td>Invitrogen</td><td>10437-028</td><td></td></tr><tr><td>RMPI-1640 medium</td><td>Invitrogen</td><td>11875-093</td><td></td></tr><tr><td>MALAT1-QF:</td><td>IDTにより合成会社</td><td></td><td>5' - GTTCTGATCCCGCTGCTATT - 3'</td></tr><tr><td>MALAT1-QR:</td><td>IDT社</td><td></td>によって合成 <td>5'- TCCTCAACACTCAGCCTTTATTATC - 3'</td></tr><tr><td>GAPDH-QF:</td><td>IDT社</td><td></td>合成 <td>5'- CAAGAGCACAAGAGGAAGAGAG - 3'</td></tr><tr><td>GAPDH-QR:</td><td>IDT社</td><td></td>によって合成 <td>5'- CTACATGGCAACTGTGAGGAG - 3'</td></tr><tr><td>SYBR Green PCR マスターミックスを使用した定量</td><td>PCR サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>A25780</td><td></td></tr><tr><td>RevertAid ファーストスタンド cDNA 合成キット</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック</td><td>K1621</td><td></td></tr><tr><td>抗 MALAT1</td><td>IDT 社</td><td></td>製合成 <td>5'-mC*mG*mA*mA*mA*a*t*T *G*G*C*A*C*A*mC*mA*mG*mC*mA-3'</td></tr><tr><td>細胞生存率アッセイキット</td><td>プロメガコーポレーション</td><td>G7570</td><td>CellTiter-GloLuminescent Cell Viability Assay Kit</td></tr><tr><td>accuSkan GO UV/Vis マイクロプレート分光光度計</td><td>サーモフィッシャー サイエンティフィック</td><td></td><td></td></tr><tr><td>遠心フィルター</td><td>ミリポアシグマ</td><td>UFC910008</td><td></td></tr><tr><td>SPSSソフトウェア</td><td>IBM</td><td>バージョン24.0</td><td></td></tr><tr><td>D-ルシフェリン</td><td>ミリポアシグマ</td><td>L9504</td><td></td></tr></tbody></table>

単層カーボンナノ チューブ (swcnt) による生体内での多発性骨髄腫細胞の増殖の抑制-malat1 アンチセンス oligos を配信

Repression of Multiple Myeloma Cell Growth In Vivo by Single-wall Carbon Nanotube (SWCNT)-delivered MALAT1 Antisense Oligos

単層カーボンナノ チューブ (SWCNT) は、合成小分子薬、オリゴヌクレオチド、タンパク質などの細胞に複数の種類の薬を提供するのに使用されているナノ粒子の新しいタイプです。SWCNT、カスタマイズ可能な寸法、表面的な広域がありその表面にさまざまな変更を薬で柔軟にバインドできます。したがって、それは細胞に薬を輸送するための理想的なシステムです。長鎖非コード Rna (lncRNAs) 性 RNA 200 以上のクラスターは、nt では、蛋白質に翻訳することはできませんが、生物学的および病態生理学的プロセスに重要な役割を果たします。転移による肺腺癌成績証明書 1 (MALAT1) は非常に節約された lncRNA です。ハイレベル MALAT1 多発性骨髄腫 (MM) を含む様々 な癌の予後に関連していることを示した。我々 は MALAT1 が MM; 重さ: DNA 修復と細胞死を調節することを明らかにしました。したがって、MALAT1 は、ミリメートルのため治療上のターゲットとして考えることが。しかし、体内の MALAT1 の抑制/ノックダウンするアンチセンスの oligo の効率的な配信はまだ問題です。本研究で我々 ペグ 2000 SWCNT を変更してそれに反 MALAT1 オリゴを共役、この化合物の in vitro の配信をテスト、播種 MM マウス モデルに静脈内に挿入し、観察する示す MM 進行を大幅に抑制その SWCNT 反 MALAT1 gapmer DNA の最適な配信シャトルしています。

反 MALAT1 gapmer MM で DNA の抑制効果を示すためには、我々 は MALAT1 の発現をノックダウンし、H929 および MM.1S 細胞でそれを使用します。48 時間後、ノックダウン効率の分析のため収集された細胞と抗 MALAT1 gapmer またはコントロール DNA 細胞のアポトーシスの状態をトランスフェクトしました。qRT PCR 結果反 MALAT1 gapmer DNA が効率的にノックダウン H929 と MM.1S 細胞における MALAT1 の発現を示した (図 2A)。ダウン規制 MALAT1 アポトーシス明らかにフローサイトメトリーによるアポトーシスの状態を求めた (図 2B)。
反 MALAT1 oligos ミリメートル...

この原稿は、単層カーボンナノ チューブ (SWCNT) の合成を説明します-共役、SWCNT の確実な配信との強力な治療効果を発揮する MALAT1 gapmer アンチセンス DNA オリゴヌクレオチド (SWCNT 対策 MALAT1)反 MALAT1 の in vitro および in vivo。合成、修正、活用方法を使用し、SWCNT 反 MALAT1 の注入.

単層カーボンナノ チューブ (SWCNT) による生体内での多発性骨髄腫細胞の増殖の抑制-MALAT1 アンチセンス Oligos を配信

The single-wall carbon nanotube (SWCNT) is a new type of nanoparticle, which has been used to deliver multiple kinds of drugs into cells, such as ...

ここで使用している方法は、薬物送達のための新しいタイプのナノ粒子である単層カーボンナノチューブでオリゴヌクレオチドをパッケージ化するのに役立ちます。この技術の主な利点は、生体内の細胞へのオリゴヌクレオチド薬物のより効率的な送達である。この技術の意味は、オリゴヌクレオチド薬の送達を改善するためにナノ粒子を導入しているため、多発性骨髄腫の研究にも及ぶ。この方法を通して多発性骨髄腫の治療に関する洞察を提供できる。また、他の疾患に適用され、タンパク質や小分子などの他の貨物と共役することができます。まず、1ミリグラムの単層カーボンナノチューブ、DSPE-PEG 2000アミン5ミリグラム、滅菌ヌクレアーゼフリー水5ミリリットルを20ミリリットルガラスシンチレーションバイアルに混ぜます。室温で1時間90ワットの電力レベルで水浴ソニケーターでバイアルを超音波処理します。超音波処理に続いて、6時間24,000回gでバイアルを遠心分離します。その後、上清溶液を収集します。100キロダルトンの分子量カットオフ遠心フィルター装置に単層カーボンナノチューブ溶液の1ミリリットルを加え、続いて殺菌されたヌクレアーゼを含まない水を4ミリリットル加えます。遠心分離機は室温で4,000倍gで10分間、過剰なアミンを除去した。アミン機能化された単層カーボンナノチューブの450マイクロリットルにスルフォ-LC-SPDPの0.5ミリグラムを加えます。その後、50マイクロリットルの10倍PBSを加え、室温で2時間インキュベートします。次に、反応混合物を100キロダルトン分子量カットオフ遠心フィルター装置に加え、続いて4ミリリットルのヌクレアーゼを含まない水を加える。試料を室温で4,000回gで10分間遠心し、過剰なスルホン-LC-SPDPを除去する。フィルターに残されたSulfo-LC-SPDP処理アミン単層カーボンナノチューブ溶液を回収し、以前に調製した抗MALAT1-Cy3溶液を500マイクロリットルで希釈します。その後、一晩摂氏4度でサンプルをインキュベートします。比較の最良の結果を達成するために、各グループに7匹、各群で同じ男女比を持つ試験または対照群に14匹のマウスを無作為に配置する。次に、手術台を清掃し、70%エチルアルコールで殺菌します。加熱ランプを使用して、尾静脈が現れるのを助けるためにマウスの1つを温めます。尾部注入の抑制剤でマウスを正しく拘束してください。尾静脈を通して50マイクロリットルのPBSでMM.1S-luc/mCherry細胞を注入する。アルコール綿棒で注射部位を30秒間押します。次に、注射されたマウスにマークを付け、クリーンケージに戻します。7日目、MM1S細胞注射後、マウスの尾静脈に単一壁カーボンナノチューブ抗MALAT1を含むPBSの50マイクロリットルを注入する。その後、アルコール綿棒で注射部位を30秒間押します。尾の局所出血とマウスの一般的な挙動を1分間観察し、清潔なケージに戻します。ケージをラックに戻す前に、注射されたすべてのマウスを再び観察して、注射が十分に許容されることを確認します。解剖前に各マウスの重量を量る。心臓から末梢血を採取し、血液細胞カウンター装置によって行われる完全な血数アッセイを行う。次に、骨髄、脾臓、リンパ節、腎臓、および目に見える転移を有する組織の組織を採取する。骨髄サンプルからRNAとタンパク質を抽出します。ホルマリンの残りの組織をすべて修正します。24時間の固定後、骨サンプルを0.5モルEDTA溶液に5日間浸漬して脱灰します。その後、すべてのサンプルを75%エチルアルコールに浸して長期保存します。QRT PCRの結果は、抗MALAT1ギャップメRDNAがMALAT1発現をノックダウンし、H929およびMM.1S細胞で有意にアポトーシスを誘発したことを示した。単層カーボンナノチューブ抗MALAT1-Cy3をMM細胞の核に送達し、H929およびMM.1S細胞の両方で内因性MALAT1レベルを有意に抑制した。BMEC-1細胞の生存率は、単層カーボンナノチューブ抗MALAT1-Cy3の処理後、または異なる用量およびタイムポイントでの制御後に有意な差はない。これは、単層カーボンナノチューブ抗MALAT1-Cy3の毒性が、高用量で正常細胞に対して限定的かつ許容可能な毒性を有することを示している。ヒトMM播種マウスモデルを確立し、生体内における単層カーボンナノチューブ反MALAT1の治療効果を評価した。単層カーボンナノチューブ抗MALAT1治療群におけるマウスのルシフェロンシグナルは、21日間の治療後の対照と比較して著しく低かった。これらの結果から、静脈注射による単層カーボンナノチューブ抗MALAT1治療は、抗MALAT1オリゴを腫瘍細胞に効果的に送達できると結論付けた。治療の有意な副作用は認められず、単層カーボンナノチューブ抗MALAT1注射がマウスにとって安全な治療法であることを示す。この手順を試みる間、細胞分子組成物はオリゴヌクレオチド薬の送達、効率、および治療効果に影響を与えることを覚えておくことが重要である。この手順に従って、タンパク質または小分子の結合のような他の方法は、追加の質問に答えるために行うことができる。他の薬を提供するために単一壁カーボンナノチューブを使用するように。

repression-multiple-myeloma-cell-growth-vivo-single-wall-carbon

Research

JoVE Journal

Cancer Research

がん研究

ヒト多発性骨髄腫（MM）細胞は、間葉系細胞と生存および増殖のための細胞外マトリックス成分の支援微小環境が必要です。我々は、腫瘍の増殖、浸潤および血管形成に対する抗がん剤の効果を研究するために移植されたヒト骨髄腫および間葉細胞とin vivoでニワトリ胚モデルを確立しました。...

腫瘍の増殖、浸潤及び血管新生を研究するために、ニワトリでのヒト多発性骨髄腫異種移植モデルの確立

ここでは、抗がん治療薬に応答して単一細胞を縦断的に追跡する長期のタイムラプス顕微鏡法について説明します。...

鏡の国のアリス：単一細胞のタイムラプス顕微鏡と縦トラッキング抗がん治療薬を研究します

ここで我々 はマイクロ Rna 組換えアデノ随伴ウイルス血清型 9 を使用して神経筋疾患のマウスモデルでの配信をについて説明します。単一の末梢投与マウスにおける筋と運動ニューロン、miRNA の機能を検討し、治療の潜在的なin vivoする機会を提供することで持続的な miRNA...

マイクロ Rna の齧歯動物の神経筋疾患を治療する遺伝子組換えアデノ随伴ウイルス血清型 9 を使用しての全身配信

ここで生物発光を用いて、x 線、および陽電子放出断層撮影/コンピューター断層撮影の画像どのように阻止 mTOR の活性を研究する異種移植モデルにおける骨髄にしみ込んで骨髄腫腫瘍に影響を与えます。骨髄にしみ込んで骨髄腫腫瘍生体内ターゲット療法の抗骨髄腫効果の生理学的、非侵襲的関連性とマルチ...

NOG マウスの多発性骨髄腫, 骨髄異種のマルチ モーダルな発光とポジトロニック放出断層レントゲン写真撮影/計算断層イメージング

このプロトコルは、ヒト甲状腺腫瘍形成の異種移植片およびオルコトピックマウスモデルを、マイクロRNAベースの阻害剤治療を試験するプラットフォームとして説明する。このアプローチは、非コードRNAの機能と新しい治療標的としての可能性を研究するのに理想的です。...

マウスの腫瘍増殖を減少させるマイクロRNAの生体内阻害

miRNA の治療には、癌の進行を調節する重要な可能性があります。ここに示す解析的アプローチ、組合せ miRNA...

組合せ miRNA 細胞周期の調節、血管新生治療の解析

本研究では、サリドマイド類似体の標的であるE3ユビキチン・リゲス・セレブロン(CRBN)のユビキチン化および分解を誘導する新規アプローチとして、ポマリドマイドベースの二機能ホモ-PROTACの合成と特徴付けについて述べている。...

ポマリドマイドベースのホモ・プロタクによるE3ユビキチン・リゲス・セレブロンの化学的不活性化

ここでは、脊椎の腰部内腔にカテーテルを移植してラット中枢神経系に薬物を送出する方法について説明する。私たちはアンチセンスオリゴヌクレオチドの送達に焦点を当てていますが、この方法は他の治療モダリティの送達にも適しています。...

ラット中枢神経系におけるアンチセンスオリゴヌクレオチドの子宮内送達

ここでは、動物モデルにおける転移性乳がんへのRNAオリゴマーを運ぶ磁性酸化鉄ナノ粒子の in vivo...

マウス乳がん転移におけるナノ薬物蓄積のモニタリング

血液脳関門は、治療法がない病気である膠芽腫の治療を提供する上で大きなハードルです。ここでは、サイズによってこの生理学的障壁を回避し、腫瘍に蓄積できる in vivo 画像誘導酸化鉄治療用ナノプラットフォームを報告します。...

神経膠芽腫多形動物モデルにおけるオリゴヌクレオチドペイロードのナノ粒子送達

学ぶ単層カーボンナノチューブを用いたオリゴヌクレオチド薬物送達法。MALAT1アンチセンスオリゴを多発性骨髄腫細胞に効率的に導入し、in vivoで治療効果を検証する革新的ナノ技術です。

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