Tumorsphere Derivation and Treatment from Primary Tumor Cells Isolated from Mouse Rhabdomyosarcomas

Francesca Boscolo Sesillo; Alessandra Sacco

doi:10.3791/59897

JoVE Journal
Genetics

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Tumorsphere Derivation and Treatment from Primary Tumor Cells Isolated from Mouse Rhabdomyosarcomas

マウス横紋筋肉腫から単離された原発性腫瘍細胞からの腫瘍球誘導と治療

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09:21 min

September 13, 2019

DOI: 10.3791/59897-v

Francesca Boscolo Sesillo^1,2,3, Alessandra Sacco²

¹Graduate School of Biomedical Sciences,Sanford Burnham Prebys Medical Discovery Institute, ²Development, Aging and Regeneration Program,Sanford Burnham Prebys Medical Discovery Institute, ³Department of Obstetrics, Gynecology, and Reproductive Sciences, Division of Female Pelvic Medicine and Reconstructive Surgery,University California San Diego

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このプロトコルは、マウス横紋筋肉腫原発細胞の単離、腫瘍球形成および治療、および腫瘍球培養から始まる同種移植片移植のための再現可能な方法を説明する。

横紋筋肉腫は、組織形態と筋形成マーカーの発現によって組織学的に特徴づけられる軟部肉腫の稀な形態である。しかし、これらの腫瘍の異なるサブタイプの存在とその形成に寄与する刺激の不均一性を考えると、起源の細胞の同定は非常に困難であった。ここでは、マウスから採取したばかりの腫瘍組織から始まる横紋肉腫の起源の細胞を同定するための再現性と信頼性の高い方法を説明し、このアッセイは腫瘍球形成アッセイである。

腫瘍球形成アッセイの主な利点は、腫瘍発生細胞に存在することが知られている細胞特性に依存し、特定の細胞集団の拡張および濃縮にも使用できることである。さらに、そのスフェロイド構造は腫瘍環境を模倣し、したがって、それらは薬物スクリーニング研究として使用することができる。この方法は、分子マーカーの事前知識を必要としないが、培養条件の最適化を必要とするため、他のタイプの腫瘍に適用される可能性がある。

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