ラットの神経再生の中央値を評価する機能と生理学的方法

ラットの中央値神経を用いて、ヒトにおける末梢神経病変を適切に複製することができる。臨床的には、これらの病変のほとんどは、この実験モデルの使用に支持を貸す上肢で起こる。本論文では、ラット内で異なるタイプの中枢神経病変を生成する方法を示す。

さらに、いくつかの検査を用いてこの神経の機能回復を評価する方法を説明する。中央値神経は脊髄セグメントC6からT1に由来する。中央値の神経は緑色で強調表示されます。このビデオでは、手術用ドレープはデモ目的では使用されません。

手術を行う間はドレープを含めてください。右腕および胸部領域の内側の皮膚は、深いファシアス平面まで切開される。出血性血管は慎重に結紮される。

次に、腕筋膜を慎重に切断し、腕の内側の側面において血管および神経構造を損傷しないように注意する。はさみのペアは、胸筋の末端挿入、この筋肉をいじめるために、下の腋窩動脈および静脈から離れ、ならびに腕神経叢の末端枝から離れて、ぶっきらぼうに開いている。大胸筋の挿入は、次いで電気焼灼で分けられる。

その後、小胸筋が露出して切断されます。内側神経は、その後、腕血管から、そして肘領域までウルナー神経からぶっきらぼうに解剖される。腕神経叢の異なる末端枝、すなわち中央値、ウルナー、ラジアル、腋窩、および筋切皮神経を観察することが可能になりました。

中央値神経暴露および孤立した異なる機械的傷害を誘発することができる。シャムグループは、中央値神経を解剖するだけで作成できます。クラッシュ群では、中央分離神経は、15秒間マイクロ手術鉗子を使用して、圧縮される。

切除群は、中央分離神経の10ミリメートルの長いセグメントの除去から生じる。中央値神経の近位切り株は8-0で結紮される軸索の成長を防ぐためのナイロン縫合糸。あるいは、切除されたセグメントを180度回転させ、自家神経移植片として使用することができる。

この場合、メディア神経の断面の近位および遠位の切り株は、10-0ナイロンステッチを使用して神経移植片に縫合される。理学療法は、末梢神経損傷から回復する患者のケアの標準の一部です。ラットに術後理学療法を提供するための複数の戦略があり、これは中央値神経損傷に提出されています。

若いラットを選択し、手術前に理学療法器具と接触できるようにすることが重要です。これらは、運動の設定に簡単かつ迅速に適応を保証します。さらに、理学療法器具は、ラットがある程度の自由度を持ち、理想的には前足で微細な動きを行うことを可能にするべきである。

理学療法を行う方法はいくつかあります。たとえば、個々の球を使用できます。球体の中にネズミを入れて、障害物の少ない部屋に置きます。

30分間部屋を探索しましょう。これを1日1回行います。ラットは、個々のケージに収容することもできる。

組み込まれたランニングホイール付き。このようにして、ラットは好きなだけ、いつでも運動することができます。別の可能性は、より大きなケージ内の群のラットを収容する。

革、ロープ、ランニングホイール、その他の環境濃縮要素を使用してケージをパーソナライズします。これらは、自然な探索的行動と一致して、移動の十分な自由を可能にし、ラットが機能テストに存在する要素の一部を理解することを可能にする。機能テストを行う前に、ポジティブな補強として使用することを選択した食品のお菓子をラットに精通してください。

ラットが自然により活発である夕方にテストを行います。把握テストから始めます。グリッド上にラットを置き、グリッドをつかむため、その尾でそれを持ち上げます。

ラットがグリッドをつかむことができるとき、両方の前足と同様の強さで。これは、中央値神経が機能しており、把握テストが陽性であると考えられていることを意味します。負傷した足でグリッドをつかむことができない場合、把握テストは陰性とみなされます。

ピンプリックテストでは、ラットをプラットフォームに置き、探索的および主要なグルーミング活動が収まるまで数分待ちます。ラットが静止していて、前足の上に立っているときに開始します。ミラーの助けを借りて、前足の手のひらの側面を突くためにメッシュを通してフォンフレイの髪を挿入します。

各前足でこれを5回繰り返し、あるいは各評価後数秒待ちます。ラットがゆっくりとフィラメントから足を取り除き、ラットが刺激に迅速に反応して足を取り除くか、足を舐めたりした場合は、引き出し応答なしのゼロ、次のように撤回応答をスコア付けします。ラットをはしごの底に置き、ラットの尾にそっと触れます。

ネズミが歩き始めたらタイマーを開始し、そのスナが箱の入り口を横切ったらそれを止めます。時間を記録し、テストを3回繰り返します。ロープの底にネズミを置き、そっと尾に触れて登るように説得します。

動物が、タスク中に躊躇しない、または登山を停止しない場合は、テストが有効であると考えてください。動物が登山を開始したらタイマーを開始し、ラットのスナがプラットフォームの入り口を横切った瞬間に停止します。ラットを実行した後、正しくタスクを与え、それを繰り返す前に、休息のいくつかの分を許可します。

廊下の床にグラフ用紙を置きます。その後、その尾でラットをつかみ、メチレンブルーに含浸し、塗装ブラシを保持してみましょう。廊下の入り口に置いて、箱の中を歩かせる。

廊下の床からグラフ用紙を取り出し、両方の前足の良い、代表的な印象を得るまでテストを繰り返します。取得したプリントから、連続したフォルピーの良好なプリントを持つものを選択し、次のパラメータを測定します。印刷の長さ、指の広がり、中間指の広がりとスタンスファクター。

最後に、2つの連続したプリントの2番目の指の間の距離、ストライド長さを測定します。サーモグラフィー評価を行う場合は、スポンジに両面接着剤を置きます。その上にネズミを置き、図のように前足を接着します。

ラットの足の取り扱いから熱交換を散逸させるのに1分待ちます。ラットから約30センチメートル離れた90度の角度でカメラをつかみます。2 つの買収を行います。

まず、全身サーモグラムを、次に、ラットの上半身にカメラを近似して、2番目のものを作ります。得られたサーモグラムから、前足のパルマー領域に対応する関心領域を見つける。両足の平均、最小、最大温度値を測定し、温度差を計算します。

以下の評価を行うために、前に説明したように両側の中央分離帯を露出させる。ラットを背中に置き、皮膚に示す電極を置くことから始めます。ラットの太ももの接地電極と左上肢の刺激および記録電極。

記録電極を、フレクタージディソラムサブリミス筋腹に、刺激電極を中央神経にほぼ置く。10ミリボルトの刺激振幅で取得を開始し、徐々に2ボルトに達するまで10ミリボルトのステップでそれを増加させます。取得中に、最初に目に見える指の屈曲に対する刺激振幅を登録します。

それが運動刺激閾値です。最小刺激振幅は、化合物筋肉作用電位を得るために必要とされ、神経学的刺激閾値C.M.A.P.is。最後に、最大性刺激に応じて代表的なC.M.A.Pを選択し、次のパラメータ、レイテンシ、振幅、および持続時間を測定します。

屈曲強度評価を行うために、まず5~6個のシルク縫合ループを各フォアポーのパルマー領域に通し、5センチの長さにしておきます。ネズミを背中に置きます。左前足から始めて、ダイナモメーターフックで縫合線をフックし、フックに過度の負担をかけることなく、前足をダイナモメーターに合わせます。

刺激電極を中央分離神経にほぼ保持します。刺激振幅を1.5ボルトに調整し、30秒間瞬間力を記録します。取得したプロットから、最大、最小、平均の力の値と曲線の下の面積を分析します。

中央分離神経によって内面化されたフレクターカルピ放射状は、両側で除去され、精密スケールで計量される。いくつかの代表的な結果に関しては、把握テストでは、陽性反応を有するラットの割合は、シャム群で最も高く、時間の経過とともに徐々に増加し、神経移植群のラットで増加する。ピンプリック試験結果は、移植片または切除群のいずれかと比較して、シャム群においてより高い。

ラダーランニングテストにおけるラットの速度は、ラットが内側の実験室病変に提出されたよりも、シャムグループで最も高い。ライターの中でも、はしごを走る時間は、中央値の神経回復を比較して時間の経過とともに減少する傾向がある。ラダーランニングテストで観察されるものと同様に、ラットがロープを登るのにかかる時間は、中央値神経が負傷したグループと比較して、シャムグループでは劣っている。

ラット速度は、この試験において、ラットにおいて増加し、中枢神経が回復することを許される。これらの棒グラフに示されるように、歩行ラットの分析は、足のプリントの形態の変化を示す傾向がある。これらの変化は、多くの場合、セグメント神経病変よりも破砕傷害において、より顕著である。

このグラフは、サーモグラフィーが手術後の最初の30日間の前足の温度差を検索するのに役立つツールであるように見えることを示しています。これらの温度差は、切除群の例のように、より重傷を負った中央値神経を有するラットにおいて、より顕著である。ラットの屈曲強度は、神経回復の程度と直接相関している。

回復が最大である場合、切除および神経移植群の両方の足で強度を比較するこれらの棒グラフで見ることができるように、正常に最も近い。電子顕微鏡学では、様々なパターンが観察されます。通常のC.M A.P.ポテンシャルは、シャムグループのラットの典型的なです。

多発性C.M.A.P.is関連しているが、中メジアン神経の可変的な程度の病変と、クラッシュおよび神経移植群で起こるように。切除グループにはC.M A.P.の波とカルピ放射状の形態は、中央値の神経回復に依存しています。これらの2つの画像は、シャムと切除グループで、これらの筋肉を示しています。

本論文に示すように、ラットの中央神経は末梢神経病変および修復の便利なモデルである。モーターと感覚回復を評価するために、複数の標準化された戦略が利用可能です。これらの多くは非侵襲的であり、毎日の評価を可能にする。

最後に、実験的な理学療法の設定は、臨床状況における回復をシミュレートすることができ、ヒト種に対する結果の規定を促進する。