Name: 架橋剤を用いたキトサンポリ(ビニルアルコール)ヒドロゲルを架橋剤とジフルニサル放出研究用に調製する凍結解凍法 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-01-14T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 59 s
Description: 学ぶ凍結解凍法によるキトサン・ポリビニルアルコールヒドロゲルの調製技術。化学架橋剤を使用せず、生体適合性と薬物放出制御を実現する革新的な材料設計手法です。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

著者は、ポロシメトリー測定のサポートのためにC.ルズリアガに感謝しています。著者はまた、財政支援のためのスペインの大臣デ・エコノミア・イ・コンペティビダード(プロジェクトMAT2014-59116-C2-2-R)とPIUNA(ref. 2018-15)に感謝します。著者らはまた、ディペタメント・デ・フィシカ・ユニゾンのアミール・マルドナード博士に対し、サポートと有益なコメントと、SEM画像のDIPM-UNISONのSEバレル・イバラ博士と、ルビオ・ファーマ・イ・アソシアドスS.A.デ・C.V.の資金援助を認めたい。MEマルティネス・バルボサは、レッド・テマティカ・デ・ナノシエンシアス・イ・ナノテクノロジア・デル・プログラム・デ・レデス・テマティタス・デル・CONACyTの資金援助に加えて、CONACyT(メキシコ)プロジェクトNo.104931およびNo.256753に感謝したいと思います。そして、また、プロジェクトUSO316001081。MDフィゲロア・ピッツァーノは、財政支援(奨学金373321)のためのCONACyTを認めたい。

1. キトサンPVAヒドロゲルの調製
<ol><li>2%(w/w)キトサンおよび10%(w/w)PVA溶液を調製します。0.2gのキトサンを室温で0.1 M CH3COOH溶液(以前に濾過)の10mLに溶解し、一晩連続機械的攪拌を維持する。蒸留水の10mLにPVAの1gを溶解し、1時間80°Cで攪拌する。</li>
	<li>両方の溶液1:1を室温で均質になるまで磁気攪拌機を使用して混合し、ペトリ皿に混合物を注ぎます。試料を大気圧で2時間放置して脱気します。</li>
	<li>ヒドロゲルを-4°、-20°C、または-80°Cで20時間および4サイクル凍結します(サンプルCP4-4、CP4-20、CP4-80)。5または6の凍結サイクル(サンプルCP5-80およびCP6-80)を使用して、20時間-80°Cで別のヒドロゲルを凍結します。3回目の凍結サイクルの後、ヒドロゲルを脱イオン水で洗浄します。最後に、48時間-46°Cでヒドロゲルを凍結乾燥し、さらなる特性評価のために保存します(2から適応した方法論)。</li>
</ol>2. FT-IR特性評価
<ol><li>FT-IR分光計に少しのヒドロゲル(1mm x 2 mm)をATRモードで置きます。FT-IR スペクトルを 4000 ~ 600 cm-1 (解像度の 2 cm-1、平均 32 スキャン) にします。</li>
</ol>3. 腫れアッセイ
<ol><li>ヒドロゲルからディスク(直径13mm、高さ10mm)を切り取り、重くします。25°Cで振とう脱イオン水の50 mLでディスクをインキュベートします。3 回繰り返します。</li>
	<li>30分ごとに培地からサンプルを取り出し、ブロッターして過剰な水分を除去し、重くします。式1を用いて膨潤度を計算し、<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/59636/59636eq1.jpg">式2を用いて24時間で膨潤の平衡状態を計算する。 <img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/59636/59636eq2.jpg">) 乾燥<img alt="Equation 3" src="/files/ftp_upload/59636/59636eq3.jpg">ヒドロゲルの重量はどこにいて、<img alt="Equation 4" src="/files/ftp_upload/59636/59636eq4.jpg">湿式ヒドロゲルの重量です。 <img alt="Equation 5" src="/files/ftp_upload/59636/59636eq5.jpg">
</li>
</ol>4. 電子顕微鏡
<ol><li>スパッタコーターで薄い金層(30sと10 mA)でヒドロゲルの小片をカバーします。</li>
	<li>試料を走査型電子顕微鏡(SEM)に入れます。20 kVで真空下でサンプルを分析し、500xおよび1500x倍率で画像を撮ります。</li>
</ol>5. ポロシメトリー
<ol><li>直径0.26g前後のディスク15mmをペネトロメーター(固体ペネトロメーター、0.3660 mL、5.7831 mLの幹容積)に入れます。水銀侵入ポロシメトリー(MIP)による気孔率と細孔サイズを分析します。</li>
	<li>ヒステリシスモード(侵入押し出し)で実験を行います。総侵入量(mL/g)、総細孔面積(m2/g)、細孔径(μm)、気孔率(%)、透湿性(mDarcy)、およびトルチュポシティを測定します。2 回繰り返します。</li>
</ol>6. 薬物の積み込みと放出
<ol><li>ロードする前に、15 mg/Lの4 Lを調製し、一晩撹拌する。UV-Vis分光法(初期濃度)により溶液の濃度を確認します。実際、24時間の蒸留水の6 mLでヒドロゲルの凍結乾燥サンプルの400mgを膨潤させる。</li>
	<li>ローディングの場合は、50mLのフラス溶液を充填し、一定攪拌しながら25°Cに維持します。フラスコに各膨らんだヒドロゲルを沈める。<ol>
<li>残りの二鼻水(2mL)のアリコートを異なる時間に取り、曲線の高原領域を決定します(例えば、3、6、24、27、30および48時間)。24時間後、溶液を新鮮なものに置き換えます。</li>
	</ol>
</li>
	<li>各アリコートの252nmで吸光度を測定し、溶液中に存在するディフルニザルの濃度を決定し、ダイルニザルの較正曲線を用いた。総体積(56mL)を考慮して、初期濃度と最終濃度の差として、24時間と48時間のヒドロゲル中に保持されるジフルニシャルの量を計算します。<ol>
<li>式 3 を使用してカプセル化効率 (EE) を決定します。 <img alt="Equation 6" src="/files/ftp_upload/59636/59636eq6.jpg">
</li>
		<li>ロードしたヒドロゲルを-80°Cで凍結し、-50°Cで凍結乾燥させます。</li>
	</ol>
</li>
	<li>薬物放出の場合、25°Cで50mLのリン酸緩衝液(pH 7.4)に凍結乾燥ジフルニサル装填ヒドロゲルの300mgを沈下させる。一定の攪拌を維持します。異なる時間に2 mLのアリコートを撤回し、一定のボリュームを維持するために新鮮な媒体に置き換えます。<ol>
<li>キャリブレーション曲線に従って、252 nmでディフルニサル放出分光法を確定します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>最初の60%に対応する薬物放出データを調整するヒドロゲル中の主な薬物放出機構を推測し、コルスマイヤー・ペパスモデル(式4)に、動態(k)および拡散(n)定数を得た。n値は、薬物放出24、25のメカニズムを示す。次に、0.5に近いn値はフィッキアン拡散に関連し、一方、異常輸送の場合は0.5~1.0の値が拡散および緩和鎖に関与し、最後に1.0の値はケースII輸送に関連する。 <img alt="Equation 7" src="/files/ftp_upload/59636/59636eq7.jpg"><ol>
<li>結果を確認するには、樋口、一次、ゼロオーダーの数学モデル(方程式5~7)を使用し、より良い適合度を選択します。</li>
		<li>
<img alt="Equation 8" src="/files/ftp_upload/59636/59636eq8.jpg"> <img alt="Equation 9" src="/files/ftp_upload/59636/59636eq9.jpg"> <img alt="Equation 10" src="/files/ftp_upload/59636/59636eq10.jpg"> ここで、tは放出時間を表し、所定の時間に送達された薬物の量をMt、およびM∞プロセスの終了時に送達される薬物の総量を表す。</li>
	</ol>
</li>
</ol>

著者たちは何も開示する必要はない。

凍結解凍法は、生体医、医薬または化粧品用途34、35、36に焦点を当てた生体適合性ヒドロゲルを調製するのに適したプロセスである。この方法の最も重要な利点は、ヒドロゲルを調製する他の公知の方法と比較して、架橋剤の使用が回避され、人体34に炎症反応または有害作用を引き起こす可能性があるということである。これは、PVAまたはその異なるポリマー11、37との混合物からヒドロゲルを調製する可能性を提供するので、他のポリマーからの新しい特性を新しい材料で得ることができるので汎用的な方法である(例えば、水を吸収する主要な能力、抗菌または抗酸化特性2、18、35)。<...

近年、ヒドロゲルは含水率の高い三次元ネットワークであり、柔らかく柔軟であるため、自然組織を容易に模倣できるため、生物医学分野に大きな関心を集めています。また、それらは生理的温度およびpHで水性媒体に溶解しないが、大きな腫脹2を示す。ヒドロゲルは、組織工学足場、衛生製品、コンタクトレンズ、および創傷ドレッシングとして機能することができます。彼らは、活性化合物および薬物をトラップして放出することができるので、それらは薬物送達システム3として使用される。それらの用途に応じて、ヒドロゲルは、天然または合成ポリマー、またはその両方の組み合わせから作製することができ、最良の特性を得るために4。
ヒドロゲルの特性は、多くの物理的および化学的要因の結果です。物理的なレベルでは、その構造と形態は、その空隙率、細孔サイズおよび細孔分布5に依存する。化学的及び分子レベルにおいて、ポリマー型、ポリマー鎖中の親水性基含有量、架橋点型、及び架橋密度は、膨潤能能力及び機械的性質を決定する因子である6、7である。
ネットワークを形成するために使用される架橋剤の種類に応じて、ヒドロゲルは、化学ヒドロゲルまたは物理的ヒドロゲルとして分類される。化学ヒドロゲルは、UVおよびガンマ照射を介して形成される鎖間の共有相互作用によって結合されるか、架橋剤7、8を使用する。化学ヒドロゲルは、通常、強く、耐性であるが、一般的に、架橋剤は細胞に有毒であり、その除去は困難であるため、その適用は限られている。一方、非共有相互作用を介したポリマー鎖の接続により物理的ヒドロゲルが形成され、架橋剤4、9の使用を回避する。ネットワーク内の主な非共有相互作用は疎水性相互作用、静電力、相補的および水素境界7である。
ポリ(ビニルアルコール)(PVA、図1a)は、凍結解凍法10、11を介して架橋剤フリーヒドロゲルから得ることができる優れた機械的性能および生体適合性を有する合成および水溶性ポリマーである。このポリマーは、12個を凍結している場合に、鎖の-OH基(結晶性ゾーン)間の水素結合の濃縮ゾーンを形成する能力を有する。これらの結晶帯はネットワーク内の架橋点として機能し、結晶水が膨張し、PVA立体構造が凍結13時にアイソタクティックからシンジオタクチックPVAに変化するポリマー鎖の接近という2つの事象によって促進される。凍結乾燥のために、水結晶は昇華され、ヒドロゲル14内の細孔である空隙空間を残す。より良い特性を有するヒドロゲルを得るために、PVAは他のポリマーと容易に組み合わせることができる。
その意味で、キトサンは天然源由来の唯一の生体高分子であり、正電荷を有する選択肢である。キチンの脱アセチル化により得られ、β-1,4連結D-グルコサミン(脱アセチル化単位)とN-アセチル-D-グルコサミン(アセチル化単位)15,16(図1b)のランダムな組み合わせから構成されている。キトサンはヒト酵素によって生分解性であり、生体適合性である。また、そのカチカチ性によって、細胞表面の負電荷と相互作用することができ、そしてこの性質は、その抗菌活性17と関連している。このポリマーは、処理が容易です。しかし、その機械的特性は十分ではなく、より良い特性を持つ複合体を形成するためにいくつかの材料が追加されました。
キトサンおよびPVAの特定の特性を考慮すると、ヒドロゲルの製造が成功し、有毒架橋剤の使用を回避するために凍結解凍法2、18によって達成された。キトサンPVAヒドロゲルでは、PVAの結晶性ゾーンも形成され、キトサン鎖が相互に浸透し、PVA中の-NH2基および-OH基との単純な水素結合を形成する。最終的なキトサンPVAヒドロゲルは機械的に安定しており、膨潤率が高く毒性が低く、抗菌効果は18である。ただし、調製に使用される凍結条件(温度、時間、サイクル数)によっては、最終的な特性が変化する場合があります。いくつかの研究は、凍結サイクルの数を増やすと腫れの程度を減少させ、引張強度19、20を増加させると報告しています。ネットワークを強化するために、ガンマやUV放射線、化学架橋剤などの他の薬剤が、凍結解凍製剤21、22、23の後に追加的に使用されている。キトサンの割合が高いヒドロゲルは、より多孔質なネットワークと高い膨潤能力を有するが、強度と熱安定性は低い。この文脈では、標的アプリケーションに適したヒドロゲルを得るための調製条件を考慮することが重要である。
この研究の目的は、凍結条件(凍結温度およびサイクル数)がCS-PVAヒドロゲルの最終的な特性にどのように影響するかを詳細に提示することです。FT-IRスペクトル、形態学的および気孔率特性および膨潤能、ならびに薬物の負荷および放出能を評価した。放出試験では、ジフルニサル(図1c)をモデル薬剤として用いた。

<table><tbody><tr><td>材料:</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>キトサン中分子量</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>448877</td><td>Mwは、毛細血管粘度法(637,000 Da)と70%</td></tr><tr><td>のジフルニサール(2'-4'-ジフルオロ-4-ヒドロキシ-3-ビフェニル-カルボン酸)</td><td>の脱</td>アセチル化度によって決定されますメルク<td></td><td></td></tr><tr><td>氷酢酸</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1005706</td><td></td></tr><tr><td>ポリ(ビニルアルコール)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>341584</td><td>Mw 89,000-98,000、99 +% 加水分解</td></tr><tr><td><ストロング> 設備:</ストロング></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>クレッシントン スパッタコーター 108 オート</td><td>TED PELLA INC</td><td></td><td></td></tr><tr><td>クライオドス 凍結乾燥機</td><td>テルスター</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ファルコンチューブ</td><td>サーモフィッシャーカンパニー</td><td></td><td></td></tr><tr><td>FT-IR分光法</td><td>ニコレットiS50</td><td>ATRモード</td><td></td></tr><tr><td>凍結乾燥装置</td><td>LABCONCO</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Micromeritics Autopore IV 9500</td><td>Micromeritics</td><td></td><td></td></tr><tr><td>走査型電子顕微鏡</td><td>Pemtron SS-300LV</td><td></td><td></td></tr><tr><td>紫外可視分光光度計</td><td>Agilent 8453</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

架橋剤を用いたキトサンポリ(ビニルアルコール)ヒドロゲルを架橋剤とジフルニサル放出研究用に調製する凍結解凍法

A Freeze-Thawing Method to Prepare Chitosan-Poly(vinyl alcohol) Hydrogels Without Crosslinking Agents and Diflunisal Release Studies

キトサンポリ(ビニルアルコール)ヒドロゲルは、有毒な架橋剤を用いずに凍結解凍法により製造することができる。これらのシステムの適用は、凍結条件およびポリマーの種類および比率に依存する特性(例えば、空隙率、柔軟性、膨潤能、薬物負荷および薬物放出能力)によって制限される。このプロトコルは、キトサンおよびポリ(ビニルアルコール)からヒドロゲルをポリマー組成物の50/50 w/w%で調製し、凍結温度(-4°C、-20°C、-80°C)および凍結解凍サイクル(4、5、6凍結サイクル)を変化させる方法を記述します。ヒドロゲルのFT-IRスペクトル、SEM顕微鏡写真及びポロシメトリーデータが得られた。また、膨潤能力および薬物のローディングおよび二十種の放出を評価した。SEM顕微鏡写真とポロシメトリーの結果は、細孔サイズが小さくなり、気孔率が低い温度で増加することを示しています。腫脹率は、軽度の凍結温度で高かった。ヒドロゲルからのジフルーニサルの放出が研究されている。すべてのネットワークは30時間の薬物放出を維持し、単純な拡散メカニズムがコルスマイヤー・ペパスおよび樋口モデルに従ってジフニザル放出を調節することが観察されている。

ヒドロゲル調製 キトサンPVAヒドロゲルは、-4°、-20°Cおよび-80°Cで4つの凍結サイクルで、および-80°Cで、前回報告された凍結解凍法2による5および6の凍結サイクルで得られた。すべてのヒドロゲルは、均質で半透明で、柔軟で、操作に対して耐性がありました。
FT-IR特性評価 FT-IR スペクトルを図 2に示します。キトサンおよびPVAポリマーの7つの特性信号が検出された:3286cm-1でPVAヒドロキシル基(-OH)の延伸振動モードと2918cm-1で-CH群26、27の延伸振動モード。キトサ...

凍結解凍法は、架橋剤を用いたキトサンポリ(ビニルアルコール)ヒドロゲルの製造に用いられる。この方法では、得られたヒドロゲルの特性および用途に影響を及ぼす可能性のある凍結条件(温度、サイクル数)およびポリマー比を考慮することが重要である。

Chitosan-poly(vinyl alcohol) hydrogels can be produced by the freeze-thawing method without using toxic crosslinking agents. The applications of these ...

当社の凍結融解法は、生体医療、医薬品、または化粧品用途に使用するための生体適合性ヒドロゲルを調製するのに適したプロセスであるため、このプロトコルは重要です。この方法の主な利点は、出生時欠損を引き起こす可能性のある化学的架橋剤を使用していないということです。また、この方法で利用される凍結条件は、度等のヒドロゲルの最終特性を制御する。この方法は、他の用途とヒドロゲルに適用することができる。これは水質汚染を治療するために使用されます。実際、新しい培養用の水容器として使用されるポリマービーズを製造するために使用できます。測定するポリマー溶液を完全に均質化することが重要です。それ以外の場合、ヒドロゲルは割れ点を提示します。また、各サイクルの凍結時間に注意する必要があります。この手順を開始するには、キトサンの0.2グラムと室温で0.1モル酢酸の10ミリリットルを溶解し、連続的な機械的撹拌を一晩維持し、2%キトサン溶液を調製する。翌日、PVA1グラムと蒸留水10ミリリットルを溶解し、摂氏80度で1時間かき混ぜます。磁気スターラーを使用して、均質になるまで室温で同量の溶液を混合します。ペトリ皿に混合物を注ぎます。放気するために2時間、大気圧でサンプルを残します。ヒドロゲルをマイナス4度、マイナス20度、マイナス80度で20時間4サイクル凍結します。5~6回の凍結サイクルを使用して、マイナス80度で別のヒドロゲルを20時間凍結します。3回目の凍結サイクルの後、ヒドロゲルを脱イオン水で洗浄します。最後の凍結サイクルの終わりには、マイナス50°Cで48時間ヒドロゲルを乾燥させ、さらなる特徴付けのためにかき混ぜます。FT-IR特性を実行する準備ができたら、ATRモードでFT-IR分光光度計にヒドロゲルの小片を配置します。4000 から 600 の波長の FT-IR 分光器を取ります。まず、直径13ミリメートル、高さ10ミリメートルのヒドロゲルからディスクを切り取ります。彼らの重量を量る。揺れながら摂氏25度で50ミリリットルの脱イオン水でディスクをインキュベートします。30分ごとに培地からサンプルを取り出します。余分な水を除去し、それを重量を量るためにサンプルをブロット。次に、膨れ上がり度を計算し、テキストプロトコルで概説されているように電子顕微鏡と孔非対称を行います。ロードする前に、1リットル当たり15ミリグラムで4リットルのディフルニサル溶液を調製し、一晩かき混ぜます。UV-Vis分光法により溶液の濃度を確認します。その後、400ミリグラムの凍結乾燥ヒドロゲルサンプルと6ミリリットルの蒸留水を24時間膨らませます。ローディングの場合は、フラスコに50ミリリットルのディフルニサル溶液を充填し、一定の攪拌で摂氏25度で維持します。フラスコに膨らんだヒドロゲルを水没する。次に、残りの

a-freeze-thawing-method-to-prepare-chitosan-poly-vinyl-alcohol

Research

JoVE Journal

Bioengineering

バイオエンジニアリング（生体工学）

現在の幹細胞治療の主要なハードルは、ホスト組織にこれらの細胞を提供するための最も効果的な方法を決定しています。ここでは、その多能性を維持するために、脂肪由来幹細胞を可能にしながら、アプローチの効率的かつ単純であるキトサンベースの配信方法について説明します。...

幹細胞にロードされたキトサンミクロスフェアの配信のためにコラーゲンハイドロゲルの構築

このプロトコルは、その周囲の細胞外マトリックスからヒントを得るために、複数の表現型に分化するよう誘導される幹細胞の固有の能力を活用に焦点を当てています。このメソッドの原稿は、同時に脂肪由来幹細胞を共区別するために、PEG-フィブリンおよびコラーゲンから成る二層ハイドロゲルを利用したモデルでは、我々の説明とその特性を拡張する...

ASCの分化を制御するための二層ゲルをエンジニアリング

凍結乾燥は、多くの場合、生菌細胞の乾燥製品を得るための簡単​​で便利な方法です。プロセスの問題は、細胞生存ある。ここで我々は細部、凍結乾燥時の細胞の生存が使用製剤の特性によって影響されるか調査する手順を。...

細菌の凍結乾燥と細胞の生存への影響のための処方

このプロトコルの目的は、幹細胞のホーミング因子であるSDF-1αをデキストラン硫酸-キトサンナノ粒子に組み込むことです。 得られた粒子は、そのサイズとゼータ電位、およびナノ粒子からのSDF-1αの含有量、活性、およびin...

SDF-1α-キトサン硫酸デキストランナノ粒子の調製とキャラクタリゼーション

スキャフォールドは、細胞ニッチの複雑な生化学的および生物物理学的な微小環境を再現する必要があります。ここでは、界面高分子電解質錯体化繊維をプラットフォームとして使用して、持続的な生化学的放出を伴う複合多成分高分子足場を作成する方法を示します。...

生体分子の時間的に制御された放出のための界面高分子電解質繊維の複合足場

ポリ（N-イソプロピルアクリルアミド） - グラフト - コンドロイチン硫酸からなる注射可能な組織工学足場は、（のPNIPAAm-G-CS）含有アルギン酸微粒子を調製しました。接着強度、膨潤性及び生体適合性、インビトロでは、この研究で分析されています。ここで開発された特性決定技術は、他の熱ゲル化システムにも適用可能です。...

組織工学のためのアルギン酸微粒子と熱ゲルポリ（N-イソプロピルアクリルアミド） - グラフト - コンドロイチン硫酸複合材料の合成

リアルタイムでのキトサンフィルム上にペプチドグラフトを監視するためのキャピラリー電気泳動

高い特異性で副作用を軽減して腫瘍部位に抗がん剤を送達するためには、ナノ粒子に基づく新しい方法が必要です。ここでは、過酸化水素を介した酸化によって容易に調製でき、還元腫瘍環境下で効率的に解離してペイロードを放出できるジスルフィド架橋ミセルについて説明します。...

リバーシブルジスルフィド架橋ミセルの生産のための簡便かつ効率的なアプローチ

ここで動的イミン化学を用いたキトサン ベース注射ゲルの作製について述べる。ハイドロゲルの機械的強度と 3 D...

キトサンを用いた注射ゲルおよび 3 D 細胞培養への応用の準備

本研究では、特殊な装置を必要としない化学的手法により、発泡体にチチンを拡大する方法を説明する。...

膨張したキチン発泡体の調製と水性銅の除去における使用

本プロトコールは、キトサン−ゲニピンミクロゲルの作製のための非エマルジョンベースの方法を記載する。これらのミクロゲルのサイズは正確に制御することができ、pH依存性の腫脹を示し、...

組織工学用途のためのサイズ制御およびエマルジョンフリーのキトサン-ジェニピンミクロゲルの製造

学ぶ凍結解凍法によるキトサン・ポリビニルアルコールヒドロゲルの調製技術。化学架橋剤を使用せず、生体適合性と薬物放出制御を実現する革新的な材料設計手法です。

架橋剤を用いたキトサンポリ(ビニルアルコール)ヒドロゲルを架橋剤とジフルニサル放出研究用に調製する凍結解凍法

さらに動画を探す