An Improved and High Throughput Respiratory Syncytial Virus (RSV) Micro-neutralization Assay

Lien Anh Ha Do; Reuben Tse; Jordan Nathanielsz; Jeremy Anderson; Darren Suryawijaya Ong; Keith Chappell; Kim Mulholland; Paul V. Licciardi

doi:10.3791/59025

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Medicine

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An Improved and High Throughput Respiratory Syncytial Virus (RSV) Micro-neutralization Assay

高スループットの改善された呼吸器合胞体ウイルス (RSV) 微量中和試験

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09:14 min

January 26, 2019

DOI: 10.3791/59025-v

Lien Anh Ha Do^1,2, Reuben Tse¹, Jordan Nathanielsz¹, Jeremy Anderson¹, Darren Suryawijaya Ong¹, Keith Chappell³, Kim Mulholland^1,2,4, Paul V. Licciardi^1,2

¹Murdoch Children's Research Institute, ²Department of Paediatrics,University of Melbourne, ³School of Chemistry and Molecular Bioscience,University of Queensland, ⁴London School of Hygiene and Tropical Medicine

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

本研究は、高スループットを説明します呼吸器合胞体ウイルス (RSV) の中和抗体の力価を決定するためのマイクロ中和アッセイのイメージングに基づきます。このアッセイの形式は、別のサンプルタイプにテストされています。

呼吸間合質ウイルスに対する保護の重要なマーカーとして、RSV中和抗体を測定するための正確で高いスループット方法が必要です。この方法は、参照抗血清のアッセイ間の変動が10%未満であることで非常に再現性が高く、比較的低コストで世界中の多くの研究所でこのアッセイを容易に確立できると考えています。ここでは、RSVサブグループAで試験されたイメージングベースのマイクロ中和アッセイについて説明し、RSVサブグループB、および異なるサンプルタイプに適合させることもできます。

この手順のデモンストレーションは、MCRIの研究チームのメンバーであるルーベン・ツです。1日目にプレートをシードするには、まずDMEM培地でA549細胞を再懸濁し、10%FCSと1,000単位ペニシリン・ストレプトマイシン混合物を1ミリリットル当たり400,000細胞の濃度で再懸濁させた。その後、ウェルあたり100マイクロリットルの密度で40,000 A459細胞を持つ96ウェルフラットボトム滅菌プレートをシードします。

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