ラットの伝染性あくびを測定する実験室法

私たちのプロトコルは、ラットの伝染性あくびにどの感覚が関与している可能性かを調査する簡単な方法を提供するので、重要です。非侵襲的な手順の使用と、伝染性あくびを測定するための計算を高速化するアプリケーションソフトウェアの可用性は、この技術の主な利点です。この技術を行ったことがない個人は、各ステップに系統的に従い、観察ケースを構築する際に専門的なアドバイスを求める場合、実装における大きな困難に直面すべきではありません。

この方法の視覚的なデモンストレーションは、実験中の観察ケージの空間的配置を理解する際に役立ちます。治療の指定の誤りを避けるのに役立ちます。その手順を実証することは、私の研究室のポスドクであるイブリン・ベリステイン=カスティージョです。

テストセッションを設定するには、個々のケージの観察室に4匹のラットを移します。動物が順応している間、部屋を十分に点灯させる天井ランプの下に大きな長方形のテーブルの上に反転T字型のテーブルを置きます。各観察ケージの底にフィルターペーパーを置き、逆T字テーブルの両側にケージをペアで置きます。

ケージの各ペアの間に仕切り機を配置し、戦略的に 2 つのデジタル ビデオカメラを配置し、各ラットのペアのあくびの動作を記録します。ビデオカメラが三脚にしっかりと固定され、観察ケージに正しく向けられていることを確認した後、同時にラットの動作を監視するために、デスクトップコンピュータにビデオカメラを接続します。動物が15分間順応したら、以前に決定した割り当てに従って観察ケージに入れ、各ビデオカメラで自動フォーカスをオフに設定します。

ビデオ録画とストップウォッチを同時に開始し、60分の観察期間の終わりにビデオ録画を停止します。観察が終わったら、ネズミを動物施設の自宅のケージに戻し、食料と水にアクセスします。その後、その日の後続のテストセッションを実行するために設定された実験を準備する前に、無毒な洗剤で観察ケージを徹底的に清掃します。

最後のセッションの後、観測者のための任意の標準的な再生システムを使用して、コンピュータ画面上の各ビデオを再生します。観察者は、最初に各ビデオを見て、あくびの挙動を通常の速度でデータシートに1回観察して記録し、その後に遅い速度で追加の視聴を行い、あくびを観察して測定しやすくします。あくびをスコア付けするには、上付き文字として書かれた分を持つあくびの発生を表すために垂直線を使用します。

すべてのあくびが採点されたら、各ラットのあくびの一時的なシーケンスをスプレッドシートに書き起こす。あくびが最も近い分に記録された場合は、該当する分のあくびの数を入力し、特定の分であくびが発生しなかったときにセルを埋めるためにゼロを使用します。次に、ワークシートをテキスト ファイルとして保存します。

あくびが最も近い 10 進数の分に記録された場合は、シーケンスの上に入力します。行のあくびの数が列の数より少ないラット列の空白を埋めるには、NA を使用します。ラットに記録されたあくびの最大行数。

次に、ワークシートをテキスト ファイルとして保存します。すべてのデータが入力されたら、R.ファイルをR.Saveにテキストファイルをインポートし、拡張子コードRでプログラムコードを保存し、あくびが整数または小数の数字として記録されたかどうかに応じて、特定のプログラムコードをダウンロードします。次に、ラットの各ペアと必要な時間枠の数に対してプログラムを実行します。

実行の最後に、各ラットからのあくびの数をランダムに分布してプログラムを再実行します。あくびの伝染曲線を作成するには、スプレッドシートに保存したデータを使用して、ラットの各ペアの伝染率、時間枠、およびテスト状況から非伝染率を差し引き、観測データと人工データの分析を分離します。本代表的な実験では、不慣れな雄ラット間のあくびの伝染を、1分から10分に変化した時間枠の範囲にわたって測定した。

これらのあくびの伝染曲線は、穿穿不透明な分周器を有するケージ内のラット間の嗅覚通信のみがあくびの伝染を示したことを示す。平均の信頼区間が60分間にわたってランダムに割り当てられたあくびの数の信頼区間と重複しないため、これはタイムウィンドウ4以降から明らかである。バンドは、予想通り、観察期間における各ラットのあくびの数のランダムな割り当てが、明らかなパターンを示すことなく、ほぼゼロで振動するあくび率を生み出したことを示した。

この代表的な実験では、慣れ親しんだ雄ラットを用いたこの代表的な実験では、信頼区間がランダムに生成された信頼区間バンドと重なったため、4つの試験状況のいずれもあくびの伝染を刺激しなかった。さらに、ゼロスロープとは異なる10の時間枠にわたるあくびの伝染の全体的な増加にもかかわらず、4つの試験状況の間に違いはなかった。結果を正しく解釈するために、ラットの身近で見慣れないアイデンティティを追跡し、実験の間の観察ケージをきれいにすることを忘れないでください。

薬理学的処置は、聴覚通信を遮断し、伝染性あくびに対する聴覚効果を他の感覚からの効果から完全に分離するために使用することができる。この技術は、関係する感覚の両方の点で種全体の伝染性あくびを比較する道を開き、伝染性あくび曲線を比較することによって応答の強さを開いた。誤って壊れて怪我をする可能性があるため、観察ケージを慎重に処理することを忘れないでください。