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DOI: 10.3791/59481-v
Vanessa Gil1,2,3,4, José Antonio Del Río1,2,3,4
1Molecular and Cellular Neurobiotechnology, Institute for Bioengineering of Catalonia (IBEC), The Barcelona Institute of Science and Technology (BIST),Parc Científic de Barcelona, 2Department of Cell Biology, Physiology, and Immunology,Universitat de Barcelona, 3Center for Networked Biomedical Research on Neurodegenerative Diseases (CIBERNED), 4Institute of Neuroscience,University of Barcelona
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study provides a method for analyzing the behavior of growing axons in three-dimensional matrices that simulate their natural development. The protocol focuses on understanding axonal guidance and neuronal migration during neurodevelopment, enabling researchers to observe the influence of specific molecules.
ここでは、3Dマトリックスで軸を成長させる行動を分析し、その自然な発達を模倣する方法を提供する。
この方法は、神経系の発達中に軸索誘導および神経移動におけるいくつかの分子の役割を分析するために有用である。この手法の主な利点は、結果の分析が迅速かつ簡単であり、研究者のための多くのトレーニングを意味する複雑なソフトウェアを必要としないということです。この手順のデモンストレーションは、私たちの研究室と私の技術者であるミリアン・セグラ=フェリウです。
プレート200、000 COS-1細胞を35ミリメートルのペトリ皿に開始し、一晩70〜80%のコンフルエンスを読み取るために細胞培養インキュベーターで完全な培養培地でインキュベートする。翌日、リポソームベーストランスフェクション法を用いて候補分子をコードするDNAを用いてCOS-1細胞をトランスフェクトする。まず、250マイクロリットルの無血清培地と1~2マイクログラムのDNAを1.5ミリリットル遠心管に混合し、室温で5分間インキュベートします。
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