ウサギにおける完全なダクリオアデネクトー切除術を用いた重症ドライアイモデルの確立
2020年1月8日
すべての眼窩涙腺を外科的に除去することによってウサギの慢性ドライアイ病を誘発する新しいアプローチが提示される。この方法は、以前に報告されたものとは異なり、涙液生理学および病態生理学および眼科治療の研究に適した水性欠乏ドライアイの安定した、再現可能なモデルを生成する。
ウサギの完全なダクリロアデノクトミーのための安全で再現可能な方法は、病気生理学と治療介入の有効性を研究するのに有用な水欠乏ドライアイの一貫した状態を作成します。上方眼および涙球状腺の除去は、誘発されたドライアイの一貫性と重症度を大幅に改善し、涙液産生の代償的変化を眼表面組織に制限する。大きな血管構造に補助する軌道区画内に横たわっている涙腺組織。
解剖学に精通することは、大きな助け除去を助け、外科的合併症を防ぐのに役立ちます。涙腺システムの除去は、複数の切開位置と外科面を含む適度に複雑な技術であり、視覚的に最もよく実証される。ニクチタリング膜を二国間除去することから始めます。
マイクロピペットを使用して、25マイクロリットルの防腐剤を含まない1%リドカインを目に塗布し、まぶたの間に蓋鏡を挿入します。0.3鉗子で頂点のニクチタリング膜をつかみ、角膜表面の上に引っ張ります。その後、約0.3ミリリットルの1%リドカインを1〜100,000エピネフリンで26ゲージ針を使用して、結合空間に注入します。
これは、ニタチオン膜の上に控えめな大きさのブレブを形成します。ワイヤー鏡を取り外し、リドカインとエピネフリンが有効になるまで約5分待ちます。一方、他の目にも同様の手順を実行します。
準備ができたら、ワイヤー鏡を交換し、角膜表面の上にニクチタリング膜を鉗子でつかんで伸ばし、トノトミーハサミでベースの膜を切断します。ワイヤー鏡を取り除き、角膜表面に局所抗生物質軟膏を置きます。眼窩上のラクリマル腺、またはOSLGを除去するために、2%リドカインと0.5%Bupivacaineを有する1〜100,000エピネフリンの50〜50混合物で切開部位に浸透させる。
次に、電気外科ユニットに接続されたコロラド針を使用して、外科用マーキングに沿って皮膚切開を行います。典型的な設定は、カットと凝固の両方のための10と15単位の間であるが、臨床応答に応じて、異なる場合があります。皮膚切開に対する緊張を適用して組織を分離し、下層の前頭切開筋線維を露出させる。
次に、地球に内側圧力を加え、正面切断筋線維に内側または深い内側に位置する膨らんだ組織と見なされるOSLGの視覚化を支援する。必要に応じて、筋線維を横に動かして下地の不安を露呈し、カスプロートミーハサミ付きの歯付鉗子を使用して、OSLG上の繊維状カプセルを穏やかに引き込んでカットします。鉗子を使用して、OSLG腺組織をつかみ、手渡し技術を使用して優れたインシシュレーターを通してそっと引っ張ります。
小さな繊維バンドをカプトロトミーハサミで切り、軌道上の位置から腺を解放します。腺が取り除かれたら、コロラド針で寛大な焼灼剤を使用して組織チャーを作成し、可能な限り深くインチャー内の腺を切り裂きます。これは後で、パルペブラル上手蓋腺、またはPSLGの除去中に確認ランドマークとして機能します。
PSLGを取り外すために、上まぶたをコットンチップアプリケーターでエバートし、PSLGの球根の端を見えるようにします。PSLGを歯付き鉗子で引き締め、カプトロトミーはさみを使用してベースの周りを切り取り、下のタルサスから分離しながら、まぶたの表面から引き込みます。単極性焼灼で中等度の出血をコントロールする。
分離された組織面に連続的なトラクションを適用して、優れた涙腺(SLG)の主排泄管も同様に除去できるようにします。より大きな下層涙腺(ILG)を切除するには、コロラド州の微小解剖針を使用して皮膚、下のパルペブラの下圧筋、ザイゴマティック筋肉のザイゴマチックまたは唇部分、およびオービクラリス筋を切開および分離する。単極性焼灼で止止を維持する。
切開部は皮膚マーキングを通してより深く運ばれるように、マッセターの筋肉のザイゴマ骨または表面的な部分の上に魅惑的な平面の光沢を探します。この時点で、組織面を維持し、軌道縁に向かって優れた方向に運びます。ILGを取り巻くカプセルを識別して切開し、ILGの日焼け組織を同定する。
ILGヘッドの前部のみが見えますが、接合アーチの下を通過して尾に移行するので、内側に従うことができます。テノトミーはさみを使用して、下縁に沿って軌道中隔を切断し、ILG尾のより後部を露出させます。ティッシュプレーンが特定されたら、切開線全体に沿って後述的に解剖を延長する。
ILGが頸動脈の枝から受け取る血液供給を損傷しないように細心の注意を払います。ILG 全体が公開されたら、削除します。尾が後カンサスの下で終了した場合は、切除方向の原稿を参照してください。
大きなサイズのため、腺を半分に切り、尾とは別に頭を取り除くことをお勧めします。腺を取り除いた後、複数の中断された5-0エチレンテレフタレート縫合糸で深い結合組織面を閉じます。次に、0.3の組織鉗子とニードルドライバーを用いて、6-0ポリグラクティム910縫合を実行して表面筋および皮膚を閉じる。
この外科的アプローチは、臨床および検査用マーカーのパネルで確認されたドライアイ病を誘発するためにうまく使用されている。観察の8週間の間に、平均涙の分裂時間は術前レベルの75%以上によって抑制された。同様に、シルマーの涙液検査は約50%減少し、涙の浸透率はドライアイ病と一致する10%増加した。
上方眼涙腺が最初に除去された場合、完全な外科的切除が最も簡単である。すべての涙腺組織のマージンを完全に露出することが重要です。.
概要
本研究では、眼窩涙腺を完全に摘出することにより、ウサギに慢性ドライアイを誘発する新しい手術方法を提示します。このアプローチにより、水様成分欠乏性ドライアイの安定かつ再現性のあるモデルを構築でき、涙の生理学的研究や治療的介入の研究を促進することが可能となります。
研究の主要構成要素
科学分野
- 神経科学
- 眼科学
- 病態生理学
背景
- 慢性のドライアイ症候群は、涙の産生に影響を及ぼす重要な眼科的疾患である。
- ドライアイの研究における既存のモデルには、再現性に限界がある。
- 効果的な治療法を開発するためには、涙の生理学的メカニズムを理解することが不可欠である。
- ウサギモデルは、人間と解剖学的な類似点があるため、眼科研究で一般的に用いられている。
研究目的
- 水欠乏性ドライアイの信頼性の高いモデルを構築すること。
- ドライアイ症候群に関連する生理学的変化を調査すること。
- 潜在的な治療介入の有効性を評価すること。
使用した手法
- ウサギにおける両側の完全涙腺摘出術。
- 局所麻酔薬の使用および涙腺摘出のための外科的手法。
- 術後の涙液産生量および眼表面の健康状態のモニタリング。
- 8週間にわたるドライアイ疾患の臨床マーカーの評価。
主な結果
- 手術後、平均涙液層破綻時間は75%以上減少した。
- シルマー涙液量試験の結果、涙液分泌量が50%減少した。
- 涙液浸透圧が10%上昇し、ドライアイの発症が示された。
- 本手術法は安全であり、再現性があることが証明された。
結論
- この外科的アプローチにより、ウサギにおいて慢性ドライアイ症を成功裏に誘発できる。
- このモデルは、今後の涙液生理学の研究に活用可能である。
- ドライアイ症に対する新しい治療戦略を検証するためのプラットフォームとなる。
よくある質問
業界における重要性
ウサギの完全涙腺摘出による再現性のある水液欠乏性ドライアイモデルの確立は、前臨床眼科研究における重要な欠落を埋めるものである。このモデルにより、涙液産生および眼表面の恒常性を標的とする治療候補薬のメカニズム的なリスク低減が可能となる。8週間にわたる安定性は、創薬およびトランスレーショナルリサーチのパイプラインにおける長期的な有効性試験をサポートする。
バイオファーマR&Dにおける戦略的応用
初期発見およびターゲット検証
- 科学的価値： 水性涙液欠乏症における涙腺依存性パスウェイの検証を可能にする。
- 運用的価値： 涙の生理機能におけるターゲットエンゲージメントを評価するための、一貫した表現型を提供する。
- 科学的価値： 涙液分泌および眼表面の完全性に関与するターゲットの機能的妥当性確認を支援する。
スクリーニングおよびアッセイ開発
- 科学的価値：涙液破止時間、シルマー試験、および涙液浸透圧などの定量可能なエンドポイントを算出し、アッセイの標準化を可能にする。
- 運用上の価値：再現性のあるベースライン測定を提供し、研究間での信頼性の高い化合物スクリーニングを可能にする。
- 科学的価値：水様眼涙欠乏性のドライアイメカニズムに対応した、バイオマーカー整合アッセイの開発を促進する。
トランスレーショナル・前臨床研究
- 科学的価値：ヒトの水液欠乏性ドライアイの特徴を再現し、前臨床試験の結果のトランスレーショナルな妥当性を高める。
- 運用的価値：疾患表現型の持続的な観察を通じて、リスク調整後の開発進展に関する意思決定を支援する。
- 科学的価値：涙液層の安定性と眼表面の健康に対する治療的介入の効果を、経時的に評価することを可能にする。
パイプラインおよびワークフローの統合
このモデルは、標的バリデーションから前臨床での有効性試験に至る創薬の連続的なプロセスに適合し、特に涙腺機能や涙液層の安定性を標的とするバイオ医薬品および低分子化合物の開発に適しています。
- 探索生物学：涙腺切除の効果および涙液産生の代償機構に関する仮説検証を支援します。
- スクリーニング：化合物の評価における定量的なリードアウトとして、涙液量および浸透圧の標準化された評価を可能にします。
- 分析：涙液層破壊時間とシルマーテストの経時的データを提供し、用量反応およびタイムコース分析を支援します。
- トランスレーショナル研究：臨床的なドライアイのバイオマーカーと一致しており、ヒトの水欠乏性眼乾燥症への外挿を容易にします。
- 企業内での再利用：眼表面疾患における複数の治療プログラムに活用可能な、再利用可能な外科的プラットフォームとなります。
運用および企業への影響
- 科学的価値： 制御された涙腺除去により、ドライアイの病態生理におけるメカニズムの曖昧さを軽減する。
- 運用的価値： 研究所間および研究期間全体における再現性と標準化を確保する。
- 戦略的価値： 効能試験における生物学的ばらつきを最小限に抑えることで、go/no-go判断の信頼性を向上させる。
- ポートフォリオへの影響： 水層涙液欠乏経路を標的とする候補物質のリスクベースの優先順位付けを可能にする。
実施上の検討事項
- 顕微手術の手技およびウサギの眼球解剖学に関する専門知識が必要です。
- 涙腺の切除および閉鎖には、電気焼灼器および顕微縫合器具への依存を伴います。
- 涙液層および眼表面パラメータに関する標準化された術後モニタリングプロトコルが必要です。
- 他の種や疾患変異体へ応用する場合、適応に関する検討が必要です。
- 水層欠乏性のメカニズムに限定されており、修正なしでは蒸発性または炎症性のドライアイ亜型には適していません。
