ウサギにおける完全なダクリオアデネクトー切除術を用いた重症ドライアイモデルの確立
January 8th, 2020
すべての眼窩涙腺を外科的に除去することによってウサギの慢性ドライアイ病を誘発する新しいアプローチが提示される。この方法は、以前に報告されたものとは異なり、涙液生理学および病態生理学および眼科治療の研究に適した水性欠乏ドライアイの安定した、再現可能なモデルを生成する。
ウサギの完全なダクリロアデノクトミーのための安全で再現可能な方法は、病気生理学と治療介入の有効性を研究するのに有用な水欠乏ドライアイの一貫した状態を作成します。上方眼および涙球状腺の除去は、誘発されたドライアイの一貫性と重症度を大幅に改善し、涙液産生の代償的変化を眼表面組織に制限する。大きな血管構造に補助する軌道区画内に横たわっている涙腺組織。
解剖学に精通することは、大きな助け除去を助け、外科的合併症を防ぐのに役立ちます。涙腺システムの除去は、複数の切開位置と外科面を含む適度に複雑な技術であり、視覚的に最もよく実証される。ニクチタリング膜を二国間除去することから始めます。
マイクロピペットを使用して、25マイクロリットルの防腐剤を含まない1%リドカインを目に塗布し、まぶたの間に蓋鏡を挿入します。0.3鉗子で頂点のニクチタリング膜をつかみ、角膜表面の上に引っ張ります。その後、約0.3ミリリットルの1%リドカインを1〜100,000エピネフリンで26ゲージ針を使用して、結合空間に注入します。
これは、ニタチオン膜の上に控えめな大きさのブレブを形成します。ワイヤー鏡を取り外し、リドカインとエピネフリンが有効になるまで約5分待ちます。一方、他の目にも同様の手順を実行します。
準備ができたら、ワイヤー鏡を交換し、角膜表面の上にニクチタリング膜を鉗子でつかんで伸ばし、トノトミーハサミでベースの膜を切断します。ワイヤー鏡を取り除き、角膜表面に局所抗生物質軟膏を置きます。眼窩上のラクリマル腺、またはOSLGを除去するために、2%リドカインと0.5%Bupivacaineを有する1〜100,000エピネフリンの50〜50混合物で切開部位に浸透させる。
次に、電気外科ユニットに接続されたコロラド針を使用して、外科用マーキングに沿って皮膚切開を行います。典型的な設定は、カットと凝固の両方のための10と15単位の間であるが、臨床応答に応じて、異なる場合があります。皮膚切開に対する緊張を適用して組織を分離し、下層の前頭切開筋線維を露出させる。
次に、地球に内側圧力を加え、正面切断筋線維に内側または深い内側に位置する膨らんだ組織と見なされるOSLGの視覚化を支援する。必要に応じて、筋線維を横に動かして下地の不安を露呈し、カスプロートミーハサミ付きの歯付鉗子を使用して、OSLG上の繊維状カプセルを穏やかに引き込んでカットします。鉗子を使用して、OSLG腺組織をつかみ、手渡し技術を使用して優れたインシシュレーターを通してそっと引っ張ります。
小さな繊維バンドをカプトロトミーハサミで切り、軌道上の位置から腺を解放します。腺が取り除かれたら、コロラド針で寛大な焼灼剤を使用して組織チャーを作成し、可能な限り深くインチャー内の腺を切り裂きます。これは後で、パルペブラル上手蓋腺、またはPSLGの除去中に確認ランドマークとして機能します。
PSLGを取り外すために、上まぶたをコットンチップアプリケーターでエバートし、PSLGの球根の端を見えるようにします。PSLGを歯付き鉗子で引き締め、カプトロトミーはさみを使用してベースの周りを切り取り、下のタルサスから分離しながら、まぶたの表面から引き込みます。単極性焼灼で中等度の出血をコントロールする。
分離された組織面に連続的なトラクションを適用して、優れた涙腺(SLG)の主排泄管も同様に除去できるようにします。より大きな下層涙腺(ILG)を切除するには、コロラド州の微小解剖針を使用して皮膚、下のパルペブラの下圧筋、ザイゴマティック筋肉のザイゴマチックまたは唇部分、およびオービクラリス筋を切開および分離する。単極性焼灼で止止を維持する。
切開部は皮膚マーキングを通してより深く運ばれるように、マッセターの筋肉のザイゴマ骨または表面的な部分の上に魅惑的な平面の光沢を探します。この時点で、組織面を維持し、軌道縁に向かって優れた方向に運びます。ILGを取り巻くカプセルを識別して切開し、ILGの日焼け組織を同定する。
ILGヘッドの前部のみが見えますが、接合アーチの下を通過して尾に移行するので、内側に従うことができます。テノトミーはさみを使用して、下縁に沿って軌道中隔を切断し、ILG尾のより後部を露出させます。ティッシュプレーンが特定されたら、切開線全体に沿って後述的に解剖を延長する。
ILGが頸動脈の枝から受け取る血液供給を損傷しないように細心の注意を払います。ILG 全体が公開されたら、削除します。尾が後カンサスの下で終了した場合は、切除方向の原稿を参照してください。
大きなサイズのため、腺を半分に切り、尾とは別に頭を取り除くことをお勧めします。腺を取り除いた後、複数の中断された5-0エチレンテレフタレート縫合糸で深い結合組織面を閉じます。次に、0.3の組織鉗子とニードルドライバーを用いて、6-0ポリグラクティム910縫合を実行して表面筋および皮膚を閉じる。
この外科的アプローチは、臨床および検査用マーカーのパネルで確認されたドライアイ病を誘発するためにうまく使用されている。観察の8週間の間に、平均涙の分裂時間は術前レベルの75%以上によって抑制された。同様に、シルマーの涙液検査は約50%減少し、涙の浸透率はドライアイ病と一致する10%増加した。
上方眼涙腺が最初に除去された場合、完全な外科的切除が最も簡単である。すべての涙腺組織のマージンを完全に露出することが重要です。.
概要
この研究では、眼窩涙腺の完全摘出によりウサギに慢性乾燥性眼疾患を誘発する新しい手術方法を提示します。このアプローチは、水性欠乏性乾燥性眼の安定した再現可能なモデルを作り出し、涙液の生理学と治療介入の研究を促進します。
研究の主要構成要素
科学の分野
- 神経科学
- 眼科学
- 病態生理学
背景
- 慢性乾燥性眼疾患は涙液の生成に影響を与える重要な眼疾患です。
- 乾燥性眼を研究するための既存のモデルには再現性に限界があります。
- 涙液の生理学を理解することは、効果的な治療法を開発する上で重要です。
- ウサギモデルは、解剖学的に人間に類似しているため、眼の研究でよく使用されています。
研究の目的
- 水性欠乏性乾燥性眼の信頼できるモデルを確立すること。
- 乾燥性眼疾患に関連する生理学的変化を調査すること。
- 潜在的な治療介入の有効性を評価すること。
使用した方法
- ウサギの両眼に完全な涙腺摘出術を実施。
- 腺の除去に局所麻酔薬と外科的技術を使用。
- 手術後の涙液生成と眼表面の健康状態のモニタリング。
- 8週間の期間にわたる乾燥性眼疾患の臨床マーカーの評価。
主な結果
- 平均涙液破壊時間は手術後75%以上減少しました。
- シルマーの涙液検査結果は涙液生成の50%減少を示しました。
- 涙液の浸透圧は10%増加し、乾燥性眼疾患を示しました。
- この手術方法は安全で再現可能であることが証明されました。
結論
- この手術アプローチは、ウサギに慢性乾燥性眼疾患を成功裏に誘発します。
- このモデルは涙液の生理学に関する将来の研究に利用できます。
- 乾燥性眼疾患の新しい治療戦略をテストするためのプラットフォームを提供します。
よくある質問
Executive Industry Relevance
The establishment of a reproducible aqueous-deficient dry eye model via complete dacryoadenectomy in rabbits addresses a critical gap in preclinical ophthalmic research. This model enables mechanistic de-risking of therapeutic candidates targeting tear production and ocular surface homeostasis. Its stability over eight weeks supports longitudinal efficacy studies in discovery and translational pipelines.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Scientific Value: Enables interrogation of lacrimal gland-dependent pathways in aqueous tear deficiency.
- Operational Value: Provides a consistent phenotype for evaluating target engagement in tear physiology.
- Scientific Value: Supports functional validation of targets involved in tear secretion and ocular surface integrity.
Screening & Assay Development
- Scientific Value: Generates quantifiable endpoints including tear break-up time, Schirmer’s test, and tear osmolarity for assay standardization.
- Operational Value: Delivers reproducible baseline measurements enabling reliable compound screening across studies.
- Scientific Value: Facilitates development of biomarker-aligned assays for aqueous-deficient dry eye mechanisms.
Translational & Preclinical Research
- Scientific Value: Recapitulates human aqueous-deficient dry eye features, enhancing translational relevance of preclinical findings.
- Operational Value: Supports risk-adjusted advancement decisions through sustained disease phenotype observation.
- Scientific Value: Enables evaluation of therapeutic interventions on tear film stability and ocular surface health over time.
Pipeline & Workflow Integration
This model fits within the discovery continuum from target validation through preclinical efficacy testing, particularly for biologics and small molecules targeting lacrimal gland function or tear film stability.
- Discovery Biology: Supports hypothesis testing on lacrimal gland ablation effects and compensatory mechanisms in tear production.
- Screening: Enables standardized assessment of tear volume and osmolarity as quantitative readouts for compound evaluation.
- Analytics: Provides longitudinal data on tear break-up time and Schirmer’s test to support dose-response and time-course analyses.
- Translational Research: Aligns with clinical dry eye biomarkers, facilitating extrapolation to human aqueous-deficient disease.
- Enterprise Reuse: Represents a reusable surgical platform for multiple therapeutic programs in ocular surface disease.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Reduces mechanistic ambiguity in dry eye pathophysiology through controlled lacrimal gland removal.
- Operational Value: Ensures reproducibility and standardization across laboratories and study timelines.
- Strategic Value: Improves go/no-go decision confidence by minimizing biological variability in efficacy studies.
- Portfolio Impact: Enables risk-based prioritization of candidates targeting aqueous tear deficiency pathways.
Implementation Considerations
- Requires expertise in microsurgical techniques and rabbit ocular anatomy.
- Dependence on electrocautery and microsuturing instrumentation for gland excision and closure.
- Necessitates standardized postoperative monitoring protocols for tear film and ocular surface parameters.
- Involves adaptation considerations when translating to other species or disease variants.
- Limited to aqueous-deficient mechanisms; not suitable for evaporative or inflammatory dry eye subtypes without modification.
