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DOI: 10.3791/59546-v
Hyeonwi Son1, Ju Hwan Yang2, Hyun Joon Kim*1, Dong Kun Lee*3
1Department of Anatomy and Convergence Medical Sciences, Institute of Health Sciences, Bio Anti-aging Medical Research Center,Gyeongsang National University Medical School, 2Department of Biological Sciences,Pusan National University, 3Department of Physiology and Convergence Medical Sciences, Institute of Health Sciences,Gyeongsang National University Medical School
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
この記事では、拘束を用いて慢性固定化されたマウスにおける抑うつ様行動の誘導のための簡略化された標準化されたプロトコルを提供する。また、うつ病の誘導を検証する行動や生理学的手法について説明する。
デジタルルクスメーターを使用して200ルクスで点灯する部屋を設定することで始めます。テストの少なくとも1週間前にマウスを別のケージに入れ、実験の少なくとも30分間は検査室にマウスを置きます。マウスの尻尾を軽く持ってマウスを引き張らないようにし、粗い表面に慎重に置きます。
小さな白いタオルで拘束剤を覆い、マウスが自発的に拘束者に入るように、拘束器の開口部にマウスをそっと置きます。次に、閉じ込めを配置して、尾、足、睾丸などの身体への損傷を避けるように注意して、マウスをできるだけしっかりと拘束します。最後に、拘束剤への暴露の間に、体重および食物摂取を48時間ごとに測定する。
試験の前に、マウスを2つの飲用ボトル(1つは0.1モルスクロースを含み、もう1つはプレーンウォーターを含む)の存在を48時間習慣付けます。サイドバイアスによって生成される任意の交位を減らすために24時間後に2本のボトルの位置を切り替えます。3日目にマウスの水を24時間奪う。
その後、実験の日に6時間2つの飲用ボトルにマウスを露出させます。3時間後、水筒の位置を切り替えます。消費されたスクロース溶液と水のミリリットルで体積を記録し、次に動物のショ糖への親和性を計算します。
最後に、テスト中の総流体消費量に対するスクロース消費量の割合として、スクロースの好みを計算します。尾の懸濁液試験を開始する少なくとも30分前に、慢性拘束ストレス誘発マウスを試験室に持ち込むことから始める。部屋のライトを50ルクスの状態を薄暗くするように設定します。
次に、マウスから約40センチメートルのカメラを置きます。粘着テープを使用して、水平バーからしっかりとマウスを吊り下げます。マウスがサスペンションボックスの中央に配置された後、記録を開始し、6分間連続的に動作変化を観察します。
マウスが尾を登ろうとする場合は、スティックを使用するか、ストップを登って停止しないようにします。実験の最後にマウスをホームケージに移動し、テープを尾部から慎重に取り外します。最後に、ビデオトラッキングソフトウェアを使用して、不動の期間の累積時間を分析します。
結果は、CIS群の体重の減少と4日目の食物摂取量の有意に減少を示す。対照と比較して、CIS群におけるスクロース好みの減少が示されたが、不動時間およびコルチコステロンの有意な増加があった。また、グルタミンサプリメントダイエットは、体重、食物摂取、スクロース嗜好、不動性、コルチコステロンに対して示されるように、うつ病のような行動を改善する。
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