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排ビボ移行システムにおけるリンパ球移動の評価
排ビボ移行システムにおけるリンパ球移動の評価
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JoVE Journal Immunology and Infection
Assessment of Lymphocyte Migration in an Ex Vivo Transmigration System

排ビボ移行システムにおけるリンパ球移動の評価

Full Text
7,399 Views
10:25 min
September 20, 2019

DOI: 10.3791/60060-v

Kristi J. Warren1,3, Todd A. Wyatt2,3,4

1Department of Internal Medicine,University of Utah, 2Research Service,VA Nebraska Iowa Health Care System, 3Department of Internal Medicine,University of Nebraska Medical Center, 4Department of Environmental, Agricultural & Occupational Health,University of Nebraska Medical Center

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

このプロトコルでは、リンパ球は、多孔質膜によって下部チャンバから分離された移行系の上部チャンバーに配置される。ケモカインは底室に添加され、ケモカイン勾配に沿って活発な移動を誘導する。48時間後、リンパ球は、移行を定量するために両方の部屋でカウントされます。

リンパ球トランスマイグレーションは、免疫応答の重要な特徴です。したがって、このプロトコルは、研究者が明確に定義されたin vitroシステムにおけるリンパ球の移動性を評価することを可能にするので重要である。この技術の主な利点は、グループ2の先天性リンパ球細胞、またはILC2のような最近定義された細胞における移行を誘発する効果を決定するために様々なケモカインを評価できることである。

第二の利点は、特定のケモカイン経路を遮断することを目的とした阻害剤または生物学的療法が、動物でより高価な実験を行う前に、この方法によって試験され得る点である。まず、1群につき2~3匹の動物を使用して、安楽死した卵子処理の雄マウスおよび雌マウスから肺および脾臓を切除することから始める。切除した組織を、組織の種類と動物の性別に応じて分離解離チューブに入れる。

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