Name: 細胞遺伝学的手法を用いたタバココナジラミの卵の受精率を決定します。 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-04-01T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 24 s
Description: 学ぶ細胞遺伝学的手法でタバココナジラミの卵の受精率を正確に決定する方法です。DAPI染色を用いて3時間で完了し、害虫管理や生態研究に応用できます。

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細胞刺戟する NSF grant (デブ 1020460) 細胞刺戟して米国農務省アフリカ グラント (2010-03752) によって資金が供給されたこの研究著者は、多くのスキルと禅コナジラミ卵の汚損のためブレナン ジョンゼをありがとうございます。著者は、マイク Riehle が彼の蛍光顕微鏡イメージングのための使用を許可することをありがちましょう。著者らは、卵画像スザンヌ ケリーとマルコ Gebiola をありがとうございます。著者は、実験中に重要な瞬間を助けるのためのスザンヌ ケリーとジミー コンウェイをありがとうございます。

注:室温換気エリアまたはヒューム フードの下ですべての作業を行うことを確認します。このプロトコルのすべて 'ドロップ' は、オペレーターの好みに応じて、5-20 μ L として定義されます。
1. 初期設定
<ol><li>きれいな葉のプレハブハウス女性コナジラミを許可します。産卵のアリーナのためクリップ ケージまたはペトリ皿の寒天培地に合うようにカットの葉があります。クリップ ケージまたはペトリ皿カバーを挿入したり削除大人に coverable 穴をあけます。また、すぐに氷の上収集した大人の容器を置くし、葉にそれらを預金し。卵で父方の前核に精子転移の観察を確実に産卵と卵注視特性から 60 分以上の時間を制限します。 注:卵葉から削除されませんは、大人の性比を記録する大人に飼育することができます。</li>
	<li>前に、コナジラミ産卵期間中に、まあ、1 つの端、パラフィンの膜表面が壊れないかどうかを確かめる (図 1) にパラフィン フィルムの部分をストレッチして、石鹸と水、それを乾燥で洗浄顕微鏡スライドを準備します。 注:パラフィンの膜は疎水性、半透明、フォームに液体を許可する低下しより簡単に見られる卵します。</li>
</ol>2. Dechorionation
<ol><li>ガラス パスツール ピペット、パラフィン フィルムに漂白剤溶液 (0.83% ナトリウム次亜塩素酸) の滴を追加します。 注:それは場合にのみ 2-3 個の卵は、各ドロップ卵を追跡する簡単です。また、大きな卵の数を管理するリン酸緩衝生理食塩水 (PBS) x 1 滴で卵を収集します。 注意:漂白剤は腐食性;処理漂白剤を吸い込まないようにと手袋を着用します。</li>
	<li>葉から大人のコナジラミを削除します。</li>
	<li>卵を明確に参照してくださいし、単独で卵を収集するには顕微鏡の下で、慎重に、プローブを用いた葉を配置します。プローブをするためには、45 ° または溶かされたピペット チップ (図 2) に心地よい働く角で minuten 地上ナダル ピンを挿入します。</li>
	<li>漂白剤または 1 × PBS に卵を転送します。1x PBS を使用している場合は、PBS ガラス パスツール ピペット一度すべての卵を収集し、卵に漂白剤を追加し、1 x を削除します。 注:卵を収集する際、花柄が葉から削除されるまで、その基本から卵をゆっくりと持ち上げます。花柄が粘着性で、漂白剤に浸漬さまで、卵がプローブの先端にこだわる一般的。 注:すべての試薬に独立したガラス パスツール ピペットを使用する勧めし、ピペットの先端を細く、コナジラミ卵を誤って吸引のリスクを軽減し熱で修正が可能します。残留物や汚染を防ぐため、使用後は必ず純水でピペットをきれい。</li>
	<li>10 分待ちます。1 h より古い卵の胚発生に興味がある場合は、最大 15 分の漂白剤で、卵を残します。 注:1 h まで古いの卵、10 分で十分です。</li>
</ol>3. 固定
注:これらの手順は、ハチのプロトコル17から取得されます。
<ol><li>ガラス パスツール ピペットで漂白剤 (絨毛膜の断片を含む) を削除し、それを破棄します。ガラス パスツールと氷酢酸の滴ピペットし、3 分待って追加します。 注意:ヒューム フードの下でこの手順に進みます。氷酢酸は腐食性;摩耗手袋とき氷酢酸を処理し、残留漂白剤との組み合わせでは特に、吸入しません。</li>
	<li>ガラス パスツール ピペットと氷酢酸を削除し、クラークのソリューションの滴を追加 (3:1 エタノール: 氷酢酸) ガラス パスツール ピペットします。ソリューションのほとんどが蒸発するまで待つ (か 10 分最大)。</li>
	<li>ガラス パスツール ピペットとエタノールのほとんどが蒸発するまで待機 (または 10 分 max) と卵を 70% のエタノールの滴を追加します。</li>
</ol>4. 染色
<ol><li>ガラス パスツール ピペットで任意の残留エタノールを削除し、ガラス pH 7.0 に近いを取得するパスツール ピペットで卵に 1 × PBS の滴を追加します。(図 3) 中に湿紙タオルで空のピペット チップ ボックスの乾燥などを防ぐために湿度チャンバーに顕微鏡のスライドを設定します。少なくとも 30 分を待ちます。 注:恒湿器は、乾燥を防ぐことができる限り、これは一時停止が必要な場合に最高のポイントです。</li>
	<li>ガラス パスツール ピペット、1 × PBS を削除し 0.1 μ g/mL DNA の蛍光染色 DAPI の滴を追加、ガラス パスツール ピペットします。暗い湿度チャンバー内で顕微鏡スライドを設定し、少なくとも 15 分を待機します。 注意:DAPI は刺激物、だから手袋をはめて処理します。</li>
</ol>5. 洗浄
<ol><li>ガラス パスツール ピペット DAPI を削除します。</li>
	<li>1 滴を追加 x TBST (5 x で作られた溶液トリスの 30 g、NaCl の 43.8 g、ポリソルベート 20、5 mL とナン3 [pH 7.5] 1.0 g から PCR グレード水 1 L にもたらした) ピペット ガラス パスツールと卵。1 を削除する前に 5 分を待つガラス パスツール ピペットで x TBST。この手順を 2 回繰り返します。</li>
</ol>6. 取付
<ol><li>最終的な洗浄後ピペット顕微鏡スライドのきれいな部分にパラフィン フィルムからすべての卵が慎重に。余分な 1 を削除する x TBST;メディアのマウントの 20 μ L を追加し、(20% と 80% のグリセロール 1 2 %n プロピルと x TBST)、卵の上にきれいなカバー スライドを配置。</li>
	<li>長期保存のため明確なマニキュアでカバー スライド シールし、2 ° C で暗闇の中でスライドを保存またはすぐに蛍光顕微鏡下で表示。</li>
</ol>

<ol><li>Charnov, E. L. Sex ratio in spatially structured populations. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCharnov%2C+EL+%22The+Theory+of+Sex+Allocation%22">The Theory of Sex Allocation</a>. May, R. M. , Princeton University Press. Princeton, NJ. 67-92 (1982).</li>
<li>Godfray, H. C. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGodfray%2C+HCJ+%22Parasitoids%3A+behavioral+and+evolutionary+ecology%22">Parasitoids: behavioral and evolutionary ecology</a>. , Princeton University Press. Princeton, NJ. (1994).</li>
<li>Bourke, A. F. G., Franks, N. R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBourke%2C+AFG+%22Social+Evolution+in+Ants%22">Social Evolution in Ants</a>. , Princeton University Press. Princeton, NJ. (1995).</li>
<li>Pascal, S., Callejas, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intra-+and+interspecific+competition+between+biotypes+B+and+Q+of+Bemisia+tabaci+%28Hemiptera%3A+Aleyrodidae%29+from+Spain%5BTitle%5D)+AND+%22Bulletin+of+Entomological+Research%22%5BJournal%5D)">Intra- and interspecific competition between biotypes B and Q of Bemisia tabaci (Hemiptera: Aleyrodidae) from Spain.</a> Bulletin of Entomological Research. 94 (4), 369-375 (2004).</li>
<li>Liu, S. -S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Asymmetric+mating+interactions+drive+widespread+invasion+and+displacement+in+a+whitefly%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Asymmetric mating interactions drive widespread invasion and displacement in a whitefly.</a> Science. 318 (5857), 1769-1772 (2007).</li>
<li>Crowder, D. W., Sitvarin, M. I., Carrière, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mate+discrimination+in+invasive+whitefly+species%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Behavior%22%5BJournal%5D)">Mate discrimination in invasive whitefly species.</a> Journal of Insect Behavior. 23 (5), 364-380 (2010).</li>
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<li>Cui, X., Wan, F., Xie, M., Liu, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+heat+shock+on+survival+and+reproduction+of+two+whitefly+species%2C+Trialeurodes+vaporariorum+and+Bemisia+tabaci+biotype+B%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Science%22%5BJournal%5D)">Effects of heat shock on survival and reproduction of two whitefly species, Trialeurodes vaporariorum and Bemisia tabaci biotype B.</a> Journal of Insect Science. 8 (24), (2008).</li>
<li>Boykin, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bemisia+tabaci+nomenclature%3A+Lessons+learned%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Management+Science%22%5BJournal%5D)">Bemisia tabaci nomenclature: Lessons learned.</a> Pest Management Science. 70 (10), 1454-1459 (2014).</li>
<li>Qin, L., Pan, L. -L., Liu, S. -S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Further+insight+into+reproductive+incompatibility+between+putative+cryptic+species+of+the+Bemisia+tabaci+whitefly+complex%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Science%22%5BJournal%5D)">Further insight into reproductive incompatibility between putative cryptic species of the Bemisia tabaci whitefly complex.</a> Insect Science. 23 (2), 215-224 (2016).</li>
</ol>

著者が明らかに何もありません。

このプロトコル受精率またはB. のタバココナジラミの一次性比をキャプチャする最初のです。このプロトコルへの挑戦はできない以上 1 h は、彼らが修正されるまで、卵が頭から経過したことを確認のコナジラミ卵を迅速に処理する方法について説明する研究者です。予備実験の間に 3 h またはより多くの postoviposition で固定した卵が配偶子が発生するいたし、の分裂が進められていた、受精を観察するには古すぎます。1 に 3 h 間前核を丸い形に取った。Syngamycan の準備のために 2 つの核の同格が 1 つの核のように見える 2 つの核の初期の存在では、受精卵を少し後を示します中、以降では男性と女性の卵の最初の分裂の 2 つの製品を発見するまた。したがって、男女間の区別は、これらの後の時点でクリアと保守的な措置として 1 h に固定する産卵から間隔を制限することをお勧めします。また、ピペットに誤って吸引されますない、液体の各転送で卵に優しくなるようにする方法を学習するは困難です。蛍光顕微鏡下で卵の表示の時に、卵黄がエスケープとそれらの卵を性欲を刺激され前核としてカウントできないので、プロトコルの中に卵の数が壊れ...

性配分に関する研究または男性および女性の子孫の相対的な投資行動生態1,2,3の礎石です。行動の適応モデルをテストするため、その力に加え生物のセックス割り当て戦略を知ることがその個体群の動態のモデルを向上します。多くの種で性配分は母親によって制御されます。セックスの割り当てを調べるには、産卵の時に一次性比や女性の割合を決定することが重要です。羽化で性比が性配分への手がかりを提供しますが、男性と女性の稚魚の間発達死亡率差分が大人の性比を大幅に偏る一般的可能性があります。ハチ、アリ、ハチやハチを含む昆虫の順序のいくつかの種の細胞遺伝学的アッセイ、遺伝的 DNA を表示する胚の汚損と一次性比が決定しました。ハエは haplodiploid なので初期オス卵は半数体と初期女性卵は二倍体で、男性と女性の両方前核 (2 n) が含まれている間のみの雌性前核 (n) が含まれています。コナジラミ科、sap 供給族 (半翅目) カメムシ、コナジラミとして知られているがまた haplodiploid、これらの昆虫で主の性比を見つける確立されたアッセイされてはいません。これはおそらく、意外なこの家族にいくつかの国際的な深刻な害虫の研究とコナジラミ4,5,6,7 の競争の相互作用性比の重要性強度を与えられました。 ,8,9,10と個体群動態の一般に。Haplodiploid 昆虫でも、性の比率にとらわれない選択受精と環境2変化する不安定性比の可能性を可能にするセックス定量システム。サツマイモ コナジラミと総称コナジラミの種複合体の主要な性比を把握する手法の紹介B. タバココナジラミ。この 1 つの種名以上 28 種世界11を包含する、最も有害なグローバル侵襲害虫12,13のいくつかが含まれています。B. タバココナジラミと他のコナジラミ科セックス割り当てパターンを決定するためのこの技術の応用は、温度、植物、細胞内共生細菌植物/コナジラミなどの変数のより厳密な調査になります病原体は、コナジラミ一次性比とコナジラミ個体群動態に影響を与える可能性があります。
B. タバココナジラミのための同等の卵染色テクニックと意識しております。プロトコルは、一晩固定ステップを省略し、したがって、3 h 以内に完了することができます他の昆虫の卵14用染色法と比較すると便利です。としてアプリケーション、細胞内共生細菌、リケッチアの sp nr の一例。bellii、 B. タバココナジラミ中東アジア マイナー 1 (MEAM1)15,16の研究室ライン女性のバイアスに関連付けられます。B. タバココナジラミMEAM1 研究室に 1 行で (「MAC1、「マリコパ農業センターから収集) 我々 はテストどうかリケッチアの感染 (R+) 女性 (R-) の感染していない女性よりより多くの卵を受精させます。

<table><tbody><tr><td>1x PBS</td><td>任意の</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1x TBST</td><td></td><td></td><td>30 g Tris、43.8 g NaCl、5 mL Tween-20、1.0 g NaN3 pH 7.5 から作られ、PCR グレードの水で 1 L に持ち込まれ</td></tr>た漂<tr><td>白剤</td><td>クロロックス</td><td></td><td>家庭用漂白剤は、0.83% に希釈できる限り機能します 次亜塩素酸ナトリウム</td></tr><tr><td>クリア マニキュア</td><td>任意の</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DAPIこの実験では、ジラクテート</td><td>サンタクルーズ</td><td>バイオテクノロジーsc300415</td><td></td></tr><tr><td>エタノール</td><td>70</td><td></td><td>%EtOH蛍光</td></tr><tr><td>顕微鏡</td>ニ<td>コン</td><td></td><td>ニコンエクリプス50iに使用されましたが、340/380 nm励起フィルターと少なくとも4-10倍の倍率を備えた任意の蛍光顕微鏡を使用できます</td></tr><tr><td>氷酢酸</td><td>マリンクロット</td><td>UN2789</td><td></td></tr><tr><td>グリセロール</td><td>Any</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microscope</td><td>Wild</td><td></td><td>AワイルドM5A顕微鏡を使用しましたが、オペレーターがコナジラミの卵をはっきりと見ることができる顕微鏡であれば、どの顕微鏡でも使用できます</td></tr><tr><td>顕微鏡スライドカバー</td><td>Any</td><td></td><td>Methodは18mm×18mmサイズのスライドカバー用です。より大きなスライドカバーの場合は、より多くの封入剤を追加する必要があります。</td></tr><tr><td>顕微鏡スライド</td><td>任意の</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Minuten nadel ピン</td><td>BioQuip</td><td>1208SA</td><td>Minuten nadel ピンは、ピペットチップ付きプローブとして成形するためのオプションです</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>任意の</td><td></td><td></td></tr><tr><td>NaN3</td><td>Any</td><td></td><td></td></tr><tr><td>n-propyl-galate</td><td>Sigma/Santa Cruz Biotechnology</td><td>P3130/sc-250794</td><td></td></tr><tr><td>パラフィルム</td><td>Bemis</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pasteurピペット</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-678-20A</td><td>Fisherbrand 使い捨てホウケイ酸ガラス パスツールピペット 5.75 in.オペレーターがピペットを長くしたり狭くしたりしたい場合は、ブンゼンバーナーも必要になる場合があります</td></tr><tr><td>PCRグレードの水</td><td>任意の</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ピペットチップ</td><td>任意の</td><td></td><td>ピペットチップは、minuten nadelピンでプローブとして形成するためのオプションです</td></tr><tr><td>小さなスポイト電球</td><td>任意の</td><td></td><td>パスツールピペットに収まる必要があります</td></tr><tr><td>トリス</td><td>任意の</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>任意の</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

細胞遺伝学的手法を用いたタバココナジラミの卵の受精率を決定します。

Determining the Egg Fertilization Rate of Bemisia tabaci Using a Cytogenetic Technique

Sap を吸うコナジラミのいくつかの種は世界の最も有害な地上の害虫の一部を作物損傷、植物ウイルスのベクトルの彼らのためです。異なる環境でこれらの種の生物学の多くの研究にもかかわらず、キーの生活史パラメーター、子孫の性の比率はほとんど注目されて、まだ個体群動態を予測することが重要です。タバココナジラミの一次性比 (産卵性比) ことが報告されているが、この haplodiploid の昆虫の卵の受精率を決定することによって見つけることができます。このテクニックは、漂白剤、一連の固定の手順、一般的な DNA 蛍光染色 DAPI (4 '、6-diamidino-2-phenylindole、DNA 結合色素)、女性と男性の前核にバインドするアプリケーションと卵の dechorionation を伴います。ここでは、技法と共生細菌、リケッチアの sp nr かどうかをテストするのには、そのアプリケーションの一例を提案します。bellii、 B. タバココナジラミの一次性比に影響。このメソッドには、コナジラミ、個体群の研究、ある特定の環境の刺激のセックス割り当てが存在する場合を決定するを助けるかもしれない。

リケッチア B. タバココナジラミMEAM1 女性の受精率に影響を与えるかどうかをテストするため飼育リケッチア-感染 (R+) または (R-) の感染ササゲ植物 (下におけるササゲ) B. タバココナジラミ27 ° C、相対湿度が 70%、16 h 光/8 h 暗い日長でケージを区切ります。R+と R- 4 齢コナジラミが慎重に葉から削除され 200 μ L ストリップ管で分離されました。大人が現れると、彼らは 50% 女性のグループに収集され、ペトリ皿にきれいな葉に転送 (n = ~50-100/leaf) 交配の 4 日間。約 20 女性といくつかの男性のグループが 35 mm ペトリ皿 1% 寒天培地の上にきれいなリーフ ディスク (R-大人、R+大人用に 1 つ) に転送されます。シャーレの蓋カットされていたし、封じ込めのため...

4 ′、6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) 受精率を決定して haplodiploid 侵襲的病害虫タバココナジラミの一次性比を使用して単純な細胞遺伝学的手法を提案します。

A few species of sap-sucking whiteflies are some of the most damaging terrestrial pests worldwide because of the crop damage they inflict and plant ...

Lizが開発したプロトコルは、私たちがホワイトフライ受精率を決定することを可能にします。この技術を応用することで、白ホエの行動や生態に対する理解が深まりつつあり、ホタルはハプロディプロイドであるため、受精率は卵巣位置における性比に等しい。このプロトコルは、私たちの知る限り、ホワイトフライのために最初に記述され、3時間以内に完了することができます。まず、ペトリ皿カバーに覆い込み可能な穴を作り、大人の白身を挿入して取り除きます。湿度チャンバーを設置し、溶融したピペットチップに快適な作業角度で薄いピンを挿入してプローブを作り、薄いプローブを作ります。必要に応じて、ホワイトフライの卵の取り扱いが容易になるため、ガラスピペットチップを熱で伸ばします。その後、メスのホチフライがきれいな葉の上にオビポジットできるようにし、ペトリ皿の寒天に収まるようにカットします。ホワイトフライのオビジポジションの間に、石鹸と水で顕微鏡スライドをきれいにしてください。よく乾燥させ、片方の端にパラフィンフィルムを伸ばして、液体が滴を形成し、卵がより簡単に見えるようにします。卵をデコール化するには、ガラス製のパスツールピペットを使用して、大人の除去と卵の収集の直前にパラフィンフィルムに83%次亜塩素酸ナトリウム漂白剤溶液を加えます。漂白剤と氷酢酸はいずれも腐食性です。彼らはフードや換気の良い領域で手袋で処理する必要があります。DAPIは刺激性もあり、手袋で扱う必要があります。その後、葉から成虫のホタルを取り出し、その葉を顕微鏡の下に置きます。ペディセルが葉から取り除かれるまで、各卵をベースから慎重に持ち上げます。このプロトコルを実行する前に、多くの卵の練習。卵をベースからゆっくりと持ち上げ、卵ペディセルが葉から取り除かれるのを見たら、葉から完全に持ち上げます。漂白剤の各滴に卵を2〜3個移し、10分間放置します。卵を固定するには、ガラスピペットを使用して漂白剤を捨てます。その後、氷酢酸を滴下し、3分間待ちます。次に、氷河酢酸を取り除き、クラークの溶液を滴下します。その後、溶液の大部分が蒸発するまで10分待ちます。70%エタノールを加え、10分間もう一度待ちます。卵を染色するには、まず残留エタノールを除去する。その後、卵に1xPBSの滴を加え、pHを7に近づけます。乾燥を防ぐために、顕微鏡スライドを湿度チャンバーに入れます。30分後、1xPBSを取り除き、1ミリリットルDAPIあたり1マイクログラムの滴を加えます。顕微鏡スライドを暗い湿度室に入れ、少なくとも15分待ちます。卵を洗うために、まずDAPI溶液を取り除きます。その後、卵に1xTBSTの滴を追加します。5 分後に 1xTBST を取り外します。この洗浄を2回繰り返し、合計3回の洗浄を行います。最後の洗浄の後、慎重に顕微鏡スライドのきれいな部分にパラフィルムからすべての卵をピペット。余分なTBSTを取り除き、20マイクロリットルの取り付け媒体を加えます。最後に、卵の上にきれいなカバースライドを置き、カバースライドを透明なマニキュアで密封して長期保存し、蛍光顕微鏡を用いてイメージングに進みます。卵のデコールリオネーションに続いてDAPI核染色を行い、蛍光顕微鏡で観察した場合の受精と胚性の割り当てを可能にした。雌の前核は、受精した雌の卵子と未受精卵の両方の中心付近にあり、精子は雌の卵子の頂点付近の明るい筋として見える。この技術の1つのアプリケーションは、細菌のendosymbiontsがホタルの原発性比に影響を与えるかどうかを判断することです。例えば、リケッチア感染と未感染のB.tabiciホワイトフライによって産卵された卵の一次性比は、2つの治療において性比に有意差を示さなかった。成人期まで飼育された卵子に関しては、リケッチア感染および感染していない成人にも同様の結果が見られ、少なくともこの研究では、リケッチア感染女性による受精率が高いという証拠はなかった。このプロトコルを使用することで、特異性精子が卵子を受精できるかどうかを判断することができます。受精が観察されない場合、女性の精子を見ることによって、交配中に精子が移されるかどうかをバックアップして見ることができます。受精が起こった場合、成人の性比と受精率を比較して、ハイブリッド子孫の発達の生存率を決定することができる。

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Research

JoVE Journal

Genetics

遺伝学

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24ウェル組織培養プレート(EAgaLプレート)を用いた Aedes aegypti のフェクアンディティと不妊治療アッセイの改善

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カエノラブディティス・エレガンスにおける胚の生存率とひなサイズの測定

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トランスジェニック ネッタイシマカ の適応コストの定量化

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線虫の世代間エピジェネティック遺伝の蛍光レポーターとクロマチン免疫沈降(ChIP)による解析

学ぶ細胞遺伝学的手法でタバココナジラミの卵の受精率を正確に決定する方法です。DAPI染色を用いて3時間で完了し、害虫管理や生態研究に応用できます。

細胞遺伝学的手法を用いたタバココナジラミの卵の受精率を決定します。

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