Assessing the Cellular Immune Response of the Fruit Fly, <em>Drosophila melanogaster</em>, Using an In Vivo Phagocytosis Assay

Ashley E. Nazario-Toole; Louisa  P. Wu

doi:10.3791/59543

ミバエショウジョウバエVivo で貪食能アッセイを使用しての細胞性免疫能を評価します。

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Immunology and Infection

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Assessing the Cellular Immune Response of the Fruit Fly, Drosophila melanogaster, Using an In Vivo Phagocytosis Assay

ミバエショウジョウバエVivo で貪食能アッセイを使用しての細胞性免疫能を評価します。

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05:50 min

April 10, 2019

DOI: 10.3791/59543-v

Ashley E. Nazario-Toole^1,2, Louisa P. Wu^2,3

¹Department of Biology,University of Maryland, ²Department of Cell Biology and Molecular Genetics,University of Maryland, ³Institute for Bioscience and Biotechnology Research,University of Maryland

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

このプロトコルでは、食細胞の認識および微生物感染症のクリアランスを定量化する大人のショウジョウバエの体内貪食アッセイについて説明します。

この生体内食細胞化アッセイは、研究者が成人血液細胞の貪食を調節する新しい遺伝子を同定するために、遺伝的スクリーンおよびゲノムワイド関連研究を行うことを可能にする。この実験は、定量的に実行しやすく、病原体の認識、取り込み、およびクリアランスに影響を与える宿主因子の生きた動物のスクリーニングに適用することができる。薄壁のガラス毛細血管を針の引き手で引っ張った後、マイクロメーターを使用して針を顕微鏡の下に保持し、5番の細かい点、ステンレス鋼のピンセットを使用して先端を100マイクロメートルの先端直径に割ります。

各フライに注入される液体の量を測定するには、PBSで無菌5%の食品着色剤を持つ毛細血管針をロードし、0.01ミリメートルの段階マイクロメートルで鉱物油の滴に液体を排出します。1ミリリットル当たり10マイクロリットルをパラフィルムの小さな正方形に分配し、液体を針に引き込みます。注射器ノズルに針を取り付け、麻酔付きハエをフライパッドの指定された領域に沿って並べ、腹側を上に、ヘッドはパッドの前面に向けます。

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