Isolation, Transfection, and Culture of Primary Human Monocytes

Karlie Plaisance-Bonstaff; Celeste Faia; Dorota Wyczechowska; Duane Jeansonne; Cecilia Vittori; Francesca Peruzzi

doi:10.3791/59967

JoVE Journal
Immunology and Infection

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JoVE Journal Immunology and Infection

Isolation, Transfection, and Culture of Primary Human Monocytes

原発性ヒト単球の単離、トランスフェクション、培養

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09:13 min

December 16, 2019

DOI: 10.3791/59967-v

Karlie Plaisance-Bonstaff^1,2, Celeste Faia², Dorota Wyczechowska¹, Duane Jeansonne¹, Cecilia Vittori^1,3, Francesca Peruzzi^1,2

¹Department of Medicine,Louisiana State University Health Sciences Center, ²Department of Microbiology, Immunology, and Parasitology,Louisiana State University Health Sciences Center, ³Department of Biomedical and Clinical Sciences L. Sacco,University of Milan

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

ここでは、HIVに感染した個体および健全なコントロールからヒト一次単球を分離、培養、トランスフェクション、および区別するための最適化されたプロトコルです。

HIV感染は、検出可能なウイルスのない抗レトロウイルス療法を受けている個人でも免疫機能障害を引き起こす。この方法は、免疫応答の主要な調節因子である単球機能の研究を可能にする。我々は、ヒトの一次単球の単球の単離、培養、トランスフェクションのためにこの技術を最適化しました。

この方法を用い、HIV感染者の免疫機能障害の分子機構を理解しますが、単球を含む他の免疫研究にも応用できます。これが人間の血液を扱う初めての場合は、適切な生体安全プロトコルに従い、すべてのサンプルを感染性物質として扱うことを忘れないでください。4つの10ミリリットルEDTA真空管で40ミリリットルの新鮮なヒト全血を採取した後、無菌技術を使用して、バイオセーフティキャビネット内の単一の50ミリリットルの円錐形プロピレンチューブに血液のすべてを移動させます。

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