Name: 豊かにし、磁性ナノ粒子でまれな抗原特異的 T 細胞を展開 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-11-17T14:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 28 s
Description: 学ぶ磁性ナノ粒子を用いたE plus E法による希少な抗原特異的T細胞の濃縮・増殖技術。がん免疫療法や個別化医療への応用可能性を探る革新的な細胞治療アプローチです。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

J.W.H. は、ナノバイオ テクノロジー、国立科学財団大学院研究員 (DGE-1232825) と交わりを支える円弧財団のジョンズ ・ ホプキンズ大学で NIH がんナノテクノロジー トレーニング センターを感謝します。この作品は、コールター財団 (JPS)、テッドコー/メリーランド州イノベーション イニシアチブ健康の国民の協会 (P01-AI072677、R01-CA108835、R21-CA185819) からの支援によって賄われていた。

<ol><li>Prasad, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((immunotherapy%3A+Tisagenlecleucel-the+first+approved+Car-t-cell+therapy%3A+implications+for+payers+and+policy+makers%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Clinical+Oncology%22%5BJournal%5D)">immunotherapy: Tisagenlecleucel-the first approved Car-t-cell therapy: implications for payers and policy makers.</a> Nature Reviews Clinical Oncology. 15 (1), 11(2018).</li>
<li>Jenkins, M. K., Moon, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+naive+T+cell+precursor+frequency+and+recruitment+in+dictating+immune+response+magnitude%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">The role of naive T cell precursor frequency and recruitment in dictating immune response magnitude.</a> The Journal of Immunology. 188 (9), 4135-4140 (2012).</li>
<li>Rizzuto, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-antigen-specific+CD8%2B+T+cell+precursor+frequency+determines+the+quality+of+the+antitumor+immune+response%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">Self-antigen-specific CD8+ T cell precursor frequency determines the quality of the antitumor immune response.</a> Journal of Experimental Medicine. 206 (4), 849-866 (2009).</li>
<li>Newell, E. W., Davis, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beyond+model+antigens%3A+high-dimensional+methods+for+the+analysis+of+antigen-specific+T+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+biotechnology%22%5BJournal%5D)">Beyond model antigens: high-dimensional methods for the analysis of antigen-specific T cells.</a> Nature biotechnology. 32 (2), 149(2014).</li>
<li>Perica, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enrichment+and+expansion+with+nanoscale+artificial+antigen+presenting+cells+for+adoptive+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+nano%22%5BJournal%5D)">Enrichment and expansion with nanoscale artificial antigen presenting cells for adoptive immunotherapy.</a> ACS nano. 9 (7), 6861-6871 (2015).</li>
<li>Kosmides, A. K., Necochea, K., Hickey, J. W., Schneck, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Separating+T+Cell+Targeting+Components+onto+Magnetically+Clustered+Nanoparticles+Boosts+Activation%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Letters%22%5BJournal%5D)">Separating T Cell Targeting Components onto Magnetically Clustered Nanoparticles Boosts Activation.</a> Nano Letters. , (2018).</li>
<li>Hickey, J. W., Vicente, F. P., Howard, G. P., Mao, H. Q., Schneck, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biologically+Inspired+Design+of+Nanoparticle+Artificial+Antigen-Presenting+Cells+for+Immunomodulation%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Letters%22%5BJournal%5D)">Biologically Inspired Design of Nanoparticle Artificial Antigen-Presenting Cells for Immunomodulation.</a> Nano Letters. 17 (11), (2017).</li>
<li>,, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+magnetic+enrichment+of+antigen-specific+T+cells+by+engineering+particle+properties%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Efficient magnetic enrichment of antigen-specific T cells by engineering particle properties.</a> Biomaterials. , (2018).</li>
<li>Oelke, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+and+purification+of+CD8%2B+melan-A-specific+cytotoxic+T+lymphocytes+for+adoptive+transfer+in+tumor+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Generation and purification of CD8+ melan-A-specific cytotoxic T lymphocytes for adoptive transfer in tumor immunotherapy.</a> Clinical Cancer Research. 6 (5), 1997-2005 (2000).</li>
<li>Riccione, K., Suryadevara, C. M., Snyder, D., Cui, X., Sampson, J. H., Sanchez-Perez, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+CAR+T+cells+for+adoptive+therapy+in+the+context+of+glioblastoma+standard+of+care%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+visualized+experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Generation of CAR T cells for adoptive therapy in the context of glioblastoma standard of care.</a> Journal of visualized experiments: JoVE. (96), (2015).</li>
<li>Ho, W. Y., Nguyen, H. N., Wolfl, M., Kuball, J., Greenberg, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+methods+for+generating+CD8%2B+T-cell+clones+for+immunotherapy+from+the+naive+repertoire%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+immunological+methods%22%5BJournal%5D)">In vitro methods for generating CD8+ T-cell clones for immunotherapy from the naive repertoire.</a> Journal of immunological methods. 310 (1-2), 40-52 (2006).</li>
<li>Rudolf, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potent+costimulation+of+human+CD8+T+cells+by+anti-4-1BB+and+anti-CD28+on+synthetic+artificial+antigen+presenting+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+immunology%2C+immunotherapy+%3A+CII%22%5BJournal%5D)">Potent costimulation of human CD8 T cells by anti-4-1BB and anti-CD28 on synthetic artificial antigen presenting cells.</a> Cancer immunology, immunotherapy : CII. 57 (2), 175-183 (2008).</li>
<li>Gulukota, K., Sidney, J., Sette, A., DeLisi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+complementary+methods+for+predicting+peptides+binding+major+histocompatibility+complex+molecules1%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+molecular+biology%22%5BJournal%5D)">Two complementary methods for predicting peptides binding major histocompatibility complex molecules1.</a> Journal of molecular biology. 267 (5), 1258-1267 (1997).</li>
<li>Castle, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploiting+the+mutanome+for+tumor+vaccination%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+research%22%5BJournal%5D)">Exploiting the mutanome for tumor vaccination.</a> Cancer research. 72 (5), 1081-1091 (2012).</li>
<li>Duan, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genomic+and+bioinformatic+profiling+of+mutational+neoepitopes+reveals+new+rules+to+predict+anticancer+immunogenicity%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">Genomic and bioinformatic profiling of mutational neoepitopes reveals new rules to predict anticancer immunogenicity.</a> Journal of Experimental Medicine. 211 (11), 2231-2248 (2014).</li>
<li>Srivastava, P. K., Duan, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Harnessing+the+antigenic+fingerprint+of+each+individual+cancer+for+immunotherapy+of+human+cancer%3A+genomics+shows+a+new+way+and+its+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Immunology%2C+Immunotherapy%22%5BJournal%5D)">Harnessing the antigenic fingerprint of each individual cancer for immunotherapy of human cancer: genomics shows a new way and its challenges.</a> Cancer Immunology, Immunotherapy. 62 (5), 967-974 (2013).</li>
<li>Yadav, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predicting+immunogenic+tumour+mutations+by+combining+mass+spectrometry+and+exome+sequencing%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Predicting immunogenic tumour mutations by combining mass spectrometry and exome sequencing.</a> Nature. 515 (7528), 572(2014).</li>
<li>Gros, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prospective+identification+of+neoantigen-specific+lymphocytes+in+the+peripheral+blood+of+melanoma+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+medicine%22%5BJournal%5D)">Prospective identification of neoantigen-specific lymphocytes in the peripheral blood of melanoma patients.</a> Nature medicine. 22 (4), 433(2016).</li>
</ol>

著者宣言次競合金融利益のため: NexImmune とジョンズ ・ ホプキンス大学との間のライセンス契約の下でジョナサン ・ シュネックこれで記載されている製品の販売に大学によって受信料の共有する権利があります。記事。彼も NexImmune の創始者、会社の株式を所有しています。NexImmune の取締役会、科学諮問委員会のメンバーを務めます。これらの契約条件が検討されており、その利益相反ポリシーに従って、ジョンズ ・ ホプキンス大学によって承認されました。

我々 は、ナノ人工抗原提示細胞 (aAPCs) に基づく新規抗原特異的 T 細胞の分離技術を作成しています。ナノ粒子 aAPCs ペプチド-読み込まれている MHC 抗原特異的 T 細胞のバインディングとアクティベーション共刺激活性化と一緒にことができる表面に。aAPCs は、常磁性、また、したがって磁場を用いた希少な抗原特異的 T 細胞を豊かにするために使用できます。我々 は最適化し、キー ナノ粒子特性サイズ、リガンド密度と配位子の選択肢とそのバインディング、濃縮、アクティブ化、および細胞濃縮 (補足ファイル 1 ボックス 1) に及ぼす影響を検討しました。
したがって、いくつかの抗原特異的 cd 8 + T 細胞伸長の濃縮と拡張プロシージャの結果高として抗原特異的割合を 60% に thousand-fold 生産と、マウスと人間の両方の設定 (補足ファイル 2 ボックス 2で使用することができます。).このような高い数字と抗原特異的 T 細胞の割合は病気に対する免疫応答の解析を有効にする (e.g</...

多くの免疫療法の上昇、特性し、免疫応答を制御することができる必要があります。特に、適応免疫応答は、関心の特異性とセルの耐久性のためです。最近では、キメラ抗原受容体の T 細胞療法がん治療として承認されましたしかし、抗原受容体は、がん1に固有の抗原ではなくに一般的な細胞表面抗原 CD19、オフに基づいています。を超えて、特異性免疫療法もコントロール、および限られたがんや自己免疫疾患に免疫応答を理解の欠如から苦しむことができます。
抗原特異的応答の研究の課題の一つは、超低周波、 e.g。、抗原特異的 T 細胞がすべての 10 の 14 106 T 細胞2,3。したがって、T を調査する細胞が存在または応答して、セルを充実・拡大し、する必要がありますまたはその信号を増幅する必要があります。高価、抗原特異的細胞の拡大に焦点を当てた現在の技術を使用してフィーダー細胞を維持することは困難です。抗原特異的 T の信号増幅に焦点を当てた現在の技術細胞、酵素 immunospot (しなさい) 試金のようなこれらの T 細胞4の再利用を制限します。最後に、感度が低いためしばしばこれらの 2 つの手法組み合わせることが必要抗原特定の列挙。
これらの問題に対処するため、磁性ナノ粒子を用いた人工抗原提示細胞 (aAPC)5,6,7、8を開発しました。AAPC は抗原特異的信号ペプチド ロード主要組織適合遺伝子複合体 (pMHC) と共刺激分子修飾することができます例えば、抗 CD28 抗体-抗原特異的 T 細胞を豊かにし、その後。(図 1) の拡大を刺激します。粒子は、抗原特異的刺激に合わせてカスタマイズまだ実験と患者全体で標準化することができますコスト効果の高い市販製品をすることができます。濃縮および拡張を実行する抗原特異的 cd 8 + T 細胞の数千倍の拡大に何百もの結果の処理、周波数で起因できる特性や大型の治療上の使用を有効にするちょうど 1 週間後に 60%セルの数。ここ、ナノ粒子 aAPCs、ナノ粒子のプロパティを選択する際にいくつかの重要な設計の考慮事項を確認する方法について説明し、これらの粒子を分離すると、希少な抗原特異的 cd 8 + T 細胞の拡大を利用してからいくつかの典型的な結果を示します。

<table><tbody><tr><td>DimerX I: 組換え可溶性二量体ヒト HLA-A2:Ig 融合タンパク質</td><td>BD Biosciences</td><td>551263</td><td></td></tr><tr><td>DimerX I: 組換え可溶性二量体マウス H-2D[b]:Ig</td><td>BD Biosciences</td><td>551323</td><td></td></tr><tr><td>DimerX I: 組換え可溶性二量体マウス H-2K[b]:Ig 融合タンパク質</td><td>BD Biosciences</td><td>550750</td><td></td></tr><tr><td>Vivaspin 20 MWCO 50 000</td><td>GE Life Sciences</td><td>28932362</td><td></td></tr><tr><td>Vivaspin 2 MWCO 50 000</td><td>GE Life Sciences</td><td>28932257</td><td></td></tr><tr><td>Purified Human Beta 2 Microglobulin</td><td>Bio-Rad</td><td>PHP135</td><td></td></tr><tr><td>nanomag-D-spio, NH2, 100 nm nanoparticles</td><td>Micromod</td><td>79-01-102</td><td></td></tr><tr><td>Super Mag NHS Activated Beads, 0.2 & micro;m</td><td>オーシャンナノテク</td><td>SN0200&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>抗ビオチンマイクロビーズ UltraPure</td><td>Miltenyi</td><td>130-105-637</td><td></td></tr><tr><td>EZ-Link NHS-Biotin</td><td>ThermoFisher</td><td>20217</td><td></td></tr><tr><td>Sulfo-SMCC 架橋剤&nbsp;</td><td>ProteoChem</td><td>c1109-100mg</td><td></td></tr><tr><td>2-イミノチオラン塩酸塩</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>I6256 Sigma&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>96ウェルハーフエリアマイクロプレート、黒色ポリスチレン</td><td>、コーニング、</td><td>3875</td><td></td></tr><tr><td>、FITC、ラット、抗マウスIg、ラムダ;1、&ラムダ。2、&&ラムダ;3 ライトチェーン&nbsp;クローン &nbsp;R26-46&nbsp;&nbsp;</td><td>BD Biosciences</td><td>553434</td><td></td></tr><tr><td>FITC マウス抗アルメニアおよびシリアハムスター IgG&nbsp;クローン &nbsp;G192-1</td><td>BDバイオサイエンス</td><td>554026</td><td></td></tr><tr><td>B6.Cg-Thy1a/Cy Tg(TcraTcrb)8Rest/J(トランスジェニックPMEL)マウス</td><td>Jackson Laboratory</td><td>005023</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6J(B6野生型)マウス</td><td>Jackson Laboratory</td><td>000664</td><td></td></tr><tr><td>CD8a+ T Cell Isolation Kit, マウス</td><td>Miltenyi</td><td>130-104-075</td><td></td></tr><tr><td>MSカラム</td><td>Miltenyi</td><td>130-042-201</td><td></td></tr><tr><td>LSカラム</td><td>Miltenyi</td><td>130-042-401</td><td></td></tr><tr><td>ストレプトアビジン-フィコエリスリン、SAv-PE</td><td>Biolegend</td><td>405203</td><td></td></tr><tr><td>N52 0.75インチのディスク磁石&nbsp;</td><td>K&J Magnetics</td><td>DX8C-N52</td><td></td></tr><tr><td>APC anti-mouse CD8a Anti-body クローン 53-6.7</td><td>Biolegend</td><td>100711</td><td></td></tr><tr><td>LIVE/DEAD Fixable Green Dead Cell Stain Kit, for 488 nm excitation&nbsp;</td><td>サーモフィ</td><td>ッシャーL-34969</td><td></td></tr></tbody></table>

豊かにし、磁性ナノ粒子でまれな抗原特異的 t 細胞を展開

Enrich and Expand Rare Antigen-specific T Cells with Magnetic Nanoparticles

両方豊かにし、抗原特異的 T 細胞を拡大するツールを開発しました。これは A) 抗原特異的 T 細胞の存在を検出、B) 抗原特異的応答のダイナミクスのプローブ、C) を理解するよう場合に有用することができます抗原特異的応答など自己免疫疾患の状態に影響を与える、どのように D) 分かり異種抗原特異的 T 細胞、または E の応答) は、抗原特異的細胞療法を利用します。ツールは、抗原特異的および T 細胞共刺激シグナルを共役我々 ことと人工抗原提示細胞 (aAPCs) として長期的に磁性粒子に基づいています。その結果、技術は生成に簡単です、のでそれが簡単に採用される; 他の所でしたがって、本研究の目的は作製と、aAPCs の後の使用について詳しく説明します。我々 は、aAPCs に特定の抗原、共刺激シグナルを添付する方法、抗原特異的 T 細胞を豊かにするそれらを活用する方法と抗原特異的 T 細胞を拡張する方法について説明します。さらに、我々 は設計の考慮事項は、抗原特異的 T 細胞を特徴と私たちの経験の実験的および生物学的情報に基づくを強調表示されます。

成功した濃縮と抗原特異的 T 細胞の拡大を完了するため、ペプチド負荷 MHC Ig と共刺激分子などへ aAPC 粒子に正常にアタッチする必要があります。粒子の添付ファイルの 3 つの方法に基づいて、成功活用手順結果 (図 5 a) のいくつかの代表的なデータをいたします。確かに、配位子濃度が低すぎる場合ができなくなりますこれが線形間隔 100 を超える配位子の周りに発生した抗原特異的 cd 8 + T 細胞の効果的な刺激の経験 (図 5 b)7nm。
両方定量的蛍光抗体読み出し、トランスジェニック cd8 陽性 T 細胞の拡張のほかは、同種組換え抗原特異的 cd8 陽性 T 細胞でのドーピングによって品質管理のナノ粒子 aAPCs をチェックできます。これは gp100 抗原特異的 c...

抗原特異的 T 細胞は特性またはその極低周波による治療を利用しにくい。本明細書で我々 はこれらの細胞を豊かにする抗原特異的 T 細胞に結合することができます磁性粒子を開発するためのプロトコルを提供し、それらをいくつか展開する特性評価および治療の両方の 100 倍。

豊かにし、磁性ナノ粒子でまれな抗原特異的 T 細胞を展開

We have developed a tool to both enrich and expand antigen-specific T cells. This can be helpful in cases such as to A) detect the existence of ...

そこで、私たちの新しい技術の主な利点は、濃縮と拡張を表すEプラスEと呼び、これらの細胞、まれな抗原特異的細胞を同時に豊かにし、拡大できることです。これにより、さまざまな設定や異なる臨床現場での役割を調査したり、免疫療法に利用できる多数の細胞を以前には不可能な方法で開発したりするのに十分な数の細胞を開発することができます。我々が開発した方法、このEプラスEは、ネオエピトープの存在に関する基本的な免疫学の重要な質問に答えるのに役立ちます。ネオエピトープとは何ですか?これらは、がん免疫療法の面で非常に重要であり、抗原特異的ダイナミクスの面でも、これらの要因が疾患状態と効果的な細胞療法にどのような影響を与えるかを知っているパーソナライズされたエピトープです。ナノ粒子人工抗原提示細胞は、個々の患者の免疫応答に合わせて容易に調整される既製の製品である可能性があるので、この技術の意味は免疫療法にまで及ぶ。ナノ粒子人工抗原提示細胞を生成するために、凍結乾燥した粒子を1ミリリットルの再懸濁液バッファーで再懸濁し、凝集体が見えないまで少なくとも15分間、懸濁液を激しく渦液にする。タンパク質との反応前に十分に渦を起こし、再懸濁されていない粒子は、解答することができないより大きな凝集粒子をもたらす。磁気スタンドに磁性粒子を置いて上清を取り除き、0.5ミリリットルのフレッシュリサスペンションバッファーで再懸濁します。凝集体が見えなくなるまで渦を起こすためにガラスシンチレーションバイアルに粒子懸濁液を移し、再懸濁粒子の1ミリグラム当たり0.1ミリグラムの総刺激信号を加える。ボルテックス後、懸濁液をローテーターで混合して室温で2.5時間反応させ、続いて0.1ミリリットルのクエンチバッファーを加え、混合して室温でさらに30分間インキュベーションします。2回目の反応の終わりに、シンチレーションバイアルを磁気スタンドに置き、1ミリリットルのリサスペンションバッファーで粒子を4回洗浄し、洗浄後に透明になったときに緩衝液を取り除き、その後の磁石で洗浄するためのフレッシュリサスペンションバッファに置き換えます。最後の洗浄後、溶液を吸引し、マグネットスタンドから粒子を取り除き、その後、最大6ヶ月間摂氏4度で新鮮な再懸濁液バッファーの1ミリリットルに粒子を保管します。抗原特異的CD8+T細胞を単離するには、野生のC57型黒6Jマウスの脾臓およびリンパ節を無菌、70マイクロメートルの細胞ストレーナーを介して頻繁にPBSリンスを介して浸食し、メーカーの指示に従って非CD8+T細胞分離キットを使用して非CD8+T細胞を排除します。カウント後、分離によって単離されたCD8+T細胞を収集し、0.5%牛血清アルブミンと2ミリモルEDTAを補ったPBSの100マイクロリットルのペレットを再中断し、ナノ粒子人工抗原提示

enrich-expand-rare-antigen-specific-t-cells-with-magnetic

Research

JoVE Journal

Engineering

工学

ここでは、人工抗原提示細胞（AAPC）を使用してバルクT細胞集団から、ヒトNKT細胞を活性化し、拡大するための方法を説明します。...

ナチュラルキラーT細胞の細胞（AAPC）媒介活性化と増殖を提示する人工抗原

エピトープ特異的T細胞の低周波の集団を区別し、フローサイトメトリーによって、それらを分析するためのMHCテトラマーと磁性マイクロビーズ：このプロトコルは、ペプチドの使用について説明します。この方法は、から対象の内因性T細胞集団の直接調査を可能に...

ペプチドエピトープ特異的T細胞のMHCテトラマーベースの濃縮

このビデオでは、磁気セパレーターを使用したネガティブセレクションによるマウスの脾臓からのT細胞濃縮について説明しています。この手法では、特定の細胞表面抗原に対する抗体またはリガンドを使用して、サンプル中の他の細胞を枯渇の標的にします。...

T細胞濃縮:磁気分離により混合細胞集団からT細胞を単離する技術

このビデオでは、抗原性ペプチドをロードしたMHC-Igsと抗CD28抗体で機能化された磁性ナノ粒子ベースの人工抗原提示細胞(aAPC)を使用して、希少抗原特異的CD8+ T細胞を単離するためのプロトコルについて説明しています。抗原性ペプチド標的T細胞受容体を特異的に発現するCD8+ T細胞とaAPCsとの相互作用、およびその後のin vitroでの増殖により、このCD8+...

ナノ粒子による抗原特異的CD8+ T細胞の濃縮と増殖

ここでは、強力な磁気モーメントと強い近赤外（NIR）吸光度磁気プラズモニックナノ粒子の合成のためのプロトコルを記述します。このプロトコルはまた、分子特異的な標的化を必要とするさまざまな生物医学アプリケーションのためのFc部分を介してナノ粒子への抗体結合が含まれています。...

Immunotargeted磁気プラズモニックナノクラスターの合成

ここでは、マウスの脾臓から大量のマウス不変ナチュラルキラーT細胞を生成するために使用できる適応プロトコルを紹介します。このプロトコールは、脾臓iNKT細胞を限られた数の動物および試薬を用いてin...

マウスの脾臓から不変ナチュラルキラーT細胞を単離および拡張するための最適化方法

コバルトドープマグネトフェリチンの合成とカチオン化のためのプロトコールと、カチオン化マグネトフェリチンで幹細胞を迅速に磁化する方法が紹介されています。...

細胞の超高速磁化のためのカチオン化Magnetoferritinの合成

機能的および表現型分析のために、抗原反応性B細胞を検出し、豊かに磁性ナノ粒子を使用するシンプルで効果的な方法が記載されています。...

表現型および機能解析のためのレア抗原特異的B細胞の検出および濃縮

我々は、マウス脾臓から不変ナチュラルキラーT(iNKT)細胞を濃縮し、インビトロおよびインビボ研究に適した数にそれらを拡大するための迅速かつ堅牢なプロトコルを記述する。...

インビトロおよびインビボ研究のためのマウス不変性ナチュラルキラーT細胞の精製と拡大

私たちは、磁気ビーズベースのT細胞濃縮およびペプチド:主要組織適合遺伝子複合体(MHC)四量体を通じて、マウス肺の希少抗原特異的T細胞集団を単離および同定するための詳細なプロトコールを提供します。...

ペプチド:主要組織適合遺伝子複合体四量体を用いたマウス肺由来の希少抗原特異的T細胞の同定

学ぶ磁性ナノ粒子を用いたE plus E法による希少な抗原特異的T細胞の濃縮・増殖技術。がん免疫療法や個別化医療への応用可能性を探る革新的な細胞治療アプローチです。

豊かにし、磁性ナノ粒子でまれな抗原特異的 T 細胞を展開

さらに動画を探す