コラゲナーゼEを用いてマウスコロンからのラミナプロプリア単核細胞の単核細胞の単核細胞の単核細胞の単核細胞の単核細胞の単核細胞の単核細胞の単核細胞の単核細胞の単核細胞

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2019年9月26日

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2019年9月26日

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Duneia McManus¹^,²^,³^,⁴ , Horacio J. Novaira¹^,²^,³^,⁴ , Anouk A.J. Hamers¹^,²^,³^,⁴ , Asha B. Pillai¹^,²^,³^,⁴^,⁵

¹Department of Pediatrics, Division of Hematology / Oncology and Bone Marrow Transplantation, University of Miami Miller School of Medicine, ²Batchelor Children's Research Institute, University of Miami Miller School of Medicine, ³Department of Microbiology & Immunology, University of Miami Miller School of Medicine, ⁴Sylvester Comprehensive Cancer Center, University of Miami Miller School of Medicine, ⁵Holtz Children's Hospital, University of Miami Miller School of Medicine

このプロトコルの目的は、コラゲナーゼを用いて組織の酵素消化によって結腸のラミナプロプリに存在する単核細胞を単離させることである。このプロトコルは、単核細胞の効率的な単核分離を可能にし、その結果、単一細胞懸濁液を生成し、堅牢な免疫表現型に使用することができます。

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マウス結腸の単離

コラゲナーゼE消化

密度勾配分離

フローサイトメトリー解析

セルストレーナーろ過

オービタルシェーカーによるインキュベーション

FACSバッファーによる洗浄

免疫細胞表現型解析

Chapters in this video

0:04

Title

1:00

Harvesting the Colon

1:32

Cleaning the Colon

3:10

Collagenase Digestion 1

3:34

Silica-Based Density Separation Media Gradient Separation

5:44

Collect Mononuclear Cells from the Gradient Interface

6:39

Results: Isolation of Lamina Propria Mononuclear Cells

8:40

Conclusion

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