Proteome-wide Quantification of Labeling Homogeneity at the Single Molecule Level

Simon Leclerc; Youri Arntz; Yuichi Taniguchi

doi:10.3791/59199

JoVE Journal
Biochemistry

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JoVE Journal Biochemistry

Proteome-wide Quantification of Labeling Homogeneity at the Single Molecule Level

プロテオーム的分類の単一分子レベルでの均一性の定量化

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08:29 min

April 19, 2019

DOI: 10.3791/59199-v

Simon Leclerc^1,2, Youri Arntz², Yuichi Taniguchi^1,3

¹Laboratory for Cell Systems Control, RIKEN Center for Biosystems Dynamics Research,RIKEN, ²Laboratoire de Biomatériaux et Bioimagerie,INSERM, ³PRESTO, Japan Science and Technology Agency

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

ここでは、単一分子レベルの複雑な蛋白質のサンプルのそれぞれのタンパク質種のラベリングの均質性を評価するためのプロトコルを提案する.

この方法は、液体サンプル中の定量タンパク質量を、カウント用の単一分子プロセスで較正する方法を示す。具体的には、タンパク質集団が各分子レベルで蛍光標識できる方法を示すことができる。これまでの方法では、蛍光分子とタンパク質分子のモル比を分析するためにバルク測定を行っていましたが、タンパク質集団が実際にどのように標識されているかを明らかにすることはできません。

我々の方法は、単一分子レベルで直接それを行うことができます。我々の方法は、超高感度かつ高度な分子濃度アッセイに拡張することができ、将来の診断方法につながり、検体中の病原性分子の効率的な発見を可能にする。我々の方法は、蛍光抗体を用いた単一タンパク質種分析、および電気泳動またはクロマトグラフィーによって分離されたすべてのタンパク質に対する非特異的標識を用いた複数種の分析に適用することができる。

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