Name: マウスの外傷性脳損傷後のカエカム微生物叢の変化を調べている (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-09-19T13:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 29 s
Description: 学ぶマウスの外傷性脳損傷誘導法と盲腸微生物叢の変化解析。側方液圧衝撃装置を用いたTBIモデルと16S rDNAシーケンスによる腸内細菌叢の多様性と組成変化を評価する手法です。

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著者は何も開示していない。

行われたすべての手順は、浙江大学の実験動物倫理委員会によって承認されました.手術に使用されるすべての器械および材料は無菌である。TBIプロセドレは約20分かかります。
1. 動物の世話
<ol><li>この実験では、5~6週齢の雄C57BL/6Jマウス(体重20~25g)を使用します。</li>
	<li>12時間/12時間の光/暗いサイクルでマウスを維持し、彼らは食べ物と水のアドリビタムを受け取ることを確認してください。研究を通じてシャムとTBIグループの両方に同じ量の食料と水を提供します。</li>
	<li>動物の痛みや不快感を最小限に抑えるためにあらゆる努力をしてください。</li>
</ol>2. 外傷性脳損傷の誘導
<ol><li>麻酔のためのケタミン(80-100 mg/kg)/キシラジン(10 mg/kg)IPを注入します。目の反射または痛み反射を使用して麻酔の深さをテストします。人工涙剤や潤滑剤の目のチントを使用して、目が乾燥するのを防ぐ。</li>
	<li>麻酔の後、マウスを傾向のある位置に置きます。手術中に37°Cで温度を維持し、TBI後30分間温度を維持するために温度制御された加熱パッドを使用してください。</li>
	<li>切開部の毛を剃ります。</li>
	<li>3つの交互のスクラブを使用して70%のエタノールで頭皮を消毒し、その後、矢状面で頭皮を切開します。</li>
	<li>鉗子を使用して両側の切開を撤回し、骨膜をわずかに分離します。</li>
	<li>マーカーを使用して、頭蓋骨の右頭頂部に円(直径3mm)を描き、中間線から2mm離します。</li>
	<li>電気ドリルで頭蓋骨をドリルします。この手順は、デュラが損傷しないように注意深く操作されていることを確認します。</li>
	<li>ボーン フラップを取り外し、小さなボーン ウィンドウ (直径 3 mm) を露出します。</li>
	<li>プラスチック傷害カニューレ(内径=2.5mm、長さ=8mm)を頭蓋切開の上に置き、歯科用アクリルを使用して頭蓋骨にカニューレをセメントします。</li>
	<li>カニューレにシリンジ(5mL)を使用して無菌0.9%NaCl(通常の生理生理)でカニューレを充填し、カニューレに気泡がないことを確認します。</li>
	<li>オシロスコープとアンプの電源を入れ、横液パーカッション損傷(LFPI)装置の高圧チューブに気泡がないことを確認します。安定した信号が出るまで約10パルスを送り、デバイスをテストします。振り子の開始位置の角度を調整して、約 2.0 atm のパルス強度に達します。</li>
	<li>傷害カニューレをLFPIデバイスに接続します。引き金を引いて振り子を放出して脳損傷を誘発する。次に、パルスを得て、閉じた流体充填チューブシステム全体を介してデュラに送信する。</li>
	<li>同じ外科的処置でシャム群のマウスを操作する。LFPI を実行しないでください。</li>
</ol>3. 手術後の治療
<ol><li>脳損傷を誘発した後、プラスチックカニューレを取り除き、切開部を縫合する。手術中にブプレノルフィン(2mg/kg)SQまたはIPを投与し、その後3日間6〜12時間ごとに投与する。</li>
	<li>マウスを歩行になるまで加熱パッドの上に置きます。麻酔蘇生を加速するために、加熱パッドの温度を37°Cに設定します。</li>
	<li>ケージにマウスを戻し、食べ物と水のアドリビタムを管理します。</li>
</ol>4. 腹腔内および盲検からのサンプルコレクション
<ol><li>CO2でマウスを安楽死させ、続いて対応する時点で子宮頸部脱臼を行う。 注:この実験では、選択された時間ポイントは、腸内微生物叢の動的進化を分析するために、1時間、6時間、1d、3d、および7d外傷後脳損傷であった。</li>
	<li>腹部の表面から毛髪を取り除きます。70%のエタノールで腹部を消毒する。</li>
	<li>マウスの上に生殖不能のドレープを置きます。雄マウスのプレペスのすぐ上の下腹部中線から切開を行う。</li>
	<li>腸が露出した後、盲腸を見つけ、他の腸管から穏やかに分離します。歯や鋭い鉗子で盲検をつかまないようにしてください。Adson鉗子のような外傷性鉗子を使用する。</li>
	<li>鋭いはさみでカカムを切ります。</li>
	<li>無菌ドレッシングに手動でケカム内容物を抽出し、1.5mLマイクロ遠心管に内容物を保存します。</li>
	<li>マイクロバイオーム分析まで-80°Cでカカム内容物を保存します。</li>
</ol>5. DNA抽出と16S-rDNAシーケンシングとデータ解析
<ol><li>
FECからのDNAの分離 注:この実験には市販のDNA単離キット(材料の表)を使用しました。<ol>
<li>メスを使用して、2 mLマイクロ遠心管で300mgの便を掻き取り、チューブを氷の上に置きます。</li>
		<li>各サンプルに1 mLの阻害バッファーを追加します。渦は1分間連続的に、または便料サンプルが完全に均質化されるまで続行する。</li>
		<li>最大速度でサンプルを遠心分離し、1分間、便の粒子をペレットします。</li>
		<li>ピペット2 μLのプロテインサーゼKを新しい2mLマイクロ遠心管に入れた。ステップ5.1.3からプロテインサーゼKを含有する2mLマイクロ遠心管に上清のピペ状600μL。次に、バッファ1の600 μLと15sの渦を加えます。</li>
		<li>試料を70°Cで10分間インキュベートします。</li>
		<li>100%エタノールの600μLをリサート(1:1比)に加え、渦で混ぜます。チューブのふたの内側から滴を取り除くために、最高速度で短時間遠心分離機。</li>
		<li>ライサテの600 μLをスピンカラムに塗布します。最大速度で1分間遠心分離機は、フロースルーを破棄します。この手順をもう一度繰り返します。次に、カラムを新しい2 mL回収管に移します。</li>
		<li>スピンカラムを開き、バッファ2の500 μLを追加します。1分間の最高速度で遠心分離機カラムを取り外し、新しい2 mLコレクションチューブに入れます。</li>
		<li>列にバッファ 3 の 500 μL を追加します。最大速度で3分間遠心分離機は、フロースルーを破棄します。遠心分離プロセスを 1 回繰り返して、バッファ 3 が完全に elfus であることを確認します。</li>
		<li>スピンカラムを新しいチューブ2 mLコレクションチューブに入れ、バッファー4のピペット200 μLを膜上に直接置きます。室温(RT)で1分間インキュベートし、その後、DNAを溶出させるために1分間の最高速度で遠心分離機を行います。</li>
	</ol>
</li>
	<li>
16S-rDNAシーケンシングとデータ解析
	<ol>
<li>アンプリコンを生成するには、20~30 ngのDNAを使用します。</li>
		<li>細菌16S rDNAのV3およびV4超可変領域に隣接する比較的保存された領域用に設計された市販のプライマーを使用してください。本研究では、配列「CCTACGGRRBGCASCAGKVRGAAT」および配列を含むリバースプライマー「GGACTACNVGGWTWTACTACC」を含む前方プライマーを用いた。</li>
		<li>バッファー1の2.5 μL、dNTPの2μL、各プライマーの1 μL、DNAポリメラーゼの0.5 μL、およびチューブ内のテンプレートDNAの20ngを加えて、PCR反応を混合します。ddH2O を使用して、反応システムを 25 μL に調整します。</li>
		<li>PCR反応パラメータを次のように設定する:94°Cで予め3分間脱退を行う。5sの94 °Cで脱退を行い、90sの57°Cでアニールを行い、10sのために72°Cで延長し、この24倍を繰り返します。</li>
		<li>製造元の指示に従って PE250/300 ペアエンド シーケンスを実行し、16S rRNA データ分析に QIIME データ分析パッケージを使用します。 注:この実験では、DNAシーケンシングとデータ分析は、主に専門のシーケンシング会社によって行われました。</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Cheng, P., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCheng%2C+P+%22Trends+in+traumatic+brain+injury+mortality+in+China%2C+2006-2013%3A+A+population-based+longitudinal+study%22">Trends in traumatic brain injury mortality in China, 2006-2013: A population-based longitudinal study</a>. 14, e1002332(2017).</li>
<li>Maas, A. I. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traumatic+brain+injury%3A+integrated+approaches+to+improve+prevention%2C+clinical+care%2C+and+research%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet+Neurology%22%5BJournal%5D)">Traumatic brain injury: integrated approaches to improve prevention, clinical care, and research.</a> The Lancet Neurology. 16, 987-1048 (2017).</li>
<li>Gaddam, S. S., Buell, T., Robertson, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+manifestations+of+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Handbook+of+Clinical+Neurology%22%5BJournal%5D)">Systemic manifestations of traumatic brain injury.</a> Handbook of Clinical Neurology. 127, 205-218 (2015).</li>
<li>Kabadi, S. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluid-percussion-induced+traumatic+brain+injury+model+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Fluid-percussion-induced traumatic brain injury model in rats.</a> Nature Protocols. 5, 1552-1563 (2010).</li>
<li>Fung, T. C., Olson, C. A., Hsiao, E. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactions+between+the+microbiota%2C+immune+and+nervous+systems+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Interactions between the microbiota, immune and nervous systems in health and disease.</a> Nature Neuroscience. 20, 145-155 (2017).</li>
<li>Collins, S. M., Surette, M., Bercik, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+interplay+between+the+intestinal+microbiota+and+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Microbiology%22%5BJournal%5D)">The interplay between the intestinal microbiota and the brain.</a> Nature Reviews Microbiology. 10, 735-742 (2012).</li>
<li>Cryan, J. F., Dinan, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mind-altering+microorganisms%3A+the+impact+of+the+gut+microbiota+on+brain+and+behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Mind-altering microorganisms: the impact of the gut microbiota on brain and behaviour.</a> Nature Reviews Neuroscience. 13, 701-712 (2012).</li>
<li>Nicholson, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Moderate+Traumatic+Brain+Injury+Alters+the+Gastrointestinal+Microbiome+in+a+Time-Dependent%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">Moderate Traumatic Brain Injury Alters the Gastrointestinal Microbiome in a Time-Dependent.</a> Shock. , (2018).</li>
<li>Houlden, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+injury+induces+specific+changes+in+the+caecal+microbiota+of+mice+via+altered+autonomic+activity+and+mucoprotein+production%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%2C+Behavior%2C+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Brain injury induces specific changes in the caecal microbiota of mice via altered autonomic activity and mucoprotein production.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 57, 10-20 (2016).</li>
<li>Treangen, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traumatic+Brain+Injury+in+Mice+Induces+Acute+Bacterial+Dysbiosis+Within+the+Fecal+Microbiome%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">Traumatic Brain Injury in Mice Induces Acute Bacterial Dysbiosis Within the Fecal Microbiome.</a> Frontiers in Immunology. 9, 2757(2018).</li>
<li>Alder, J., Fujioka, W., Lifshitz, J., Crockett, D. P., Thakker-Varia, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lateral+fluid+percussion%3A+model+of+traumatic+brain+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Lateral fluid percussion: model of traumatic brain injury in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. , (2011).</li>
<li>Thompson, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lateral+fluid+percussion+brain+injury%3A+a+15-year+review+and+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Lateral fluid percussion brain injury: a 15-year review and evaluation.</a> Journal of Neurotrauma. 22, 42-75 (2005).</li>
<li>Pang, W., Vogensen, F. K., Nielsen, D. S., Hansen, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Faecal+and+caecal+microbiota+profiles+of+mice+do+not+cluster+in+the+same+way%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">Faecal and caecal microbiota profiles of mice do not cluster in the same way.</a> Laboratory Animals. 46, 231-236 (2012).</li>
</ol>

著者は、彼女の技術的な指導のためにBaohong Wangに心から感謝します。

ここでは、マウスのTBI後のセカル微生物叢の変化を決定するための簡単で効率的なプロトコルです。脳損傷の誘導とカエカム含有量サンプルの収集は、プロトコルの重要な部分です。
TBIに続く腸内微生物叢の変化を研究した研究者にもかかわらず、これらの研究で使用される脳損傷はCCI-8および体重低下/衝撃誘発モデル9であった。しかし、CCIモデルは主に脳挫傷を複製し、体重減少モデルはいくつかの不正確さに苦しむかもしれません。すべての既存の脳損傷モデルの中で、LFPIは、焦点および拡散性脳損傷11、12を含む最も一般的に使用されるモデルであり、臨床TBI患者で観察される多くの重要な特徴を複製する。プロセス全体の主要なステップは、硬膜の保護とカニューレの気密性を維持することが含まれます。しかし、開頭術と凝集の両方は、このプロトコルの制限でありうたく熟練した演奏者の操作を必要とする。ただし...

外傷性脳損傷(TBI)は、世界的な公衆衛生上の問題であり、若年成人の死亡および障害の主な原因である1,2.TBIは毎年多くの死を引き起こし、生存者は様々な身体的、精神的、感情的、認知障害を経験します。したがって、TBIは患者の家族や社会資源に大きな負担です。TBIは、外傷時に発生する一次脳損傷と、最初の損傷の後に数時間から数ヶ月に発症する二次脳損傷の両方を含む。二次脳損傷は、脳に有害であるだけでなく、消化器系3を含む様々な臓器系に重大な悪影響を及ぼすいくつかの生化学的カスケードによって媒介される。
現在、動物実験でTBIを誘導するモデルは、流体パーカッション損傷、制御皮質衝撃(CCI)、体重減少加速の3つのモデルがあります。横液パーカッション傷害(LFPI)は、拡散性脳損傷(DAI)4を確立するために最も一般的に使用されるモデルである。装置は無傷の硬膜に短い流体圧力の脈拍を加えることによって頭蓋切開を通して脳損傷を作り出す。このパルスは振り子のストライクによって作成されます。LFPIはTBI研究のための再生可能で制御可能なモデリング方法である。
マイクロバイオームは、人体に存在するすべての微生物の集合的ゲノムとして定義されます。特に腸内微生物は、腸恒常性および機能において重要な役割を果たすだけでなく、宿主生理学および他の器官の機能の多くの側面を調節する5。近年、腸内微生物叢が脳腸軸6を介して脳の発達と機能を調節することを示す証拠が増えている。腸内細菌叢の破壊は、パーキンソン病、気分障害、および自閉症7を含むいくつかの脳機能障害にリンクされています。最近、前臨床研究はまた、急性脳損傷が腸内微生物叢8、9の変化を誘発しうることも報告されている。
Treangen et al.10による研究では、3つの微生物種で有意な減少が見られ、CCI誘発TBI後の2つの微生物種の増加が見られた。この証拠は、腸内微生物叢の変調がTBI管理における治療方法でありうっていう。しかし、脳損傷によって引き起こされる腸内微生物叢の変化の根底にあるメカニズムは未知のままである。このため、TBI後の腸内微生物叢の変化を研究する比較的単純で効率的なモデルが必要である。そこで本研究は、マウスにおけるTBI後の腸内微生物叢の変化を調べるプロトコルを提示する。

<table><tbody><tr><td>DNA分離キット&nbsp;</td><td>QIAGEN</td><td>51604</td><td>糞便サンプルからのゲノムDNAの迅速な精製</td></tr><tr><td>遺伝子解析サービス</td><td>GENEWIZ</td><td></td><td>遺伝子解析サービス</td></tr><tr><td>Heating pad</td><td>Shanghai SAFE Biotech Co.</td><td>TR-200</td><td>ヒーティングパッド</td></tr><tr><td>インジェクター</td><td>浙江大学</td><td></td>医学部初の付属病院 <td></td></tr><tr><td>LFPIイン</td>ジェクター <td>バージニア コモンウェルス大学</td><td>FP302</td><td>LFPIデバイス</td></tr><tr><td>マイクロ頭蓋ドリル</td><td>RWD ライフサイエンス</td><td>78061</td><td>マイクロ頭蓋ドリル</td></tr><tr><td>ポビドン ヨウ素</td><td>医学部初の提携病院、浙江大学</td><td></td><td>ポビドンヨウ素</td></tr></tbody></table>

マウスの外傷性脳損傷後のカエカム微生物叢の変化を調べている

Investigating Alterations in Caecum Microbiota After Traumatic Brain Injury in Mice

増加する証拠は、微生物叢-腸-脳軸が脳疾患の病因に重要な役割を果たしていることを示しています。いくつかの研究はまた、外傷性脳損傷が腸内微生物叢に変化を引き起こすことを示しています。しかし、脳腸軸の双方向調節の根底にあるメカニズムは未知のままである。現在、外傷性脳損傷後の腸内微生物叢の変化を研究するためのモデルはほとんどない。したがって、今回の研究では、横液パーカッション装置を用いて外傷性脳損傷を誘発するプロトコルと、腸内微生物叢の変化を調べた後のケカムサンプルの分析を組み合わせたものである。外傷性脳損傷後の腸内微生物叢組成物の変化は、16S-rDNAシーケンシングを用いて決定される。このプロトコルは、腸内微生物と外傷性脳損傷との関係を研究するための効果的な方法を提供する。

TBI の確立を図 1 に示します。麻酔および消毒の後、頭皮を矢状に切開した(図1A)。開頭術(直径3mm)を電気ドリルで右頭蓋皮質上の頭蓋骨にトレフィンし、硬膜をそのままに保った(図1B,C)。プラスチック損傷カニューレを骨窓の上に置き、歯科アクリルを使用して頭蓋骨に接その他のセメントを付けた(図1D)。
横液パーカッションの手順を図2に示す。装置を開始する前に、安定した信号を与えるまで約10パルスを送ることによって試験した。振り子の角度を開始位置に調整し、約2.0atmのパルス強度に達<strong class="xfi...

ここに提示されるのは、横液パーカッション装置を用いて拡散性外傷性脳損傷を誘導するプロトコルであり、続いて腸内微生物叢分析のためのcaecum含有量の収集である。

Increasing evidence shows that the microbiota-gut-brain axis plays an important role in the pathogenesis of brain diseases. Several studies also ...

脳と腸内微生物叢の間の同時性と線の相互作用は不明のままである。この技術を用いて、マウスにおける外傷性脳損傷後の腸内微生物叢における変化を調べることができる。この手法の主な利点は、比較的シンプルで効率的なことです。この手順のデモンストレーションは、私の研究室の大学院生であるWendong Youです。外傷性脳損傷誘導については、麻酔をかけマウスのつまみつまみへの応答の欠如を確認し、動物の目に軟膏を適用する。剃った後、サジタル面で頭皮を切開する前に、露出した頭皮の皮膚を70%エタノールで消毒します。鉗子を使用して、両側の切開を引き込み、骨膜をわずかに分離する。マーカーを使用して、正線から 2 ミリメートル離れた頭蓋骨の右頭頂部に直径 3 ミリメートルの円を描画します。硬膜を傷つけることなく、慎重に頭蓋骨を貫通するために電気ドリルを使用してください。骨フラップを取り外して3ミリメートルの骨窓を露出させ、開頭術の上にプラスチック損傷カニューレを置きます。歯のアクリルで頭蓋骨にカニューレを固めた後、5ミリリットルの注射器を使用して、泡を避けるために、無菌0.9%正常生理食塩水でカニューレを充填します。オシロスコープとアンプをオンにします。横流の流体打楽器損傷装置の高圧管に気泡が含まれ、約10個のテストパルスを供給し、安定した信号が出るまで確認します。振り子の開始位置の角度を調整して、約2つの標準雰囲気のパルス強度に達し、損傷カニューレを横流の流体パーカッション傷害装置に接続します。トリガーを引いて振り子を解放し、脳損傷を誘発する。次に、閉じた流体充填チューブシステム全体を通して、デュラにパルスを送ります。脳損傷の誘導後、カニューレを取り除き、切開を縫合する。その後、マウスを外来になるまで監視付きの加熱パッドにマウスを置き、動物を食物と水へのアドリビタムアクセスで自宅のケージに戻します。示された実験時に、標準的なプロトコルに従って腸を露出させ、非外傷性鉗子を使用して、他の腸管からカエカムを穏やかに分離する。組織が見つかったら、尖ったはさみでカエカムを切断し、手動で無菌ドレッシングにカエカムの内容物を抽出します。その後、マイクロバイオーム分析までマイナス80°Cの貯蔵のために、1.5ミリリットルマイクロ遠心分離チューブに内容物を移します。16S組換えDNAシーケンシングは、外傷性脳損傷の3日後にマウスにおけるカエカム微生物叢の多様性の減少を示し、この図に示されている恥および外傷性脳損傷群のケカム内容物内で最も豊富な分類を有する。さらに、非メトリック、多次元スケーリングは、外傷性脳損傷後のカエカム微生物叢の組成の変化を明らかにする。頭蓋骨を掘削するときには硬膜をそのままに保ち、他の腸管からカエカムを見つけて分離するときに穏やかであることを忘れないでください。この手順に従って、ヘマトキシリンおよびエオシン染色および分析を行い、外傷性脳損傷後の腸管内の組織学的変化および炎症反応を調べることができる。

investigating-alterations-caecum-microbiota-after-traumatic-brain

Research

JoVE Journal

Neuroscience

神経科学

海馬の回路への機能的な変化を調べるために多面的なアプローチを説明する。電気生理学的手法は、傷害プロトコル、行動試験および地域切開法と共に説明されています。これらの技術の組み合わせは、他の脳領域と科学的な質問のために、同様の方法で適用することができます。...

軽度の外傷性脳損傷後の海馬回路機能の改変に関する調査

このビデオでは、側方流体打楽器装置(LFPI)を使用して外傷性脳損傷(TBI)のマウスモデルを生成する方法を示します。マウスに麻酔をかけると、頭蓋骨に窓を作ることで脳が露出します。生理食塩水で満たされたカニューレが窓に取り付けられ、LFPIに接続されます。デバイスの振り子が解放され、外傷性脳損傷を引き起こす圧力パルスが生成されます。...

側方流体打楽器装置を用いた外傷性脳損傷のマウスモデルの生成

出典:Macheda, T., et.al.マウスの軽度外傷性脳損傷の電磁制御クローズドヘッドモデル。J. Vis. Exp.

マウスモデルにおける軽度外傷性脳損傷の誘発

出典: Braeckman, K., et.al. 軽度の外傷性脳損傷を持つラットの海馬における高度な拡散イメージング. J. Vis. Exp.

軽度外傷性脳損傷をもったラット海馬の拡散強調イメージング

急性脳外傷は現在まで適切な治療を持っていない重傷です。多光子顕微鏡は、縦方向に急性脳外傷開発のプロセスを研究し、げっ歯類における治療的戦略をプロービングできます。脳のin vivo二光子イメージングに師事急性脳外傷の二つのモデルは、このプロトコルで実証されています。...

縦二光子イメージングに続いてマウスの急性脳外傷

外傷性脳損傷(TBI)は依然として深刻な健康問題です。制御された皮質衝撃手術モデルを使用して、TBIの影響と可能な治療法に関する研究を行うことができます。...

外傷性脳損傷のための制御皮質衝撃モデル

この手順の全体的な目標は、軽度の外傷性脳損傷を持つラットにおける海馬の定量的微細構造情報を得ることである。これは、高度な拡散加重磁気共鳴イメージングプロトコルとパラメトリック拡散マップの関心領域ベースの解析を使用して行われます。...

軽度の外傷性脳損傷を有するラットの海馬における高度な拡散イメージング

ここでは、抗生物質誘発性疑似細菌フリーデキストラン硫酸ナトリウム誘発性大腸炎マウスモデルを確立するためのプロトコルを提示し、腸内細菌叢の役割を調査します 大腸炎に対するセ レウス菌 のプラスの効果を調節する。...

腸内細菌叢の調節による大腸炎に対する セレウス菌 投与の緩和効果の調査

腸由来の微生物代謝物は、動物の複雑な行動につながる多面的な影響を及ぼします。私たちは、ガイドカニューレを介した脳室内送達を介して脳内の腸由来微生物代謝物の影響を描写するための段階的な方法を提供することを目指しています。...

自由に動くマウスにおける腸由来微生物代謝物の脳室内送達

プロトコルは、マウスモデルにおける軽度の外傷性脳損傷について説明しています。特に、軽度の正中線閉鎖頭部外傷を誘発するための段階的なプロトコルおよび動物モデルの特徴付けが完全に説明されている。...

マウスにおける軽度外傷性脳損傷の電磁制御クローズドヘッドモデル

このプロトコルは、反復性軽度外傷性脳損傷 (rmTBI) の修正マウス モデルを示しています 閉鎖性頭部損傷 (CHI)...

間伐頭蓋窓と流体パーカッションを組み込んだ反復性軽度外傷性脳損傷の改良マウスモデル

学ぶマウスの外傷性脳損傷誘導法と盲腸微生物叢の変化解析。側方液圧衝撃装置を用いたTBIモデルと16S rDNAシーケンスによる腸内細菌叢の多様性と組成変化を評価する手法です。

マウスの外傷性脳損傷後のカエカム微生物叢の変化を調べている

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