Induction and Scoring of Graft-Versus-Host Disease in a Xenogeneic Murine Model and Quantification of Human T Cells in Mouse Tissues using Digital PCR

Amara Seng; Mary  A. Markiewicz

doi:10.3791/59107

デジタルPCRを用いたマウス組織における異種マウスモデルにおける移植片対宿主病の誘導とスコア付け

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Immunology and Infection

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Induction and Scoring of Graft-Versus-Host Disease in a Xenogeneic Murine Model and Quantification of Human T Cells in Mouse Tissues using Digital PCR

デジタルPCRを用いたマウス組織における異種マウスモデルにおける移植片対宿主病の誘導とスコア付け

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06:06 min

May 23, 2019

DOI: 10.3791/59107-v

Amara Seng¹, Mary A. Markiewicz¹

¹Department of Microbiology, Molecular Genetics, and Immunology,University of Kansas Medical Center

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

ここでは、異種系移植片対宿主病(xenoGVHD)モデルにおける疾患を誘導し、スコア付けするプロトコルを提示する。xenoGVHDは、ヒトT細胞の免疫抑制を研究するためのインビボモデルを提供する。さらに、免疫抑制を定量化するツールとしてデジタルPCRを用いて組織内のヒトT細胞を検出する方法について述べた。

このプロトコルは、異種移植片対宿主病(xenoGVHD)を誘発する方法と、一貫した結果を確保するために臨床スコアリングを盲目および標準化する方法を概説する。xenoGVHDモデルは、マウスT細胞ではなくヒトに対する免疫抑制療法を試験するためのin vivo方法を提供し、これらの研究のクリニックへの翻訳を改善する。この手順を実証することは、私の研究室の大学院生であるアマラ・センです。

注射の前日、8〜12週齢の非肥満糖尿病性サイドガンマ、またはNSGを殺菌されたパイケージに入れたマウスを置き、セシウム137源のマウスを150センチグレイの総用量で照射し、ゆっくりと回転して均一な照射を確実にする。その後、無菌バイオセーフティキャビネットの中の清潔なケージにマウスを一晩置きます。翌朝、7つの末梢血単核細胞(PBMC)に1.1倍の10を単離するのに十分な健康なヒト血液を採取し、PBSでヘパリン化された血液を同量の2%ウシウシ血清(FBS)で希釈する。

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