Inducing and Characterizing Vesicular Steatosis in Differentiated HepaRG Cells

Silvia Di Cocco; Laura Belloni; Abigail  D.G. Nunn; Debora Salerno; Silvia Piconese; Massimo Levrero; Natalia Pediconi

doi:10.3791/59843

JoVE Journal
Medicine

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Medicine

Inducing and Characterizing Vesicular Steatosis in Differentiated HepaRG Cells

分化HepaRG細胞における大胞性脂肪症の誘導と特徴付け

Full Text

9,486 Views

09:15 min

July 18, 2019

DOI: 10.3791/59843-v

Silvia Di Cocco^1,2, Laura Belloni³, Abigail D.G. Nunn³, Debora Salerno³, Silvia Piconese^2,4, Massimo Levrero^2,3,5,6, Natalia Pediconi^1,3

¹Department of Molecular Medicine,Sapienza University, ²Department of Internal Medicine - DMISM,Sapienza University, ³Center for Life Nano Science@Sapienza,Istituto Italiano di Tecnologia, ⁴Pasteur Institute Italy-Fondazione Cenci Bolognetti, ⁵INSERM U1052-Cancer Research Center of Lyon, ⁶Department of Hepatology,Croix Rousse Hospital, Hospices Civils de Lyon

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

本研究では、脂肪酸塩オレイン酸オレイン酸を用いた分化HepaRG細胞における肝小胞性脂肪症を誘導するための詳細なプロトコルを説明し、一貫性のある抗ストークスを含む脂質蓄積の検出と定量のための方法を採用する。ラマン散乱(CARS)顕微鏡、細胞フルオロメトリクス分析、オイルレッドO染色、およびqPCR。

このプロトコルは、脂質蓄積の検出と定量のための方法と分化 HepaRG 細胞で肝臓の小胞性脂肪症を誘導する方法を記述します。.このインビトロヒト細胞モデルは、生体内マウスモデルおよび原発性ヒト肝細胞に代わる貴重な代替手段となる。脱霜するまで37度摂氏バスに浸漬することにより、HepaRG細胞の窒素凍結保存低通過バッチを解凍する。

増殖培地の10ミリリットルを含む15ミリリットルのチューブに急速に細胞を移す。5分間遠心した後、上清を捨て、増殖培地の5ミリリットルで細胞を再懸濁する。細胞を数え、1平方センチメートルあたり250,000個の細胞をプレートするために希釈する。

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos