Name: マウスの消化管吻合の作成 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 22 s
Description: 学ぶマウスの結腸吻合術による消化管創傷治癒メカニズム。無菌的手技と組織学的解析を用いて、吻合部漏れの予防と治癒因子を解明する再現性の高い動物モデルを確立します。

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次のプロトコルは、オクラホマ大学健康科学センター施設動物ケアおよび使用委員会 (IACUC) によって承認されているし、研究の動物の使用に関するすべての制度的倫理的なガイドラインに準拠しています。さらに、動物実験に関する制度、州および連邦の規制に従ってすべての実験を行った。
注: このプロトコルの 72 に 12 週齢で女性と男性コンジェニックで飼育された C57BL6/J マウスを使いました。この手順で使用されるすべてのマウスは、ローカルのバイオームに適応する操作の前に、少なくとも 1 週間の私たちの非バリア施設で保たれました。操作の時間供給する動物、経口機械的腸管もプロシージャ前に直腸洗浄を使いました。
1) 吻合の作成
<ol><li>オートクレーブ手術用器具、生理食塩水灌漑解決を暖めるし、70% のエタノールで手術表面を徹底的に掃除します。</li>
	<li>麻酔を誘導して、気化器に接続されている誘導ボックスにマウスを配置します。マウスを鎮静するまで 1-2 L/分で 2-3% イソフルランを提供します。</li>
	<li>低体温症を防ぐために、加熱パッドなど、地球温暖化のデバイスに動物を配置します。</li>
	<li>1 つを皮下注入術前抗菌薬予防投与のエンロフロキサシンの 10 mg/kg の線量 0.1 mg/kg ブプレノルフィン (30 g マウス 3 μ g) の術後鎮痛のための時間投与量と 1 つの時間。 注: 術前・術後の抗生物質がこの操作に必須ではないが制度のガイドラインや動物ケアおよび使用委員会私たちの施設での使用をお勧めします私たちの機関で。</li>
	<li>マウスの鼻周り麻酔の鼻の円錐形を配置します。操作の間慎重に動物の呼吸を監視し、必要に応じて麻酔の流量を調整します。1 分あたり 30 40 呼吸で呼吸を維持します。</li>
	<li>腹部の全体の皮膚の表面から毛を削除するのに後脱毛剤にバリカンを使用します。徹底的に水または 70% エタノールで湿らしたガーゼで脱毛のエージェントを削除します。動物を徹底的に乾燥させます。</li>
	<li>腹部を準備中、前に加熱パッドやマウスが手術中にシフトすることを防ぐために各脚の終わりに手術面にマウスの手足をテープします。クロルヘキシジンと腹部を消毒します。剃毛エリアの端に髪の毛と同様、全体の剃毛エリアが含まれます。マウス (図 1 a) に滅菌ドレープを置きます。<ol>
<li>ドレープ、前に準備中の腹部を公開するドレープに卵形または長方形の小窓をカットします。 注: ウィンドウがマウスの腹部全体を公開する必要があります、手足、尻尾、頭、胸郭をカバーします。私たちの操作 (図 1 b) 4 × 3 cm2ウィンドウをカットします。</li>
		<li>プロシージャ (図 1) の間に直腸へのアクセスを許可するように、卵形または長方形窓に向かって下端からのドレープの正中線に沿って小さなスリットを作る。</li>
	</ol></li>
	<li>皮膚切開を行います。下腹部の正中線に沿って起動し、剣を縦にハサミで皮膚を切開します。皮膚のみを切開し、腹壁筋肉 (図 2 a) を切断しないでください。</li>
	<li>腹壁の正中線を鉗子でつかんで持ち上げて腹部の内容から。世話をしないように腹腔内構造物を傷つける、鋭いハサミで正中線腹部筋の長さを縦に切開します。皮膚切開 (図 2 b) の長さを拡張します。</li>
	<li>腸が公開されると、盲腸や小腸、検索、降順と s 状結腸を公開する内側左サイド内臓を回転させます。潤滑ゼリーと鈍プローブ先端をコートし、降順/s 状結腸結腸 (図 3) の識別に役立つ直腸にプローブを慎重に進めます。 注: 人間と違って、腹部の左上腹部には一般的にマウス盲腸が見つかった。この手順でプローブと腸の壁に穴を開けるように注意してください。腸の壁に穴があいて、プロシージャを終了し、マウスを安楽死させます。<ol>
<li>歯や尖ったピンセットで盲腸を把握しないでください。代わりに非外科的鉗子を使用、綿の先端アプリケータや内臓を回転する穏やかな指操作。</li>
		<li>使用は、露出した腸を保湿し、プロシージャ全体を確実に滅菌生理食塩水を温めた。</li>
		<li>コロンは、正中線の左側になります、腸間膜で後腹膜に接続されています。識別後、colotomy を容易にするために部分的に鈍的プローブを撤回します。</li>
	</ol></li>
	<li>S 状結腸の横 colotomy を実行します。<ol>
<li>優しく非外科的鉗子 (図 4 a) で骨盤の入口に優れた s 状結腸を把握します。</li>
		<li>コロンとコロンの幅に 80-90% の間で及ぶ方向に垂直な s 状結腸の間でカットをする鋭いマイクロはさみを使用して。これは大腸外科の分野のうちの一方の端の収縮を防ぎ、修理 (図 4 b) を助けます。</li>
		<li>腸間膜血管が内臓回転または colotomy の過程で負傷されている場合そっとガーゼや綿の先端アプリケータまで 2 分間圧力を保持します。出血が続くこの時間後場合、は、8の字の出血の点 8-0 モノフィラメント縫合糸を配置します。 注: 腸壊死やこの後の損傷の兆候を示している場合、プロシージャを終了して人道的な方法あなたの制度上の動物の使用委員会の承認を使用してマウスを安楽死させます。</li>
	</ol></li>
	<li>S 状結腸の colotomy を修復します。<ol>
<li>カストロヴィーホー針ドライバーを使用、人工肛門を修復する 5-6 簡単な中断 8-0 裁断ポリプロピレン ステッチを配置します。縫合 0.5 mm 刺され互いから離れて 1 mm を配置します。<ol>
<li>それぞれのステッチ粘膜よりわずかにより多くの漿膜を取って修理に腸の端を圧延を避けるために注意してください。5 mm 長い尾を残します。縫合糸 (図 4) に誤って周囲腸をキャッチしないように注意してください。 注: で縫合を開始すると便利です、最後の colotomy の反 mesenteric ほとんどの部分を保存、colotomy の腸間膜の国境近きます。</li>
			<li>修理の進行により、最終的な縫合線を配置する前に、修理にまたがる事前トランス アナル郭清の鈍い先端プローブ。これは狭すぎる修理を防止し、吻合部狭窄率を減らすを助けます。</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>温めた生理食塩水で満たされた 10 mL の注射器を使用して、何度も腹部に水を引きます。マウス下の表面がずぶぬれになると、マウスを乾燥または乾燥表面に低体温症を避けるためにマウスを移動します。<ol>
<li>過剰なかんがいを吸収する切開部に滅菌ガーゼを使用します。</li>
		<li>最終的な洗浄で滅菌生理食塩水で腹部を埋めます。慎重に直腸に潤滑 18 G 血管カテーテルを進めるし、膨らませる 0.5 - 1 cm3の空気の。これは別ポリプロピレン縫合と吻合部にまたがる滅菌プローブを使用して修復することができますより吻合部に任意のリークを示します。</li>
		<li>コロンの除去の前に血管カテーテルを使用して空気を抜きます。</li>
	</ol></li>
	<li>活動性出血がないことを確認します。ある場合、出血が続く場合は、上記のように 1 ~ 2 分位止血縫合の出血の点に直接穏やかな圧力を適用します。</li>
	<li>Medialized の内臓を正常な解剖学的位置 (図 5 a) にゆっくり戻ります。</li>
	<li>腹部切開 (図 5 b) を閉じます。<ol>
<li>4-0 吸収性の編みこみ縫合糸を使用して、腹壁切開の上部に開始し、切開部の下面に仕上げの筋層に沿って実行縫合を配置します。ネクタイをインストールし、5 mm の尾を残して縫合糸をカットします。 注: は、腹壁閉鎖で腸を誤って含めないようにします。</li>
		<li>(図 5) 皮膚を閉じます 4-0 モノフィラメント縫合糸で繰り返します。</li>
	</ol></li>
	<li>全体の動物が暖かく、乾燥、術後低体温症を防ぐためにことを確認します。</li>
	<li>それが麻酔から回復するように、動物を注意深く監視します。疼痛コントロールのため、手術後 2 〜 3 日のブプレノルフィン 0.1 mg/kg ごと 72 時間を管理します。 回復期間中にマウス検討すべき慎重に毎日膿瘍や敗血症腹膜の兆候。 痛みや苦痛の術後観察を含める必要があります: ハンチング姿勢、食べるか飲む、適切ではないグルーミング, 切開のサイトで正常に治癒の欠如、傷周囲の過剰な炎症の欠如の種類を含む運動の制限や正常ではないネスト。 これらの動作のいずれかを示すすべての動物は、両側開胸下に続いて 10 分の最低 CO2窒息によりすぐに安楽死する必要があります。</li>
	<li>腹腔内感染症や、操作に関連付けられた糞便汚染による敗血症を防ぐために術後 7 日間のマウスの飲料水とエンロフロキサシンの 0.1 mg/mL を混ぜます。</li>
</ol>2) 収穫の吻合部組織
<ol><li>吻合部組織を切除、直前には、制度上の動物の使用委員会によって承認された動物愛護法を用いたマウスを安楽死させます。 両側開胸下を実行する前に、5 分の 2 L/分 100% 二酸化炭素ガス注入型炭酸ガス室にそれらを置くことによって私たち動物の安楽死制度政策に基づいて注意してください: 我々。</li>
	<li>クロルヘキシジン 70% エタノールが続くと腹部を滅菌します。</li>
	<li>再元の正中切開を鋭いハサミで切開します。前の切開の下極でスタートし、(図 6 a) 剣状に上方にこのカットを拡張します。</li>
	<li>はさみを使用して、カットの筋層、腹膜腔を入力した後、切開部の上下にカットを拡張します。腸切開吻合する付着した可能性があるので、腹部を入力するときに、腸を傷つけるや吻合部を中断することを避けるために注意してください。</li>
	<li>慎重に修復された s 状結腸 (図 6 b) を公開する左の内側の内臓回転を実行します。おそらく修理を取り巻く腸に腸の癒着があります。ゆっくりとにべもなく修理のサイトから離れてこれらの癒着を解剖します。吻合部を妨害しないように細心の注意を取る。<ol>
<li>修理のために使用されるポリプロピレン縫合糸のツインテールを配置することによってサイトの修復を識別します。はさみを使用して、開始 1 cm 修理、近位結腸を通じてトランセクト横。この手順 1 cm 遠位吻合部を繰り返します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>S 字状のセグメントを削除するには、大幅高級ハサミ (図 7) コロンの後縁に沿って取り付けられている腸間膜からコロンを解剖します。</li>
	<li>結腸標本の腸間膜の境界を識別し、縦ファッションで腸間膜の境界線の長さに沿ってカットする高級はさみを使用します。これは、円柱供試体以前に削除 (図 8) からコロンの正方形または長方形のセクションを作成します。</li>
	<li>コロンのセグメントの削除する前にコロンの抗腸間膜の国境を画定するのにマーキング ペンを使用します。除去した後、マーキングの反対側結腸の長さに沿って縦のカットにします。修正、埋め込み、組織および免疫染色に必要なサンプル組織をカットします。</li>
</ol>

<ol><li>Murrell, Z. A., Stamos, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reoperation+for+anastomotic+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Clinics+in+colon+and+rectal+surgery%22%5BJournal%5D)">Reoperation for anastomotic failure.</a> Clinics in colon and rectal surgery. 19, 213-216 (2006).</li>
<li>Shaban, F., Carney, K., McGarry, K., Holtham, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perforated+Diverticulitis%3A+To+Anastomose+or+Not+to+Anastomose%3F+A+Systematic+Review+and+Meta-Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22International+journal+of+surgery+%28London%2C+England%29%22%5BJournal%5D)">Perforated Diverticulitis: To Anastomose or Not to Anastomose? A Systematic Review and Meta-Analysis.</a> International journal of surgery (London, England). , (2018).</li>
<li>Chambers, W. M., Mortensen, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postoperative+leakage+and+abscess+formation+after+colorectal+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Best+practice%2C+research.+Clinical+gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Postoperative leakage and abscess formation after colorectal surgery.</a> Best practice, research. Clinical gastroenterology. 18, 865-880 (2004).</li>
<li>Ashkanani, F., Krukowski, Z. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgery+-+Oxford+International+Edition%5BTitle%5D)+AND+%22Intestinal+Anastomosis%22%5BJournal%5D)">Surgery - Oxford International Edition.</a> Intestinal Anastomosis. 20, 104-107 (2002).</li>
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<li>Pommergaard, H. C., Achiam, M. P., Rosenberg, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colon+anastomotic+leakage%3A+improving+the+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery+today%22%5BJournal%5D)">Colon anastomotic leakage: improving the mouse model.</a> Surgery today. 44, 933-939 (2014).</li>
<li>Bosmans, J. W. A. M., Jongen, A. C. H. M., Bouvy, N. D., Derikx, J. P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colorectal+anastomotic+healing%3A+why+the+biological+processes+that+lead+to+anastomotic+leakage+should+be+revealed+prior+to+conducting+intervention+studies%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Colorectal anastomotic healing: why the biological processes that lead to anastomotic leakage should be revealed prior to conducting intervention studies.</a> BMC Gastroenterology. 15, 180(2015).</li>
</ol>

著者は、彼らは競合する金銭的な利益があることを宣言します。

確実に成功し、この手順に関連する罹患率/死亡率を最小限に抑えるいくつか主要な手順があります。まず、腸組織の慎重な取扱いの確保し、コロンを公開する内臓を回転させるときに牽引損傷に気をつけましょう。腸や腸間膜に過度の緊張は、吻合部から腸や血管原因腸壊死の損傷をことができます。また、シャープな鉗子または歯の鉗子をいない使用腸を処理します。
内臓回転中または鈍的プローブを用いた穿孔による計画的吻合部から別の腸への損傷は動物の安楽死になります。我々 の経験で腸管壊死または損傷腹部敗血症や死と治癒後の吻合部試料の回収が難しく法外大幅に増加炎症反応につながります。
できるだけ多く、できるだけ下行結腸の大腸の切除にまたがる必要がありますが、ないトランセクト腸漿膜、腸間膜との接触には注意が必要があります。我々 の経験は、漿膜を含む断裂で-特に腸間膜が結腸吻合が難しく、引き込められたセグメントを回復しようとすると、それ以上の損傷につながる可能性の近位部の後退につながる。
5-6 縫合と吻合を...

腸の外科的吻合の高い恐ろしい合併症は吻合部の内訳や漏れです。腹腔内に管腔内内容の流出を引き起こす、腹部敗血症; に迅速につながる生命脅かすとすることができますは、吻合部のリーク衝撃率 0.3% から 5.5% 次の小腸吻合に変わるや結腸吻合1,226% と 0.5% の間に上昇します。次のリークの死亡率は、敗血症と腹腔内汚染3の死に急速な進行の迅速な発症のための 39% と高いことができます。予防戦略と治療現在、十分に理解されていない病態に基づいています。
現在、吻合部の治癒は、しばしば比較より広く研究皮膚創傷治癒には比較的貧しいファクシミリをあると証明します。癒しに一連の lag phase で始まる重複のフェーズで発生します。腸吻合の作成後 0-4 日間遅れ相は細胞の残骸の傷を消去する急性炎症反応によって定義されます。次に、3-4 日間で、線維芽増殖とコラーゲンの産生が fibrophasia 相を象徴します。最後に、10 日後コラーゲンリモデ リングの長期間は成熟フェーズと呼ばれます。コラーゲンが堆積4まで縫合吻合部の強度は非常に低く、外科的に置かれたステープルの外因性のサポートに依存することが重要です。役割を理解し、タイミング各吻合部創傷治癒および吻合部の故障を予知する解明のサロゲート マーカーと同様に、マクロファージなどによる炎症性細胞型の関与に果たしている腸の壁の層または成功の可能性があります。罹患率、死亡率、およびコロンの操作5医療費を大幅に削減します。
マウスのモデルは模倣人間吻合6で役に立つ以前の研究で示されています。マウスの結腸吻合モデル、特にコーメンらによって記述方法の例は人気、実績のある、よく研究しながら7、これらのモデルを支持する盲または昇順 colocolonic 吻合技術8。人間の患者の以前の研究では、回盲部、colocolonic、解剖学的位置の変化でさらに実験モデルの必要性を強調、大腸吻合間リーク率に有意差を示しています。通常の吻合部創傷治癒の9に必要な細胞メカニズムを解明するのではなく、意図的に吻合部のリークを作成するモデルの開発を目指しているを追加、一般に使用されるメソッド。ラット モデルは過去に試行されているが、吻合部裂開の料金やリーク (すなわち、膿瘍形成) 人間およびマウス6,7有意の兆候があります。さらに、ラットよりマウスより遺伝子組み換え実験線があります。これはラットのモデルを吻合部モデルのより少なく有用になります。さらに、ブタとイヌのモデルは、マウスモデル6,7よりも少ない臨床調査があった。
吻合部の創傷治癒10 の過少申告の機構をさらに調査する必要があります促進するマウスモデルにおける大腸吻合の作成のため安全、技術的に簡単な簡単かつ迅速に再現可能な手順を提案します。.

<table><tbody><tr><td>C57BL6/Jマウス</td><td>Jackson Labs</td><td>#00664&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>フィッシャーブランド吸収性アンダーパッド、20 "x 24"</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td>14-206-62</td><td></td></tr><tr><td>ポリライニング滅菌フィールド、18 "x 24"</td><td>ブッセ病院使い捨て</td><td>696</td><td>長方形の穴を開ける&nbsp;</td></tr><tr><td>イソテシア・イソフルラン</td><td>Henry Schein&nbsp;</td><td>50033</td><td></td></tr>フィ<tr><td>ッシャーブランド滅菌綿ガーゼパッド、4 "x 4"</td><td>フィッシャーサイエンティフィック</td><td>22-415-469</td><td></td></tr><tr><td>プラルベワセリン眼軟膏、1/8オンスチューブ</td><td>Dechra獣医製品</td><td>NDC 17033-211-38</td><td></td></tr><tr><td>ナイール脱毛クリーム</td><td>教会&ドワイト株式会社</td><td>22339-05</td><td></td></tr><tr><td>Buprenex buprenorphine&nbsp; 0.3 mg/ml</td><td>Reckitt Benckiser Pharma Inc</td><td>NDC 12496-0757-5</td><td></td></tr><tr><td>1 ccインスリン注射器、27&nbsp;G</td><td>Becton Dickinson</td><td>329412</td><td></td></tr><tr><td>Chloraprep Shampoo</td><td>Medline</td><td>APL82287</td><td></td></tr><tr><td>Webcol アルコール調製スワブ</td><td>Covidien</td><td>6818</td><td></td></tr><tr><td>BioGel PI 手術用手袋</td><td>M&ouml;lnlycke ヘルスケア</td><td>ALA42675Z</td><td></td></tr><tr><td>歯付きマイクロ鉗子</td><td>Roboz</td><td>RS-5150</td><td></td></tr><tr><td>ファインハサミ - シャープ</td><td>ファイン サイエンス ツール</td><td>14060-09</td><td></td></tr><tr><td>ストレート 鋸歯状鉗子</td><td>ファイン サイエンス ツール</td><td>11050-10</td><td></td></tr><tr><td>カストロ ビエホ ニードル ドライバー</td><td>ファイン サイエンス ツール</td><td>12565-14</td><td></td></tr><tr><td>0.9% 塩化ナトリウム 灌漑</td><td>バクスター</td><td>BHL2F7121</td><td>37°Cまで暖かい。C使用前の</td></tr><tr><td>10mlシリンジ</td><td>ベクトンディキンソン</td><td>309604</td><td></td></tr><tr><td>4-0ビクリル吸収性編組縫合糸、18インチ、PS-2針</td><td>ヘンリーシャイン&nbsp;</td><td></td><td></td>6546037</tr><tr><td>ブルーモノフィラメント縫合糸24インチBV-1 ニードル</td><td>ヘンリー・シャイン&nbsp;</td><td>8305H</td><td>通常、両腕が付属しています。縫合糸を中間点で切断して、使用可能な2つの縫合糸を生成します。</td></tr><tr><td>コールパーマーマイクロハサミ、標準グレード、ストレート、4インチ。</td><td>コールパー</td><td>マーEW-10818-06</td><td></td></tr><tr><td>メドライン滅菌潤滑ゼリー</td><td>メドライン</td><td>MDS032273H</td><td></td></tr></tbody></table>

マウスの消化管吻合の作成

Creation of Colonic Anastomosis in Mice

腸管吻合は、一般科目と創発的操作に実行されます。それでも、吻合部リークは大腸手術の非常に恐れられていた合併症、外科的吻合の 26% までの死亡率 39% まで患者このようなリークをされていると発生する可能性が。現在、吻合部治癒の分子機構の詳細データの少なさが残っています。予防戦略と吻合部リークのための治療法を工夫することは、適切な吻合部の治癒のよりよい理解によって大幅増強する。
マウスモデルはマウスの吻合が他の動物と比較して人間のケースに臨床的に最も似ている以前の研究が示したように最適です。我々 は結腸吻合術吻合部治癒のさらなるイラストは、マウスで簡単に再現できるマウスモデルを提供しています。

7 日術後、吻合する必要がありますも癒されます。吻合部は後より 7 日間は、吻合部の治癒の段階を示して前に、時点で収穫することができます。図 9、組織学的分析の結果、線維 (コラーゲン ヒアリンの汚損によって視覚化) 平滑筋 α アクチン陽性芽によって仲介される応答。ただし、マウス、特に再上皮化および吻合部に芽の濃度の程度間組織学的解析の結果が異なることがわかった.この手順は、7 日間でよく治癒吻合を持つマウスを存続の 90% 以上 10% 未満に死亡率を報告する.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58742/58742fig1.jpg"> 図 1:ドレープと手術準備します。A (A</stro...

吻合部リークまたは手術後の内訳は、術後合併症と死亡率の主要な原因です。結腸吻合を作成するための手術は、吻合部の治癒のメカニズムを研究するため信頼性が高く、再現性のある方法です。

Intestinal anastomoses are commonly performed in both elective and emergent operations. Even so, anastomotic leaks are a highly feared complications of ...

この方法は、コロコロニック・アナストモーゼの治癒メカニズムに関する重要な質問に答えるのに役立ち、解剖学的リーク率とその潜在的に壊滅的な結果を減らすためのモデルを提供する可能性があります。我々の技術は、ヒト患者と同様の臨床リーク率を有する動物モデルにおいて、コロ大腸性または直腸吻合を行うための比較的簡単で再現可能な方法を提供する。麻酔をしたマウスの手足を外科用表面に固定し、露出した腹部をクロルヘキシジンで消毒することから始めます。次に、動物の上に無菌のドレープを配置し、下腹部の正中線に沿ってxiphoidに皮膚切開を行います。鉗子を使用して腹壁の正中線を持ち上げ、腹腔内構造を傷めないように注意して、正中腹部筋膜の長さを切り傷まないようにします。腸が露出したら、盲腸と小腸を見つけ、左側の内臓内側を回転させて下降およびシグモイド結腸を露出させる。その後、湿った滅菌ガーゼで内臓を覆います。鈍いプローブチップに潤滑ゼリーをコーティングし、プローブを直腸に慎重に進め、下降シグモイド結腸の同定を支援します。結腸が特定されたら、プローブを部分的に引き出し、外傷性鉗子を使用して骨盤入口よりも優れたシグモイド結腸を優しく把握する。鋭利なマイクロハサミを使用して、シグモイド結腸に沿って切り取り、腸組織に垂直に、結腸の幅全体で80〜90%延長する。内臓回転や人工肛門の過程で腸間膜血管が損傷した場合は、最大2分間、損傷を見て静かに圧力をかける。シグモイド人工肛門を修復するには、カストロビエホニードルドライバーと5〜6回の簡単な中断8 O非吸収性ポリプロピレンステッチを使用して人工肛門を修復します。腸間間関係の国境で吻合を行い、反腸間間国境に二国間で働くことは、特許および非狭窄吻合を確実にするのに役立ちます。修復が進むにつれて、トランス肛門、鈍い先端解剖プローブを進め、最初の縫合糸が配置される前に修復を行い、修復が狭くなりすぎるのを防ぎ、解禁狭率を低下させる。すべての縫合糸が置かれたら、温めた滅菌生理食塩水で満たされた10ミリリットルの注射器を使用して腹部を数回灌漑する。最後の灌漑の間に無菌生理食塩水で腹部を満たし、注意深く麻酔内の漏れの識別のために、空気の5〜1立方センチメートルで結腸を膨らませるために直腸に潤滑、18ゲージアンジオカテーテルを進めます。その後、修理のために追加の縫合糸を配置し、漏れがないことを確認するために再び結腸を膨らまします。除去する前に血管カテーテルで結腸を収縮させ、媒化内臓を正常な解剖学的位置にそっと戻す。4つのO吸収性編組縫合糸を使用して腹部切開を閉じ、腹壁の筋肉層に沿って縫合を行い、切開の最上部から始まり、切開部の下面で仕上げる。次に、4つのOモノフィラメント縫合糸を使用して皮膚を閉じ、麻酔から完全に回復するまでマウスを監視します。適切な実験終点で、クロ

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マウス回腸ループモデル:マウスの腸透過性を研究するための手術モデル

このビデオでは、マウス近位結腸ループまたはpcLoopセグメントを生成する外科的処置と、その後に蛍光マーカーをセグメントに注入して腸上皮透過性を研究する手順について説明します。...

マウス近位結腸ループモデルの生成:管腔内注射後の血清中の蛍光マーカーの検出により、近位結腸ループを生成し、腸の透過性を測定する外科的処置

過去数年間、新世代内視鏡は、ネズミ大腸炎および結腸直腸腫瘍を評価するための重要な診断研究助剤として浮上している。私たちはここに、マウスにおける炎症と大腸腫瘍の内視鏡的な評価だけでなく、大腸炎および大腸腫瘍の内視鏡的重症度を記録するために小数の識別子を使用して新たなスコアリングシステムのための詳細なプロトコルを提示する。...

検証済みの内視鏡スコアリングシステムを使用して、大腸炎および結腸直腸腫瘍の重症度を評価するためにマウスでの柔軟な大腸内視鏡検査

回腸切除術は、いくつかのヒトの疾患で一般的に行われていますが、腸切除術が外科的疾患に与える影響についてはほとんど知られていません。この記事では、マウスで手順を高い成功を収めて実行するための手順を説明し、疾患のモデルにおける回結腸切除の効果を研究する手段を提供します。...

プライマリ吻合とネズミ回結腸腸切除

分節型アデノクロス感染による結腸直腸癌の遺伝子操作されたマウスモデルの確立および高解像度大腸内視鏡によるその監視が提示されている。...

散発性結腸直腸癌の遺伝子操作マウスモデル

マウスの遠位人工肛門は、人間転換大腸炎、糞便のストリームから除外コロン...

マウスの遠位人工肛門、転用 c57bl/6 マウス大腸炎の新たなモデル

提示されたプロトコルは、マウスにおける付録(caecalパッチ)の顔外科的除去を記述し、続いて炎症性腸疾患関連結腸直腸癌の誘導を示す。このマウス虫垂切除モデルは、ヒト胃腸疾患の病因における虫垂の生物学的役割の調査を可能にする。...

慢性大腸炎関連大腸癌のマウス虫垂切除モデル、ケーカルパッチの正確な局在化

調節不整合な腸上皮バリア機能および免疫応答は、生理学的モデルの欠如のために十分に調査されていない炎症性腸疾患の特徴である。ここでは、生体内での粘膜透過性および白血球の採用を研究するために、十分に血管化され、外装された腸セグメントを採用したマウス腸管ループモデルについて述べている。...

標準化腸ループモデルを用いたマウスにおける腸透過性と好中球経上皮移動の機能評価

単一吻合十二指腸回腸バイパス(SADI-S)は、重要な代謝効果を伴う新しい肥満手術です。本稿では、マウスにおけるSADI-Sの信頼性と再現性のあるモデルを紹介します。...

マウスにおけるスリーブ状胃切除モデルを用いた単一吻合十二指腸回腸バイパス術

腸の操作によって生成された術後イレウスのマウスモデルについて説明します。胃腸トランジット機能、病理学的変化、および免疫細胞の活性化は、手術の24時間後に評価されました。...

術後イレウスマウスモデル

学ぶマウスの結腸吻合術による消化管創傷治癒メカニズム。無菌的手技と組織学的解析を用いて、吻合部漏れの予防と治癒因子を解明する再現性の高い動物モデルを確立します。

マウスの消化管吻合の作成

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