Name: 葉住まいの節足動物を定量化する方法 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-10-20T13:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 20 s
Description: 学ぶ葉に住む節足動物の定量化法。袋に密封し凍結・洗浄して飛翔・這行性の節足動物を効率的に採集する。樹木や低木に適用可能で、生態学研究や昆虫相調査に有用な系統的手法です。

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著者らは、USFS協定13-CS-11090800-022を通じてこのプロジェクトに資金を提供した米国農林局に感謝したいと思います。須田J.スーダ、W.ホランド、その他の研究室支援に感謝します。

1. フィールドに移動する前にサンプリングデバイスを構築する
<ol><li>ボルトカッター、大型ワイヤーカッター、または電気研削ディスクを使用して、30cmワイヤートマトケージの底部を取り外し、長さ約55cmになります。</li>
	<li>トマトケージの最大端の両側に取り付け棒とブレースとして使用するために、アルミニウムまたは同様に半剛性材料から作られた2、50センチメートルのブレースをカットします。端から 38 cm で、テーブルトップバイスまたはチャネル ロックなどの大きな把握ツールを使用して、ブレースを約 30° の角度に曲げます。2本のアタッチメントロッドの長い端をトマトケージの反対側にジップタイとダクトまたは電気テープで取り付け、テープがケージとロッドの少なくとも6cmの周りに巻かれていることを確認します。ケージがロッドに永久に取り付けられていることを確認するために、ケージとロッドの周りにテープを何度も巻き付けることを確認してください。</li>
	<li>ジップタイとダクトまたは電気テープを備えた拡張可能なポールの端の反対側に、2 本のアタッチメント ロッドのもう一方の端を取り付けます。前と同様に、テープを複数回巻いて固定し、テープがポールとロッドに少なくとも6cm重なっていることを保証します。</li>
	<li>ジップタイと電気またはダクトテープを使用して、ケージをポールの端に直接取り付けます。フックアンドループファスナーストリップを3点で取り付け、以前に取り付けたポールからケージ90°の開口部に取り付けます。 注:これらのストリップは、バッグを開いたままにするために後で使用されます。</li>
</ol>2. ブランチの囲み
<ol><li>袋の外側の開口部にフックアンドループファスナーを2個取り付け、ケージの開口部に取り付けられたフックアンドループファスナーと整列させます。これらは、サンプルブランチの上に持ち込まれる間、バッグの開口部を所定の位置に保持するために使用されます。フックとループのファスナーが揃っているので、バッグを挿入して取り付けると、バッグのプルストリングの開口部がテレスコーピングポールに平行に走るようにします。</li>
	<li>ワイヤートマトケージに~49Lキッチンゴミ袋を挿入します。袋の底の各側に1つのゲータークリップを置き、バッグとワイヤケージの両方にクリップを取り付け、ケージに対してバッグを保持します。引き張りストリングに1つのゲータークリップを取り付け、ポールの反対側のワイヤケージで、バッグの上部に同じ手順を繰り返します。</li>
	<li>ポールに最も近いバッグの引き紐にパラコードを取り付けます。4cmのセクションにプラスチックまたは硬質ゴムチューブの4つの部分をカットし、4つの場所でダクトまたは電気テープで取り付けます。最初は、トマトケージに最も近いポールの端から約0.5メートルのポールの延長部分に配置する必要があります。 残りの3つは、下部の上部から約5cm(すなわち、上部、中央および下に沿ってそれぞれ)から始まる延長極の下部に沿って等距離を配置する必要があります。プラスチックチューブを通してバッグに取り付けられていないパラコードの端を通します。</li>
	<li>各サンプル ツリーに対して、乱数ジェネレータを使用して、最大長で延長された場合に延長極の高さ内にあるサンプル高さを選択します。乱数ジェネレータを使用して、ツリートランクからのサンプル距離を選択します。葉への妨害を最小限に抑えてバッグに収まる分岐を識別し、乱数発生器から生成された数に基づいてトランクからの高さと距離です。</li>
	<li>サンプリングポールを目的の分岐と平行な高さに上げます。袋を枝の上に素早くスライドさせ、袋の引き紐に取り付けられたパラコードの紐を素早く引っ張って袋を密封します。葉に最小限の妨害で葉を組み込むのが効率的になる最初の試みの前に、これを数回練習してください。</li>
	<li>2人目の人に、バッグの開口部に隣接する場所で、延長ポールプルーナーで枝をクリップし、クリップしを行います。慎重にサンプルバッグを地面に持ち込み、袋の引き紐を閉じて素早く結びます。昆虫が逃げるのを防ぐために、袋詰め、切断、および袋結びのステップをできるだけ早く完了するようにしてください。</li>
	<li>袋詰めされた枝を冷凍庫に保管し、実験室の節足動物分析を行う準備ができるまで保管してください。</li>
</ol>3. 節足動物分析
<ol><li>冷凍袋を直立させ、サンプルブランチを袋に入れて振り、節足動物を袋に取り除きます。慎重に枝を取り外し、残りの節足動物を除去するために大きなコレクションパンですすいでください。バッグからコレクション パンに残っているマテリアルを空にします。非節足動物の破片を取り除きます。</li>
	<li>節足動物を所望の分類群に分ける。幼虫と成人の違いに注意してください。</li>
	<li>必要に応じて節足動物を定量します。バイオマスが関心がある場合は、節足動物の長さを測定し、発行された長さの質量テーブルを使用してバイオマスを推定するか、または小さな乾燥パンに節足動物を置き、45°Cで24時間乾燥オーブンで乾燥し、電子バランスで重量を量ります。</li>
</ol>4. 密度の推定
<ol><li>樹種内および樹種間のサンプル間の葉構造と葉の密度の変化の密度と制御を推定するには、次のいずれかの方法で行います。</li>
	<li>各サンプルの葉の表面積をカウントし、測定します。</li>
	<li>45°Cで48時間乾燥オーブンで葉を乾燥させ、電子バランスで葉を計量します。</li>
	<li>サンプル内のすべての木質枝の長さを測定します。 注:節足動物群ではディールの違いが生じるので、推論の全期間を通してサンプリングを行う必要があります。</li>
</ol>

著者は何も開示していない。

節足動物群を正確に定量化する2つの必需品は、比較的高い検出確率と既知または一貫性のあるサンプリング領域です。節足動物のサンプリング時に、100%未満の検出確率は、トラップを回避する個々の節足動物または処理中に検出されないトラップされた一部の個体のいずれかに起因する可能性があります。飛行関節動物(倦怠感/窓トラップ、粘着性トラップなど)をインターセプトするインターセプタートラップは、森林キャノピー29、30、31の節足動物群を列挙する最も頻繁に使用されるアプローチであるように見えます。これらのタイプのトラップは、天蓋全体に配置することができ、飛行節足動物を傍受するのに有効であり、通常、後の識別と定量のために長期間(数週間または数ヶ月)節足動物を保存し、29、30 、31...

陸上節足動物は、私たちの生態系において重要な役割を果たしています。科学的な関心の節足動物であることに加えて、作物、園芸植物、自然植生に有害で有益であるだけでなく、食品ウェブで重要な栄養機能を提供することができます。したがって、節足動物のコミュニティの発達と豊かさに影響を与える要因を理解することは、農家、害虫駆除管理者、植物生物学者、昆虫学者、野生生物生態学者、およびコミュニティのダイナミクスを研究する保全生物学者にとって重要です。昆虫生物を管理する。節足動物のコミュニティと豊富に影響を与える要因を理解するには、多くの場合、個人の捕獲が必要です。キャプチャ技術は、一般に、種の範囲、豊かさ、多様性の推定のために種の存在を検出するだけの定性技術、またはインデックスまたは推定を可能にする半定量的および定量的な技術に分類することができます。分類グループ内の個人の豊富さと密度。
種またはコミュニティ構造の存在に関する推論のみを可能にする定性的手法は、検出確率が不明または本質的に低い検出確率を有するか、またはサンプリングされた領域の検出確率とサイズに関する推論を提供することに欠けている。これらの手法による検出確率は低いため、検出に関連する変動性は、説明変数が節足動物集団メトリックに与える影響を推測するための十分な精度を排除します。存在を推定するために使用される定性的な技術は、吸引サンプリング1、ライトトラップ2、出現トラップ3、根4の供給パターン、塩水パイプ5、餌6、フェロモン3、落とし穴トラップを含みます7、 倦怠感トラップ8、 ウィンドウトラップ9、 吸引トラップ10、 トレー11、 クモの巣12、 葉鉱山、フラス13、 節足動物胆汁14、 植生と根の損傷15.
あるいは、半定量的および定量的な技術により、研究者は指定されたサンプル領域を推定または少なくとも一貫してサンプリングし、検出の確率を推定したり、検出確率が非指向性で十分であると仮定することができます。研究者が空間的または時間的な変動を検出する能力をあいまいにする。半定量および定量的な技術は、スイープネット16、吸引または真空サンプリング17、可視節足動物18の系統的なカウント、粘着性トラップ19、様々なポットタイプのトラップ20、入り口または含む出現穴21、化学ノックダウン22、粘着性および水で満たされた色のトラップ23、および分岐袋詰めおよびクリッピング24。
最近の気候と妨害体制に対する人為的な変化は、植物群相の劇的な変化を引き起こし、植物群種組成と節足動物群間の相互作用を研究の活発な領域にしている。節足動物群が植物種組成によってどのように変化するかを理解することは、植物群コミュニティの変化による経済的および環境的影響の潜在的な影響を理解する上で重要な要素です。植物の種間の違いを検出するために十分な精度で節足動物の豊富さを定量化する半定量的または定量的な方法が必要とされています。本稿では、一般的に見られる5本の木の中で、個々の豊かさとバイオマス、多様性、豊かさの違いを特定するのに十分な精度を提供する、葉住居節足動物のインデックス作成方法について説明します。北米の南東の落葉林25.このアプローチは、人類的修飾された妨害体制による森林植物群科の種組成の変化が節足動物の組成にどのように影響するかを推測するのに十分な精度を提供した。より高い栄養性の鳥類および哺乳類の豊富さと分布に影響を与える。具体的には、Crossley et al.24で最初に説明した改変袋詰め技術を用いて、表面の密度を推定し、葉に住む節足動物を推定し、多様性、豊かさ、および多様性の違いを検出するという予測をテストした。より遅い成長より多くのメシック種に対して、より速く成長する木のより多くのキセリック種の葉の節足動物の豊富さ。この記事の目的は、この手法の詳細な手順を提供することです。
イリノイ州南部のショーニー国立森林(SNF)に関する研究を行いました。SNFは、オザークスとショーニーヒルズ自然区分26の中央ハードウッド地域に位置する115,738ヘクタールの森林です。森林は、37%のオーク/ヒッコリー、25%の混合高地の広葉樹、16%のブナ/カエデ、10%の底地の広葉樹のモザイクで構成されています。SNFは、高地のキセリック地域と砂糖カエデ、アメリカンブナ、チューリップの木(リリオデンドロンチューリフェラ)で2番目の成長オーク/ヒッコリーによって支配されています27,28.
このメソッドのサイトの選択は、スタディの包括的な目標に依存します。例えば、当初の研究の主な目的は、木のコミュニティの変化が、メシックとキセリック適応樹種群の間で葉に住む節足動物コミュニティの指標を比較することによって、より高い栄養生物にどのような影響を与えるかについての洞察を提供することでした。したがって、私たちの主な目的は、キセリックまたはメシックツリーコミュニティ内に位置する個々の木の節足動物コミュニティを定量化しました。ArcGIS 10.1.1でUSFSスタンドカバーマップ(allveg2008.shp)を使用して、オーク/ヒッコリー(キセリック)に沿って22の研究サイトを選択し、ブナ/カエデ(メシック)が支配するグラデーションを選択しました。潜在的な交絡の影響を防ぐために、リパリの地域に位置せず、≥12 ha、および隣接する高地落葉性森林生息地(すなわち、標高120m以上)に位置する、以下の基準を使用してサイトを選択しました。すべてのサイトは、丘陵地形で成熟した木>50年を含んでいたので、同様の斜面や側面を含んでいました。ブナ/カエデのサイト境界は樹木コミュニティの移行に基づいて区別されましたが、オーク/ヒッコリーサイトの境界はSNFカバーマップとArcGIS 10.1.1を使用して人工的に識別されました。すべてのサイトは、氷河されていない地形内の大きな森林ブロックでした。樹種組成の違いは、景観上の場所の違いによるものではなく、過去の土地利用(例えば、明確な切り取りや選択的収穫)を代表していた。各研究拠点の離散ポリゴン形状ファイルをハンドヘルド・グローバル・ポジショニング・システム(GPS)にアップロードし、樹種の組成を検証することで、地図を根拠にして地図を作成しました。各部位でサンプリングポイント(n = 5)をランダムに選択しました。各ポイントで、2014年5月23日から6月25日の間に0600−1400時間の3本の木をサンプリングしました。サンプルツリーを見つけるために、我々は、サンプルに十分な低い枝を持つ成熟した木(>20 cm d.b.h.)が見つかるまで、植生点から30メートルの半径に外側に検索しました。典型的には、関心のある5つの属(エイサー、カリヤ、ファグス、リリオデンドロン、ケルカス)の3つの成熟した木をサンプリングしました。

<table><tbody><tr><td>13ガロンのゴミ袋</td>う<td>れしい</td><td>78374</td><td></td></tr><tr><td>アルミニウム棒</td><td>グレイン</td><td>ジャー48ku20</td><td></td></tr><tr><td>剪定ばさみバー</td><td>トレット樹木医供給</td><td>pp-125b-2stick</td><td></td></tr><tr><td>伸縮ポール</td><td>BES</td><td>TPF620</td><td></td></tr><tr><td>トマトケージ</td><td>ギルバートとベネット</td><td>42インチ亜鉛メッキ</td><td></td></tr></tbody></table>

葉住まいの節足動物を定量化する方法

A Method for Quantifying Foliage-Dwelling Arthropods

地上節足動物は、私たちの環境で重要な役割を果たしています。正確なインデックスまたは密度の推定を可能にする方法で節足動物を定量化するには、高い検出確率と既知のサンプリング領域を持つ方法が必要です。ほとんどの記述方法は、種の存在、豊かさ、多様性を記述するのに十分な定性的または半定量的な推定値を提供しますが、十分に一貫した検出確率と既知または一貫性のあるサンプリング領域を提供する方法はほとんどありません。環境変数、空間変数、または時間変数間の豊富さの差を検出するのに十分な精度を持つインデックスまたは推定値。葉や枝の端を袋に入れて固め、袋詰めされた材料を切り取って冷凍し、以前に凍結した材料を水中ですすいで、樹皮から節足動物を分離し、定量化する方法について説明します。我々が示すように、この方法は、空間的、時間的、環境的、および生態学的変数が節足動物の豊かさと豊かさにどのように影響するかをテストし、記述するのに十分な精度で葉に住む節足動物を定量化するために、景観スケールで使用することができます。この方法により、南東部の落葉林で一般的に見られる樹木の5generaの中で、葉に住む節足動物の密度、豊かさ、多様性の違いを検出することができました。

5つの木群を構成する323本の個々の木から626個のサンプルを採取しました。採取した分岐の1メートル当たりの総節足動物バイオマスの推定値については、標準誤差は5つの樹木群の平均の12%から18%の範囲であった(表1)。この精度のレベルは、樹木群間の変動と25日付のバイオマスの二次変化を検出するのに十分であった。この手法は、5つの樹木群全体の平均多様性の3%から7%に及ぶ節足動物ギルド多様性(H')の標準的な誤差によって示されるように、ギルドの多様性を推定する際に、より精度を提供した(表1)。このレベルの精度は、5つのツリーグループ25全体の変動を検出するのに十分でした。豊かさの推定精度も、5つのツリー群の平均豊かさの3%から7%の範囲の標準的な誤差によって示されるように非常に良好であった(表1)。この精度のレベルは、樹木群間の変動、日付との二次的な関連、樹の高...

葉の枝と枝の端を袋に入れ、袋詰めされた材料を切り取って冷凍し、以前に凍結した材料を水中ですすいで、定量化のために基板から節足動物を分離することで、葉の住居節足動物を定量化する方法を説明します。

Terrestrial arthropods play an important role in our environment. Quantifying arthropods in a way that allows for a precise index or estimates of density ...

このプロトコルの主な利点は、研究者が葉から飛行と這う節足動物の両方をキャプチャできることです。木にはこのテクニックを使っていますが、茂みや低木にも使えます。活発な節足動物が捕獲を逃れないように、葉を邪魔することなく枝を素早く袋詰めする練習に注意してください。この手順を開始するには、ボルトカッター、大型ワイヤカッター、または電動研削ディスクを使用して、30センチメートルのワイヤートマトケージの底面の3分の1を取り除き、約55センチメートルの長さになるようにします。次に、2つの50センチメートルのブレースをアルミニウムチューブから切断するか、同様に半硬質材料をトマトケージの最大端の両側の取り付け棒およびブレースとして使用する。端から38センチメートルで、卓上の悪徳やチャネルロックなどのより大きな把握ツールを使用して、ブレースを約30度の角度に曲げてください。各取り付けロッドの長い端を、ジップタイでトマトケージの反対側の端に取り付けます。ダクトテープまたは電気テープを使用して、このアタッチメントをサポートし、テープがケージとロッドの少なくとも6センチメートルに巻き付けられていることを確認します。ジップタイで拡張可能なポールの端の反対側に各ロッドの反対側を取り付けます。ダクトテープまたは電気テープを使用してこの取り付けをサポートし、テープを複数回巻き付け、棒と棒を少なくとも6センチメートル重ねるようにしてください。ケージが取り付けられている場合は、ケージの開口部がテレスコープポールの端に接触していることを確認します。次に、テープを使用して、ケージをポールの端に直接取り付けます。フックとループファスナーストリップを、以前に取り付けたポールからケージの開口部に90度差し込み式で取り付けます。まず、2枚のフックとループファスナーをバッグの外側の開口部に取り付け、ケージの開口部に取り付けられたフックとループファスナーに合わせます。バッグが挿入され、バッグの引っ張りストリングに開口部が取り付けられたときにフックとループファスナーが整列していることを確認してください。ワイヤートマトケージに49リットルのキッチンゴミ袋を挿入します。袋の底のそれぞれの側に3つのゲータークリップを均等に分散させ、袋がケージに対して保持されるように、クリップをバッグとワイヤーケージの両方に取り付けます。バツ開口部のゲータークリップの向きを、ポールアタッチメントの位置とは反対の伸縮極に平行にドローストリングに取り付けます。ポールに最も近いバッグのドローストリングにパラコードを取り付けます。プラスチックまたは硬いゴム製チューブを4センチメートルのセクションに4個カットし、ダクトテープまたは電気テープで4つの場所に取り付けます。まず、トマトケージに最も近いポールの端から約0.5メートルのポールの伸びる部分に配置する必要があります。残りの3つは、下部セクションの上から約5センチメートルから始まるポールの下のセクションに沿って等距離に配置する必要があります。プラスチックチューブを通して袋に取り付けられていないパラコードの端を通します。この後、プラスチック製のチューブインサートを通して両方のパラコード文字列を一緒に実行し、所定の位置に保持します。各サンプル ツリーに対して、乱数ジェネレーターを使用して、最大長で延長された場合に、拡張ポールの高さ以内にあるサンプルの高さを選択します。乱数発生器を使用して、木の幹からのサンプル距離を選択し、葉に対する妨害を最小限に抑えてバッグに収まる枝を特定します。そして、生成された数字に基づいてトランクからの適切な高さと距離です。サンプリングポールを目的のブランチと平行な高さに上げます。すぐに枝の上に袋をスライドさせ、すぐに袋を密封するためにドローストリングに取り付けられているパラコード文字列を引っ張ります。2人目の人に、延長ポールプルーナーを使用して、バッグの開口部に隣接する場所で枝をクリップしてもらいます。その後、慎重に地面にサンプルバッグを持参し、迅速に袋のドローストリングを閉じて結びます。実験室の節足動物の分析を行う準備ができるまで、袋に入れられた枝を冷凍庫に保管してください。冷凍バッグとブランチを直立に持ち、袋の中にいる間にサンプルブランチを振って節足動物を袋に取り出します。慎重に袋から枝を取り出し、大きなコレクションパンですすいで残っている節足動物を取り除きます。次に、袋に残っている材料を回収パンに空にし、非節足動物の破片を取り除きます。節足動物を所望の分類群に分けます。幼虫と成人の違いに関する。必要に応じて節足動物を定量化します。バイオマスが関心を持つ場合は、節足動物の長さを測定し、公開された長さの質量表を使用してバイオマスを推定します。小さな乾燥鍋で節足動物を交換してください。乾燥オーブンで45°Cで24時間乾燥し、電子バランスをとります。乾燥したオーブンで48時間45°Cで葉を乾燥させ、電子バランスで計量します。または、サンプル内のすべての木質枝の長さを測定します。代表的な研究では、5つの樹木群を構成した323本の木から626個のサンプルが収集されています。枝のメートル当たりの総節足動物バイオマスの推定のために、5つの樹木群の平均の12%から18%の標準的な誤差範囲をサンプリングした。このレベルの精度は、バイオマスの2次変化における樹木群間の変動を日付別に検出するのに十分である。この手法は、5つの樹木群の平均多様性の3%から7%の範囲の節足動物ギルド多様性の標準誤差によって示されるように、ギルドの多様性をより正確に推定する際に、より正確に提供します。このレベルの精度は、5 つのツリー グループの変動を検出するのに十分です。また、5つのツリーグループの中で3%から7%の範囲の標準誤差によって示されるように、豊かさの推定精度も非常に正確です。このレベルの精度は、ツリー グループ間の変動を識別するのに十分です。日付との二次的な関連付け、木の高さと豊かさの減少、および節足動物の豊かさと木の幹からの距離との間の肯定的な関係。アクティブな節足動物が捕獲を逃れないように、葉を乱すことなく枝を素早く囲んでください。

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