Name: ラットにおける心筋虚血再灌流後の冠動脈流量の評価 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-06-28T13:20:00.000+00:00
Duration: 6 min 32 s
Description: 学ぶラットの冠動脈血流予備量比測定法。経胸壁ドプラーエコーで左前下行枝を可視化し、虚血再灌流後の微小血管機能障害を評価する非侵襲的技術を習得し、前臨床的心疾患モデルでの治療効果判定に活用できます。

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実験を行うための超音波装置を提供してくださったヘルムズリー財団に感謝申し上げます。この作業はNIA R01 053585助成金によってサポートされました。

すべての手順は、ルイビル大学の施設動物管理および使用委員会(IACUC承認プロトコル18223)および実験動物のケアと使用のためのNIHガイド11によって承認されたプロトコルに従って行われました。
1. 動物
<ol><li>研究のために4ヶ月の雌フィッシャー344ラット(BW〜150-180 g)を使用してください。</li>
</ol>2. IR手術前の超音波イメージング
<ol><li>イソムランでラットを麻酔する - 誘導室は1.5-2.0 L/min O2流れで5%、続いて1.5〜2.0%、1.5-2.0 L/分O2流れ。 この麻酔は、休息およびストレス段階の間、実験全体を通して維持される。</li>
	<li>動物をスナップの位置に置き、胸郭を剃ります。内蔵の温暖化プラットフォームを使用して、体温を37~38°Cに維持します。ソフトウェアを使用して心拍数を監視します。 注:適切な麻酔は、正常な生理的速度(295-350拍/分の間)で心拍数を維持するために重要です。</li>
	<li>イメージングの前に目の乾燥を防ぐために眼科獣医の歯質を適用します。</li>
	<li>13~24 MHzのリニアプローブ(MS250など)を使用して心エコー検査を実行します(図1A)。</li>
	<li>加熱されたプラットフォーム上のスナイン位置に動物を置きます。鼻コーンを介して麻酔が制御されていることを確認します。次に、プローブを配置して、レールシステム(図1B)を使用してパラスタール短軸ビュー(PSAX)を得ます。</li>
	<li>プローブをPSAXからrostral方向に動かし、肺動脈を見つけます(図1B)。</li>
	<li>プローブを肺動脈から方向に少し動かしてLADを見て、画像を保存します。 注:LADはカラードップラーなしで見つけるのが難しいので、LADのBモード画像は常に可能であるとは限りません。</li>
	<li>個人差でLAD冠動脈の見つけにくい場合は、以下の方法に従ってください。<ol>
<li>プローブを肺動脈に横に移動します。</li>
		<li>動物が傾斜、反転、またはわずかに右側に向かって傾くようにプラットフォームを角度を付け、左心室がプローブでより容易に見えるようにします。</li>
	</ol></li>
	<li>B モードのイメージをキャプチャまたはシネで保存したら、タッチスクリーン上のカラードップラー (図1C)をクリックします。冠状動脈を短軸で可視化(白い矢印はLADを示す)を短軸で可視化する(図1C)。赤色は、リアルタイムで見られるように、流れの方向を示す(すなわち、血流はプローブに向かっている)。</li>
	<li>カラードップラーモードでLADを視覚化した後、モードをパルス波(PW)モードに変更します。冠状動脈上に黄色のインジケーターラインが存在する(図2A)。</li>
	<li>黄色のPW線を冠動脈の中央に置く。角度が流れの方向に平行であることを確認します。 注:流れの速度はPWラインの角度に大きく依存するので、画面上のプローブの角度とLADの角度を一致するようにしてください。角度を調整するには、タッチスクリーンを使用してください。PW 角度は 60°未満にする必要があります。</li>
	<li>シネストアを使用して、ピーク拡張期における安静LAD冠動脈流の速度を波形として捕捉する(図2B)。</li>
	<li>安静時LAD流速を得た後、応力中のLADの最大流速を測定してCFRを計算する。応力中の最大流速を測定するには、尾静脈8(図2C)を介して20 μg/kg/minの用量でドブタミンを注入する。 注:ドブタミン注入は8分を超えてはなりません。<ol>
<li>尾静脈のカニュレーションのための25G注入蝶セットを使用する。注入針を置くには、ラットの尾のベースの周りにガーゼの小さなストリップを配置し、その後、ヘモスタットでつかみ、圧力を適用し、静脈を拡大させるトルニケットをねじります。</li>
		<li>ドブタミン注射器に直接接続しながら針を置きます。 注:尾静脈の針の適切な配置を確保するために血液を引き出す際に誤って薬物を導入しないように特別な注意を払います。また、塞栓症は動物に致命的な可能性があるため、気泡を静脈に導入しないようにしてください。</li>
		<li>針を置いたら、接着剤と外科テープで安定させ、尾部への注入ラインを確保する。</li>
		<li>流れを回復するために、ヘモスタットとトルニケットを削除します。</li>
		<li>ドブタミンシリンジを注入ポンプに入れ、20μg/kg/minを注入するように設定します。</li>
		<li>ドブタミン注入中, 慎重にLADピークと心拍数を監視.DOブタミンに応答して増加するたびに、ドップラーモードでLAD PWピークを定期的に記録します。 注:ドブタミンによって誘発されるストレスチャレンジは、心臓をより一生懸命働かします。これはしばしば心臓およびLADの動きをもたらす。LADを視野に入れておくために、動物、プローブ、またはその両方を動かす準備をしてください。</li>
		<li>LADのピークと心拍数が挑戦の間に高原した後、ドブタミン注入を停止し、尾静脈注入セットを取り除き、プラットフォームから動物を取り除く。動物が自宅のケージで回復できるようにします。</li>
	</ol></li>
	<li>図 2B および Cに示す画像からピーク拡張速度を取得するには、[ピーク ベル] ツールを選択します。 </li>
	<li>残りのLADピーク拡張期流速度に対するLAD応力(ドブタミン)ピーク拡張流速度の比としてCFR指数を計算する(図2A)。</li>
</ol>3. 虚血再灌流損傷
<ol><li>イソムランでラットを麻酔する - 誘導室は1.5-2.0 L/min O2流れで5%、続いて1.5〜2.0%、1.5~2.0 L/分O2流れ。</li>
	<li>ペダル離脱反射の欠如によって麻酔の深さを確認する。乾燥を防ぐために目に眼科獣医のチントを使用してください。暖房パッドまたは動物温度コントローラを使用して、37~38°Cの適切な体温を維持します。</li>
	<li>手術前のメロキシカムを投与し、5 mg/kgの筋肉内、手術前15分、続いて手術中の脱水を防ぐために0.9%の生理食塩水の2mL皮下ボーラスを投与する。無菌手袋や器具を使用し、無菌技術を採用しました。光ファイバ光源を用いて、18ゲージIVカテーテルを用いてラットを挿管し、人工呼吸器に接続する。</li>
	<li>8-0 を使用したリゲート LAD5番目の肋間スペースで15mmの開口部を通してモノフィラメント縫合糸。平いの結び目を結び、30分間放置し、心臓表面の変色を介してすべてのラットの虚血を目視で確認する12.30分後に合字を放出し、1-2分12分間の心筋の以前に変色した領域の赤化によって再灌流を確認する。</li>
	<li>中断された縫合パターンで4-0吸収性縫合糸を使用して肋骨ケージを閉じ、連続的な縫合パターンで5-0非吸収性シルク縫合を使用して皮膚を閉じます。</li>
	<li>麻酔から動物を取り除く。動物がホームケージで回復できるようにします。5mg/kgメロキシカムは、動物を安楽死させる前に24時間ごとに筋肉内に注射した(手術後72時間)。</li>
</ol>4. IR手術後の超音波イメージング
<ol><li>IR手術後72時間、冠動脈流とCFRを再度測定する。測定値を IR 測定前と比較します。前述の手順 2.1 から 2.15 を繰り返します。</li>
</ol>

<ol><li>Eltzschig, H. K., Eckle, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemia+and+reperfusion--from+mechanism+to+translation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+medicine%22%5BJournal%5D)">Ischemia and reperfusion--from mechanism to translation.</a> Nature medicine. 17 (11), 1391-1401 (2011).</li>
<li>French, C. J., Zaman, A. K., Sobel, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Failure+of+erythropoietin+to+render+jeopardized+ischemic+myocardium+amenable+to+incremental+salvage+by+early+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Coronary+Artery+Disease%22%5BJournal%5D)">Failure of erythropoietin to render jeopardized ischemic myocardium amenable to incremental salvage by early reperfusion.</a> Coronary Artery Disease. 20 (4), 295-299 (2009).</li>
<li>Marzilli, M., Mariani, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemia-reperfusion+and+microvascular+dysfunction%3A+implications+for+salvage+of+jeopardized+myocardium+and+reduction+of+infarct+size%5BTitle%5D)+AND+%22Italian+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Ischemia-reperfusion and microvascular dysfunction: implications for salvage of jeopardized myocardium and reduction of infarct size.</a> Italian Heart Journal. 2 Suppl 3, 40s-42s (2001).</li>
<li>Prasad, A., Gersh, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+of+microvascular+dysfunction+and+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+%28British+Cardiac+Society%29%22%5BJournal%5D)">Management of microvascular dysfunction and reperfusion injury.</a> Heart (British Cardiac Society). 91 (12), 1530-1532 (2005).</li>
<li>Ishihara, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+coronary+flow+reserve+immediately+after+coronary+angioplasty+in+patients+with+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22British+heart+journal%22%5BJournal%5D)">Impaired coronary flow reserve immediately after coronary angioplasty in patients with acute myocardial infarction.</a> British heart journal. 69 (4), 288-292 (1993).</li>
<li>Camici, P. G., d'Amati, G., Rimoldi, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+microvascular+dysfunction%3A+mechanisms+and+functional+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Coronary microvascular dysfunction: mechanisms and functional assessment.</a> Nature Reviews Cardiology. 12 (1), 48-62 (2015).</li>
<li>Chung, K. S., Nguyen, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+measures+of+coronary+microcirculation%3A+Taking+the+long+road+to+the+clinic%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nuclear+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Non-invasive measures of coronary microcirculation: Taking the long road to the clinic.</a> Journal of Nuclear Cardiology. , (2017).</li>
<li>Kelm, N. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose-derived+cells+improve+left+ventricular+diastolic+function+and+increase+microvascular+perfusion+in+advanced+age%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Adipose-derived cells improve left ventricular diastolic function and increase microvascular perfusion in advanced age.</a> PLoS One. 13 (8), e0202934(2018).</li>
<li>Pan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Late+recovery+of+coronary+flow+reserve+in+patients+successfully+treated+with+a+percutaneous+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22Revista+Espa%C3%B1ola+de+Cardiolog%C3%ADa%22%5BJournal%5D)">Late recovery of coronary flow reserve in patients successfully treated with a percutaneous procedure.</a> Revista Española de Cardiología. 56 (5), 459-464 (2003).</li>
<li>Samim, A., Nugent, L., Mehta, P. K., Shufelt, C., Bairey Merz, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+of+angina+and+microvascular+coronary+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Current+treatment+options+in+cardiovascular+medicine%22%5BJournal%5D)">Treatment of angina and microvascular coronary dysfunction.</a> Current treatment options in cardiovascular medicine. 12 (4), 355-364 (2010).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Guide+for+the+Care+and+Use+of+Laboratory+Animals%22">Guide for the Care and Use of Laboratory Animals</a>. , 8th edition, The National Academies Collection: Reports funded by National Institutes of Health (2011).</li>
<li>Ciuffreda, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+experimental+model+of+myocardial+ischemia%2Freperfusion+injury%3A+an+ethical+approach+to+set+up+the+analgesic+management+of+acute+post-surgical+pain%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Rat experimental model of myocardial ischemia/reperfusion injury: an ethical approach to set up the analgesic management of acute post-surgical pain.</a> PloS one. 9 (4), e95913-e95913 (2014).</li>
<li>van de Hoef, T. P., Siebes, M., Spaan, J. A. E., Piek, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fundamentals+in+clinical+coronary+physiology%3A+why+coronary+flow+is+more+important+than+coronary+pressure%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Fundamentals in clinical coronary physiology: why coronary flow is more important than coronary pressure.</a> European Heart Journal. 36 (47), 3312-3319 (2015).</li>
<li>Naya, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preserved+coronary+flow+reserve+effectively+excludes+high-risk+coronary+artery+disease+on+angiography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+nuclear+medicine+%3A+official+publication%2C+Society+of+Nuclear+Medicine%22%5BJournal%5D)">Preserved coronary flow reserve effectively excludes high-risk coronary artery disease on angiography.</a> Journal of nuclear medicine : official publication, Society of Nuclear Medicine. 55 (2), 248-255 (2014).</li>
<li>Cortigiani, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+and+prognostic+value+of+Doppler+echocardiographic+coronary+flow+reserve+in+the+left+anterior+descending+artery%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+%28British+Cardiac+Society%29%22%5BJournal%5D)">Diagnostic and prognostic value of Doppler echocardiographic coronary flow reserve in the left anterior descending artery.</a> Heart (British Cardiac Society). 97 (21), 1758(2011).</li>
<li>Kawata, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognostic+value+of+coronary+flow+reserve+assessed+by+transthoracic+Doppler+echocardiography+on+long-term+outcome+in+asymptomatic+patients+with+type+2+diabetes+without+overt+coronary+artery+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+diabetology%22%5BJournal%5D)">Prognostic value of coronary flow reserve assessed by transthoracic Doppler echocardiography on long-term outcome in asymptomatic patients with type 2 diabetes without overt coronary artery disease.</a> Cardiovascular diabetology. 12, 121-121 (2013).</li>
</ol>

著者は開示するものが何もない

本研究の主な知見は、IRが残存LAD冠動脈速度を増加させ、残留血管造影狭窄がない場合でもCFRを損なう。.
冠状動脈生理学を理解することは、心臓専門医が冠状動脈疾患を治療するための臨床意思決定の重要な部分です。CFRは、冠状動脈微小循環7、13の病態生理学を理解する上で重要な機能パラメータの一つである。CFRは、冠動脈狭窄と冠動脈微小血管循環の両方を評価する非侵襲的な方法であり、心筋血液供給の指標であり、ストレス条件下で血流を増加させる冠動脈の能力7を明示的に示す。通常のCFR(> 2.0)は良好な予後を反映することが多く、1.90未満のCFRは、リスクの高い冠動脈疾患14、15、16の同定のための増分診断情報を提供する。</sup...

心筋虚血再灌流(IR)は、血液供給が心臓に制限され、その後、灌流と同時再酸素化1の回復が続く状態である。冠状動脈の閉塞は塞栓またはコレステロールプラーク破裂によって引き起こされ、代謝の需給の深刻な不均衡を引き起こし、組織低酸素症を引き起こす。危険な心筋の救済は、左心室機能を改善し、急性心筋梗塞患者の生存率を高め、再灌流療法によって観察されている。しかし、冠動脈の再カナリゼーション後、小さな冠状血管の機能異常が2、3、4、5に起こりうる。患者のかなりの割合は、おそらく40%も、冠状動脈の流れの回復にもかかわらず、微小血管および心筋灌流を取り戻さない。冠状動脈微小血管系の可視化と評価は、生体内では困難な場合がありますが、冠状動脈微小血管機能に応じてパラメータを直接評価するために使用できる侵襲的で非侵襲的な技術が数多くあります6 、7.また、内皮機能は、CFR5を介して冠動脈循環のレベルで評価することができる。
経胸部ドップラー心エコー検査は、冠状動脈流速度およびCFR5を研究することを可能にする非侵襲的なツールである。CFRは、安静冠冠動脈血流8に対する最大冠動脈血流の比率を表す。ストレスチャレンジの間、正常な心臓は、安静時値の4倍まで冠状動脈血流を増加させる。CFRが9を減少させると心血管リスクが増加する。石原らは、冠状血管形成術5の直後にCFRが重度の障害を受けたことを示した。冠動脈狭窄がない場合、CFRは冠状動脈機能障害の間に減少し、安定した冠動脈疾患10の患者の約半分に存在する。
この方法の全体的な目標は、心エコー検査を介してラットにおける左前下冠動脈(LAD)機能の非侵襲的視覚化であり、これはCFRの計算に使用することができる。これは微小血管機能障害を診断し、潜在的な治療処置を評価するための重要な評価ツールを提供する。

<table><tbody><tr><td>10 mLシリンジ</td><td>BDシリンジ</td><td>302995</td><td></td></tr><tr><td>250S 13&ndash;24 MHz リニアプローブ</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ドブタミン塩酸塩</td><td>Sigma</td><td>D0676-10mg</td><td></td></tr><tr><td>イソフルラン</td><td>RRC</td><td>27376</td><td></td></tr><tr><td>Legato 100 シリンジポンプ</td><td>KD Scientific</td><td>788100</td><td></td></tr><tr><td>Vevo 3100</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc</td><td></td><td></td></tr><tr><td>翼付き輸液セット、27G x 1/2インチ、</td><td>Medline.com</td><td></td><td></td>TMOSV27ELZ</tr></tbody></table>

ラットにおける心筋虚血再灌流後の冠動脈流量の評価

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

冠状動脈疾患は、世界中の主要な死因です。急性心筋梗塞の後、冠状動脈の再カナリゼーションによる早期および成功した心筋介入は、虚血性心筋のサイズを小さくするための最も効果的な戦略である。冠状の微小血管系は、生体内で視覚化および画像化することはできませんが、冠状動脈微小血管機能に直接依存するパラメータを評価するために使用できる侵襲的で非侵襲的な技術がいくつかあります。虚血再灌流後の内皮機能は、冠状動脈流量(CFR)を介した冠動脈循環のレベルでも評価することができる。本研究では、左前下下(LAD)冠動脈のピーク速度を、安静およびストレスチャレンジ中の経胸部ドップラー心エコー検査(ドブタミンによって誘発される)を介して生体内のラットで測定した。正常な心臓は、ストレス誘導中に休息値を最大4倍上回る冠状動脈血流を増加させることができる。虚血再灌流に続いて、冠状動脈微小血管機能障害のマーカーとして使用できるCFRが著しく減少していることが分かった。CFRは、微小血管機能障害の重要性に関する窓を開き、重篤な閉塞性疾患が存在するかどうかに関係なく心血管リスクを予測することが示されている。

本研究では、12匹の雌フィッシャー344匹を用いて行った。ドブタミンでストレステストを行い、IR手術の前と72時間後にLAD冠動脈速度を測定しました。IR手術の前に、安静時LAD冠動脈速度は423±59mm/sと測定され、ドブタミン注入後に増加した(1005±77mm/s)(図3A)。虚血再灌流の72時間後、安静時LAD冠動脈速度は、IR手術前の安静時LAD冠動脈速度と比較して有意に高かった(743±40mm/s対423±59mm/s)(図3A)。IR手術後のドブタミン検査に対するストレス応答は、IR手術前の応答(937±67ms/s対1005±77mm/s)と比較して有意に減少した(図3A)。
CFRは、ストレス(ドブタミン)と休止流速度(ドブタミン注入前に測定される)8に...

冠状流れ予備(CFR)は、休止冠動脈血流に対する最大冠状血流の比率として定義される。我々は、閉塞性冠動脈疾患がない場合の心血管リスク因子を予測する機会を提供する超音波を介してラットのCFRを評価するためのプロトコルを提示する。

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...

この方法の全体的な目的は、心エコー検査を用いたラットにおける左前前方の冠動脈機能の可視化による冠流量の計算です。この方法は、罹患した心臓における微小血管機能障害の診断と、研究全体を通じて潜在的な治療法を評価するための重要な評価ツールを提供する。再灌流療法は、危険にさらされた心筋を救い、左心室機能を改善することが示されているが、冠状動脈の再集水化後に小さな冠状血管の機能異常が起こることがある。この方法は、ラットの冠状動脈微小循環に関する洞察を提供し、また、心筋梗塞、および左心室の圧力体積過負荷を含む他のモデルに関する洞察を提供することができる。前虚血再灌流手術超音波画像診断の前に、麻酔フィッシャー344ラットのつま先ピンチに対する応答の欠如を確認する。胸から髪を剃ります。動物の目に軟膏を塗布し、37〜38度の摂氏加温プラットフォーム上のサピーヌ位置に動物を配置します。13~24メガヘルツのリニアプローブを超音波装置に接続します。アプリケーションプリセットを心臓画像設定に設定し、レールシステムを使用してプローブを配置し、パラスターン短軸ビューを取得します。XY軸マイクロマニピュレータを使用して、プローブを鼻方向に移動して肺動脈を見つけます。プローブを動かし、左心室をより容易に見えるようにします。Bモード画像をキャプチャしてCine Storedしたら、カラードップラーをクリックして短軸で冠状動脈を視覚化します。赤色は、リアルタイムで観察されるとおり、流れの方向を示す。色ドップラーモードで下側の下降冠動脈を可視化した後、モードを脈波に変更し、冠状動脈に黄色のインジケータ線が存在することを探します。黄色の脈波線を冠動脈の中央に配置し、角度が流れの方向に平行であることを注意し、Cine Storeを使用して、休止中の左前前下降冠流および波のピーク側の脈拍の速度を捉える。休憩左前部下降流速を得た後、尾部の基部の周りにガーゼの小さなストリップを置き、止血帯をつかんでねじって圧力をかけ、静脈が拡大する原因となる。慎重に拡張された尾静脈にドブタミンを装った10ミリリットルの注射器に取り付けられた25ゲージの注入蝶の針を置き、接着剤と外科テープで針を安定させる。注入ラインが確保されたら、止血帯と止血帯を取り除いて流れを回復し、注射器を1キログラムあたり20マイクログラム/キログラムを注入するように設定した注入ポンプに入れます。注入の間、左前前下降動脈のピークおよび心拍数を注意深く監視し、ドブタミン誘発ストレス状態下のドップラーモードにおける左前下降動脈脈波ピークを定期的に記録する。前下降冠状動脈ピークと心拍数が挑戦の間に高くなってから、注入を止め、尾静脈注入セットを取り除き、プラットホームから動物を取り除く。次に、ピーク速度ツールを使用して画像からピーク拡張速度を取得し、左前下降動脈応力ピーク拡張期流速と安静左前動脈降下期の拡張期流速速度の比率として冠状流量予備指数を算出する。光ファイバー光源を使用して、18ゲージのIVカテーテルでラットを挿管し、カテーテルに人工呼吸器を接続します。次に、8-0を使用します。モノフィラメント縫合糸は、5番目の肋間空間で15ミリメートルの開口部を通して左前下降動脈を30分間無地結び目でリゲートする。虚血期の終わりに、心表面の変色を介して虚血を視覚的に確認し、合字を放出する。再灌流は、心筋の以前に変色した領域の赤線によって検証することができる。手術後72時間、示されているように冠流量と冠状流量リザーブを測定し、損傷前に得られたものと測定値を比較した。本代表的な実験では、虚血再灌流手術の前に、休止した左前方の冠状動脈速度を、ドブタミン注入後の速度の2倍以上に毎秒約423ミリメートルと測定した。虚血再灌流から72時間後、手術前の休息左前前下降冠動脈速度に比べて安静左前動脈の降り方速度が有意に高かった。外傷後のドブタミン検査に対するストレス応答は、手術前の応答と比較して有意に低下した。冠動脈流量リザーブは、ストレス時のピーク流速と安静流速度の比として計算され、手術前の若いラットでは約2.1であったが、傷害後72時間で有意に減少した。また、負傷後72時間経過しても左心室の収縮期機能に有意な変化はなかった。その開発後、この技術は、研究者が正確に人間の病気の状態を模倣する小さな動物モデルで冠状動脈の超音波画像診断を探求し、使用することを可能にする。このビデオを見た後、あなたは冠状動脈血流を測定し、小動物心疾患モデルで冠状動脈微小循環を評価する方法を非常によく理解している必要があります。

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医学

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ラットにおける急性心筋梗塞

このプロトコルは、再灌流に続く左前下行冠動脈（LAD）の90分の非開胸冠動脈バルーン閉塞を使用して、ブタ心筋梗塞（MI）モデルについて説明します。さらに、このような心機能、血行動態、微小血管抵抗、および梗塞サイズなどのいくつかの転帰パラメータのためのプロトコルもまた提示される。...

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マウスの圧負荷モデルを用いた冠動脈の流れと冠血流準備の超音波ベースのアセスメント

孤立したラットの心臓は、虚血再灌流障害の永続的なモデルです。ここでは、ラットからin...

ランゲンドルフ灌流ラット心臓における虚血再灌流傷害の誘導と評価

ラット心臓の心筋虚血再灌流モデルは、自作リトラクター、ポリ塩化ビニルチューブ、および独自の結び目法を使用することによって改善される。心電図、トリフェニルテトラゾリウムクロリドおよび組織学的染色、ならびに生存率分析の結果は、改善されたモデル群が既存のモデル群よりも高い成功率および生存率を有することを示した。...

心筋虚血および再灌流傷害の改善されたげっ歯類モデル

本研究では、急性心筋虚血再灌流研究のためのラットにおける従来の手順を技術的に改変することにより、左前下行冠動脈結紮術の品質管理に焦点を当てたプロトコルを提示する。...

虚血再灌流研究のための左前下行冠動脈結紮術:技術改変と品質管理によるモデル改良

本研究は、生存症例の左ミニ開胸術または非生存症例の正中胸骨切開術を使用したウサギの急性局所心筋虚血および再灌流損傷の再現性の高い動物モデルを示しています。...

ウサギの虚血と再灌流障害のモデル

本プロトコルは、左前下行動脈の迅速かつ正確な局在化のための修正された胸骨傍長軸ビューを説明しています。このアプローチは、マウスの心筋虚血再灌流後の冠状動脈血流予備能の動的変化の検査を容易にする一方で、よりシンプルでユーザーフレンドリーになるように設計されています。...

マウスにおける心筋虚血再灌流後の冠動脈血流予備能の動的評価

外科手術による外傷、炎症反応を誘導する。サイトカイン、内因性リガンドは、虚血再灌流後に心筋梗塞サイズを調節することが知られています。我々は、開胸の影響を最小限に抑えるためにぶら下がって重みを使用してマウスの虚血再灌流の変更されたクローズド·胸のモデルを提示します。...

心筋虚血再灌流障害のマウスクローズド胸モデル

我々は、再現性を高めるために左前下行枝（LAD）に結紮の位置決めにおいてより明確にするために可能にするマウスモデルにおける心筋梗塞（MI）をシミュレートするための実験的虚血/再灌流（I / R）傷害を誘導するための外科的方法を紹介マウスでのMIの実験の。...

左前下の動脈の結紮を通して心筋虚血再灌流傷害のマウスモデル

学ぶラットの冠動脈血流予備量比測定法。経胸壁ドプラーエコーで左前下行枝を可視化し、虚血再灌流後の微小血管機能障害を評価する非侵襲的技術を習得し、前臨床的心疾患モデルでの治療効果判定に活用できます。

ラットにおける心筋虚血再灌流後の冠動脈流量の評価

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